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1、白蛋白对近端肾小管上皮细胞增殖与凋亡的影响：孙良忠，岳智慧，陈述枚【摘要】【目的】探讨白蛋白对近端肾小管上皮细胞（PTCs）增殖与凋亡的影响。【方法】用不同剂量（0.1，0.5，1，5，10，30mg/mL）去脂牛血清白蛋白(dBSA)超载体外培养的NRK52E，dBSA0mg/mL作为对照。细胞增殖活性用MTS比色法检测和显微镜观察。细胞凋亡检测：荧光染料DAPI染核，DNA梯带实验，原位末端标记（TUNEL）实验和苔盼蓝染色计数。【结果】高剂量dBSA超载未完全融合NRK52E细胞144h后细胞变得更密集。MTS比色结果发现，高剂量dBSA（5、
2、10、30mg/mL）超载可明显诱导NRK52E细胞增殖，增殖活性分别为（0.700±0.045）A、（1.021±0.029）A和（1.273±0.173）A，较对照细胞（0.441±0.020）A显著升高，P均<0.05。高剂量dBSA超载的NRK52E细胞，有较多出现核碎裂和核固缩，有较强DNA梯带和原位末端标记信号。苔盼蓝染色计数发现，高剂量dBSA（5、10、30mg/mL）超载NRK52E细胞72h的死亡细胞数[（680000±28618）/mL，（970000±52915）/mL和（1132500±88954）/mL较对照的死亡细
3、胞数［（312500±28395）/mL]显著升高，P均<0.05；而且死亡细胞数呈剂量依赖性。【结论】白蛋白超载NRK52E细胞既可诱导细胞增殖，又可诱导细胞凋亡。【关键词】白蛋白;肾小管上皮细胞;细胞增殖;细胞凋亡Abstract:【Objective】Tostudytheeffectsofalbuminoverloadonproliferationandapoptosisinproximaltubularepithelialcells(PTCs).【Methods】Differentconcentrationofdelipidatedbo
4、vineserumalbumin(dBSA)rangedfrom0.1-30mg/mLg/mLascontrol.CellproliferationicroscopeandmeasuredbyOneSolutionCellProliferationAssayKit(MTSassay).Apoptosisethods:DNAladderingassay,Insituterminaldeoxynucleotidyltransferase(TdT)-mediateddUTPnick-endlabeling(TUNELassay),nucleichanges
5、munofluorecentmicroscopeafterstainedidino-2-phenylindole)andtotaldeathcellsicroscope.【Results】Underlightmicroscope,sub-confluentNRK52EcellsbecamemoreconfluentafterdBSAoverload144h.MTSassayrevealedthathigherdosagesofdBSA(5,10,and30mg/mL)overloadinducedsignificantproliferation(0.
6、700±0.045A,1.021±0.029A,and1.273±0.173A,respectively)48hourslaterinNRK52E,andg/mL)overloadNRK52Ecells,thereorecondensedorbrokennuclei,strongerDNAladdersandmorepositivesignalsinTUNELassaythanthoseinlog/mL)overloadNRK52E(680000±28618/mL,970000±52915/mL,and1132500±88954/mL,respect
7、ively)L),P<0.05;Anddeathcellsincreasedinadose-dependentmannerafterdBSAoverload.【Conclusion】AlbuminoverloadcouldinduceproliferationandapoptosisinPTCs.Keyin;proximaltubularepithelialcells;proliferation;apoptosis蛋白尿作为众多肾小球疾病的共同特点，不仅提示肾小球的损害程度，而且可能导致肾小管间质损害，促进疾病的进展[1,2]。但是蛋白尿引起肾
8、小管间质损害的机理仍未完全明了，目前也缺乏有效的预防和治疗措施[3]。白蛋白是蛋白尿的主要成分[4]。早期研
