植物油DNA的高效提取方法研究-论文.pdf

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1、2014年第39卷第1期中国油脂69植物油DNA的高效提取方法研究蔡翠霞，肖维威，吴慧慧，周琳华，吴永彬，耿启斌，马文丽(南方医科大学基因工程研究所，广州510515)摘要：针对植物油中DNA含量极低、DNA序列片段短、破坏严重的特点，以食用植物油为原料，旨在建立一种从植物油中稳定、高效提取DNA的方法。实验采用硅膜吸附柱法提取植物油基因组DNA，PCR扩增其相应内源基因进行质量鉴定，再针对通用的外源基因CaMV35S启动子进行PCR、lAMP和实时荧光PCR检测对该方法进行评价。结果表明：该方法提取的DNA质量

2、可靠，采用PCR、LAMP和实时荧光PCR技术成功地检测出了植物油中的CaMV35S启动子。因此，硅膜吸附柱法提取的植物油DNA可以作为PCR、LAMP、实时荧光PCR扩增模板用于转基因成分的检测，该方法经济、稳定、安全，为植物油的基因检测奠定了基础。关键词：植物油；DNA提取；转基因检测中图分类号：TS225．1；TQ646文献标志码：A文章编号：1003—7969(2014)01—0069—04HigheficientextractionofDNAfromplant0ilCAICuixia，XIAOWeiwe

3、i，WUHuihui，ZHOULinhua，WUYongbin，GENGQibin，MAWenli(InstituteofGeneticEngineering，SouthernMedicalUniversity，Guangzhou510515，China)Abstract：Accordingtothefeaturesoflowcontent，shortsequencefragmentandseriousdestructionofDNAinplantoil，astableandhighefficientextrac

4、tionmethodofDNAfromedibleplantoilwasestab-lished．DNAwasextractedfromplantoilsusingsiliconfilmadsorptioncolumnmethod，andtheendoge-nousgenesintheDNAwereamplificatedbyPCRtoidentifyDNAquality，thentheexogenousgenepro—moterCaMV35SwasdetectedbyPCR，LAMPandreal—timefl

5、uorescentPCRtoevaluatethemethod．TheresultsshowedthattheDNAextractedbythemethodhadreliablequalityanditwassuccessfultode—tectthepromoterCaMV35SbyPCR，LAMPandreal—timefluorescentPCR．TheDNAextractedfromplantoilbythemethodcouldbeusedastheamplificationtemplateofPCR．

6、LAMPandreal—timefluo-rescentPCRforgeneticallymodifiedingredientsdetection．Themethodhaditemsofstableness，effective-nessandsafetywhichcouldprovidethefoundationforplantoilgenedetection．Keywords：plantoil；DNAextraction；transgenedetection自20世纪80年代世界第一例转基因作物诞生作物存在的安

7、全性问题使得转基因产品的标签问题以来，转基因作物在提高产量、改良品质、抗逆能力成为公众关注的热点。为了保证消费者的知情等方面越来越显示出巨大作用，但是由于转基因权和选择权，已有30多个国家制定了相应的法律法规对转基因作物及其衍生产品进行标签J。因此，收稿日期：2013—04—13；修回日期：2013—09—24建立合适的检测手段以确定食品中是否含有转基因基金项目：国家公益性行业科研专项(200910265)；广东省科成分已成为当务之急。技计划项目(2008BO80701027)以食用植物油为原料进行DNA分子生物

8、学研作者简介：蔡翠霞(1985)，女，硕士研究生，主要从事转基因究的关键是能否获得高质量的油脂DNA。经过深食品检测工作(E。mail)ccxdyx．1ove@163．com。通信作者：肖维威，副教授(E—mail)xweiwei@fimmu．com；马加工，植物油DNA含量较低，且受破坏较严重，提取文丽，教授，博士生导师(E—mail)wenli668@gmail．co