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1、中国中西医结合肾病杂志2013年11月第14卷第11期CJITWN,November2013,Vo1.14.No.11·955·不同病理类型肾综患者尿蛋白对肾小管上皮细胞增殖和凋亡相关蛋白Fas表达的影响木王娜娜①李雪峰①王淑君②陶静莉②刘华锋②[摘要]目的:观察不同病理类型肾病综合征(NS)患者尿蛋白对肾小管上皮细胞(RTECs)增殖和凋亡的影响,以进一步明确尿蛋白所致肾小管一间质损害的机制。方法:(1)从局灶一节段性肾小球硬化症(FSGS)、膜性肾病(MN)、微小病变肾病(MCN)三种不同病理类型的Ns患者尿液
2、中提取尿蛋白,经成份分析、灭菌等处理后以0.5ms/ml、1.0ms/ml、2ms/ml、4ms/ml、8ms/ml浓度分别刺激体外培养的HK一2细胞,另设空白对照组。(2)MI’r法检测不同病理类型Ns患者尿蛋白刺激后细胞的增殖情况。(3)乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测不同病理类型NS患者尿蛋白的细胞毒作用。(4)WesternBlot.ting法检测Fas蛋白表达。结果:各病理类型所提取的尿蛋白成分相同,主要为白蛋白、转铁蛋白、IgG等,但各病理类型组成比例不同;肾小管上皮细胞MTI?值低浓度有明显增殖作用,
3、高浓度时细胞过度增殖则导致凋亡;肾小管上皮细胞LDH释放率和Fas蛋白的表达水平随尿蛋白浓度的升高而升高;以上各项检测指标中FSGS患者尿蛋白对HK一2细胞的作用最强,MN次之,MCD最弱。结论:在体外条件下,尿蛋白对RTECs呈剂量依赖性的细胞毒作用,低剂量尿蛋白诱导RTECs异常增殖,较高剂量尿蛋白可诱导RTECs凋亡;除尿蛋白的量决定了损伤严重程度外,尿蛋白的性质也决定了损伤的严重程度。[关键词]尿蛋白肾小管上皮细胞增殖凋亡FasEfectsofDi仃erentQuafityProteinuriaonProl
4、iferationandApoptosisinHumanRenalTubularEpithelialCellsWANGNana,LIXuefeng,WANGShujun,etalDepartmentofEndocrinology,TaiheHospitalAffiliatedtoHubeiMedicalCollege.Shiyan(442Ooo)ABSTRACTObjective:Toinvestigatetheefectsofdiferentqualityproteinuriaoncellproliferatio
5、nandapoptosisinculturedhumanrenaltubularepithelialcells(HK一2).tofurtherclarifytheurineproteininducedrenaltubular—interstitialdamagemecha—nisms.Methods:Allpatientswerediagnosedbyclinicandrenalbiopsy.Urinaryproteinswereabstractedbyfractionalprecipitationmethodfr
6、omtheurineofprimarynephroticsyndromepatientswithdiferentpathologictypes,includingminimalchangedisease(MCN),membranousnephropathy(MN)andfocalsegmentalglomerularsclerosis(FSGS).sterilizationothertreatmentto0.5mg/ml,1.0ms/ml,2ms/ml,4ms/ml,8ms/mlwerestimulatedinvi
7、troconcentrationsofHK一2cells,aseparatecontrolgroup.(1),I'hecellproliferationofRTECsWasdeterminedbyMTrmethod.(2)ThecytotoxicityofproteinuriatoRTECsWasdeterminedbylactatedehydrogenase(LDH)releasetest.(3)FasexpressionofRTECsWasdetectedbyWesternBlotting.Results:Th
8、emainingredientsofabstractedurineproteinwerealbumin,transferrinandIgG,butthecompositionratioofeachtypeofpathology;tubularepithelialcellsinMrrrproliferationsignificantlylowconcentra
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