微波辅助提取叶下珠中多糖工艺研究

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1、微波辅助提取叶下珠中多糖工艺研究叶下珠为大戟科叶下珠属植物，叶下珠属植物全世界有600多种，中国叶下珠属植物有33种4个变种。主要分布于长江以南诸省。叶下珠中多糊含量丰富.研究表明多糖具有促进机休免疫力、抗菌、抗病祈、抗寄生虫、抗肿瘤、抗衰老、抗炎、降低血脂以及改善动物生产性能等•系列作用卜叫引起国内专家对该属植物的关注和研究兴趣°叶下珠多糖的传统提取方法是热水浸提*叫此方法虽简单易操作，但是捉取效率低，提取时间长°现在较先进的提取方有超声波提取⑹和微波提取⑺。本文选择微波强化固液浸取工艺,利用微波辅助提取叶下珠中的多糖，此工艺具有设备简单、提取率高、

2、节省溶剂、节省时间、节能、不产生噪音和污染等众多优点，经济和社会效益竝著。1材料与方法L1实验材料实验所用叶下珠全草是由四川省自贡市叶下珠某种植基地提供，在60C烘干粉粹后备用a1.2仪器与试剂循环水亢空泵,堂压遨波萃取反应工作站.电热炉，紫外分光光度计，常规玻璃仪器等。葡萄糖，苯酚，浓硫酸，无水乙醇，蒸馆水，所有试剂均为分析纯.1.3实验步骤将叶下珠在分析天平上精确称取10.00g,放入烧杯中，虽取一定量去离子水加入烧杯浸泡叶下珠并记下时间。经过16h浸泡后，放入微波萃取反应工作站,在一定功率下提取一定的时间，然后减压过滤，除去其中的固体杂质。再将滤

3、液在电热炉上加热浓缩，便其体积小于100mL.II然冷却。待滤液冷却到室温后.将其转移到100mL的容量瓶中定容备用.待测出其多糖含量后，再将其在电热炉上浓缩到20mL左右,冷却后转移到锥形瓶。用量杯量取80mL的无水乙醇密封进行醇沉p12h后，在减压过滤器上过滤，自然风干，即得多糖粗晶。1.4叶下珠中多糖含虽检测方法1.4.1标准曲线的制作本实验用苯酚•硫駿法测定多糖的含员叫142多縉含量的测定方法将提取定容至100cnL的提取液，移取2.5mL.定容至25mL,再虽取ImL至比色管，另取】mL的xlOO%蒸馆水作为空白，分别加I入l.omL5%苯酚

4、溶液，混匀.迅速加入5.0mL浓硫酸.振摇5min后放置35min>在波长490nm处测定吸光度&多糖提取率注：A是测定的多粧叹光丿1・1.5犁因素实验依撫不同的固液比、微波提取时间和微波功率提取叶下珠多糖.计算多糖提取率。实验貝体操作参见1.3・1.6正交实验设计以多槍含就为考察指标，用正交实验法优选叶下珠多糖最佳提取匸艺。实验选取固液比（加（叶下珠粉）IV（水）》、微波提取时间、微波提取功率为爆响因素.设置3个水平•实验因素安排见表4。2结果与讨论2.1检测波长的确定X/nmffll波长拎描曲线FigJSpinningcurveofthesampl

5、e从图1中可发现吸光度有2个波峰，分别在490run和520nm处，在490nm处的吸光度大于520nm的吸光度，因此试验选择490nm处测定吸光度.2.2标准曲线的制作实验测得标准溶液吸光度分别是0.116,0.225、0.338、0.459>0.578以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标进行线性回归，得回归方程：R=0.9997A=0.5630C+0.0075o标准曲线图见图2。2.3单因素实骏结果分析2.3.1固液比对多糖提取率的彫响表］固液比对多玉提取率影响表Table1EffectofsoUd4lquldratioonpolysaccharid

6、eextractionyidd冈我比1:101:151:201:25130捉取舉/%5235.776.567.217」2设定提取时间30min,微波功率500W.固液比分别为1:10、1:15、1:20、1:25、1:30进行单因素实验,计算叶下珠多糖提取率。结果如表I所示.可见，随若提取涪剂（水〉用虽增加，有利于叶下珠充分溶胀舒展,同时也利于多糖充分溶解于水中，因此提取率逐渐增加。当固液比达到1:20时，提取率达到最髙为7.2k此时，若再增加水的用星，由于后期溶液浓缩时间加反而可能促使多糖分解，导致C/（m0mL）S2标准曲找图FigJCalibr

7、ationcurveofthepolysaccharide2.3.2提取时间对多糖提取率的影晌设定固液比120,提取功率500W,提取时间分别为20min、40min、60min、80min、lOOmin进行单因素实验，计算叶下珠多糖提取率。结果如表2所示.表2提取时间对多編提取率影响表Table2Effectofextractiontimeonpolysaccharideextractionyield提取时间/min20406080100提取牢％6.227.487.407357.14由表2可见，提取时间过短，叶下珠细胞吸水不充分，在微波辅助提取时细胞

8、里的多糖不能完全游离岀来；但提取时间超过60min时，由于溶液中微生物会大量繁殖，微生物的生长