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《《钩端螺旋体赖型017鞭毛钩相关蛋白K基因的克隆及序列分析》.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、.。、第6卷第1期(专辑)生命科学研究vol6N1(S甲pl)a2002年5月UefScieneeResearchMyZX()2钩端螺旋体赖型017鞭毛钩相关蛋白K基因的克隆及序列分析于向华,鲍朗,谢勇恩,张会东,(四川大学华西医学中心基础与法医学院感染免疫研究室中国四川成都61X(只1):,摘要在以抑制消减杂交比较强毒株赖型钩端螺旋体017株和无毒株双曲钩体atP`工株的基因组差异时,获得了一系列仅存在于强毒株而无毒株缺如的差异片段选取差异片段Af325810设计特异性引物以赖型钩,,,,端螺旋
2、体017株基因组DNA为模板进行巢式CPR扩增CPR纯化产物T载体克隆选取阳性克隆测序进一,,步进行生物信息学分析以获得强毒株赖型钩端螺旋体017株特有的毒力相关基因DOTBLOT显示其在钩端,螺旋体各株间有不同分布CPR扩增得到了产物为Zkb大小的DNA片段序列分析结果显示得到了问号钩端.,螺旋体赖型017株的鞭毛钩相关蛋白K基因的上游序列为进一步探索钩端螺旋体的致病机制莫定了基础:;K;关键词钩端螺旋体巢式cP;R鞭毛钩相关蛋白(K鲍)生物信息学:::一一一中图分类号吧75文献标识码A文章编号
3、1X()77847(2X()2)印010107一AmPliifcationandAnalysisofFlagellaHookAssociatedProteinGeneofLePotsPiarnIetgansSeorval切ior一,,一,一anguangngenuiongYUXihBAO肠XIEOYZHANGHde:`;e,`L,。,;:。,:e,`e了比c,``,(Ro,幼i`ofl!fe。沁。d介。亡旋Ilii。以ericM七di￡、s心肠i,sri勺acr叨诫of而oFihclJz`,,n,
4、以eI61X(只lsic人。ian)酬以Abset:Aseiresofdierntialentswhiehwe二foundonlyinPathonieto胡iarselaliwhenweatrfe.afl脚罗坤vaor一ePdthegeniCdiernee。fpahto罗nietiar:ealaliandnonpahtonictse户azoeomaeromfe坤osrvor罗坤osniarvaor工.,-usingsubr.aletivesupperssivehybirdizationHteehn
5、ieAeeodringottheseleetedA邓25810theunknoer(S)卿wn.gionofhtisgenegnent15二npliifedbyusingnestedPCReultedpuetwaspuirifedandelonedintoTfluhTesrdID.,-veetoreneseeeteeonewsequeneeoiatiesyzeDototsse5ntstirbuththtldlasdandbifonmranaldBlhowhter1difeerdi..e-ionso
6、ngleptosPi.laA2kbDNAfrag刀entsonpliifedesequeneeanalysisshdthatthuPsterseamwahToweam一,-queneeofflalahokassociatedporteinK罗newas邵twhiehlaidsolidfoundationforfurthererseal℃hinpatho罗l.nie:chanismof及ptiar罗enosn:一KeyrZ丈岁tiar;nestedpolynlelaseehaineraeti:fll
7、lahokassociatedportein:bioiatieswodsosPonagefonmr.,,:乙ice`ca2101一1(毋cS二丑hcrX()26(S呷1)07)一一一一收稿日期:201120;3:2X(〕2以巧修回日期:基金项目国家自然科学从金资助狈日(307肠70)一,,,,一,,,:_;,作者简介于!;iJ华(1976)男山东新泰人硕士主要从小感染免疫研究L作鲍朗(1954)男江苏宝应人华西医利大学教授.’一一:+一,a:,,et,:,15Ue「卜博l生导帅I七l860285,
8、)1E川ilb。I山g@w司071生命料学典研究年,,、,lh::随着人类基因组的解读致病微生物新基因37℃消化用酚氯仿异戊醇(2524l)抽提..,一,sp的研究成为热点钩端螺旋体(简称钩体下同)病DNA经ET(irTHdEDTA7H4)透析保存于4.,是一种全球性的人兽共患病对我国农业人口和℃备用...农牧经济危害严重致病钩端螺旋体的毒力基因122选取合适的限制性内切酶.,ai。。in迄今未获阐明因此采用基因筛选和分析新思路根据介kar认代酬torelonigKit提供,,,,
