蛋氨酸对热处理下体外培养奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡及相关基因表达的影响

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1、分类号Ｓ８２３１学＾２０１２１０５００６爲请泉毒义赛硕±学位论文蛋氨酸对热处理下体外培养奶牛乳腺上皮细胞增殖、；周ｔ及相关基因表达的影响穆甜指导教师韩兆玉副教授专业名称动物遗传育种与繁殖研究方向动物化殖化理与调控‘答辩日期二〇－－五年六月Ｍｅｔｈ－ｉｏｎｉｎｅｐｒｏｔｅｃｔｓａａｉｎｓｔｈｙｐｅｒｔｈｅｒｍｉａｉｎｄｕｃｅｄｃｅｌｌｇｉｎｕｒｉｎｃｕｌｔｕｒｅｄｂｏｖｉｎｅｍａｍｍａｒｅｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓｊｙｙ

2、ｐＢｙＭｕＴｉａｎＳｕｅｒｖ－ｐｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＨａｎＺｈａｏＹｕＡＴＨＥＳＩＳＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅＲ巧ｕｉｒｅｍｅｎｔｓＦｏｒＭａｓｔｅｒｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉｍａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＮａｎｉｎ２１００９５Ｐ

3、．．ＲＣｈｉｎａｊｇ，，ＣｏｍｌｅｔｅｄｉｎＡｐｒｉｌ２０１５ｐＣｏｍｍｅｎｃｅｍｅｎｔＪｕｎｅ２０１５原创性声明本人郑重声明，：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果，本论。除文中己经注明引用的内容外文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式标明。。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担学位论文作者（需亲笔）签名ｗａ年《月斗日学位论文版权使用授权书本学位

4、论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保巧和汇编学位论文。□〇保密，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密□＂＂（请在上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名：年／月＾曰导师（需亲笔）签名Ｗ任年ｉ月令日本研究由国家科技部奶业支撐计划（２０１２ＢＡＤ１２Ｂ００

5、）资助ＳｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅｇｒａｎｔｓｆｒｏｍＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＳｕｐｐｏｓｉｎｇＰｒｏｊｅｃｔｓｆｏｒＤａｉｒｙＩｎｄｕｓｔｒｆｒｏｍ化ｅｍｉｎｉｓｔｒｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｏｆＣｈｉｎａ（２０１２ＢＡＤ１２Ｂ００）ｙｙｇｙ目录Ｉ摘要ＡＢＳＴＲＡＣＴＩｌｌ缩略语中英文对照（Ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎ）Ｖ前胃１一第章文献综述３１．髓激３１丄奶

6、牛热应激３１．．４２热休克蛋白１．３．热休克蛋白的结构与分类４１．４Ｈ５．ＳＰ７０．５．ＨＳＰ７１０对线粒体通路的谓控６１．６．热应激对细胞的影响７２．乳腺氨基酸代谢９２丄乳腺发育与奶牛乳腺上皮细胞系的建立９．２．１２氨基酸对乳蛋白合成的影响０２．３．乳腺氨基酸的代谢１１３．蛋氨酸的抗应激作用１２３丄蛋氨酸概述１２３．２．蛋氨酸与乳腺上皮细胞１４３．３．蛋氨酸与细胞应激１４二章、１７第蛋氨酸对热处理及非热处理奶牛

7、乳腺上皮细胞增殖抗氧化性能的影响．１材料与方法１７１丄１试验地点及时间７１．２．试验材料与方法１８１．３．１８试验动物１．４．试剂１８１．５．主耍仪器１８．１２试验方法８２丄奶牛乳腺上皮细胞的培养１８２２１９．．乳腺上皮细胞的纯化、传代２．３１１９．奶牛乳腺上皮细胞的角蛋白８的鉴定２．４．实验分组及处理２０２．５．ＭＴＴ法测蛋氨酸对热应激Ｔ乳腺细胞增旌的影响２０２．６．２１奶牛乳腺上皮细胞自由甚的检测２．７．２奶牛乳腺上皮细

8、胞抗氧化酶活性测定１３．２２数据分析ｉ蛋氨酸对热应激下体外培养奶牛乳腺皮细胞增殖、调亡及相关基因表达的影响４．结果与分析２２４丄奶牛乳腺上皮细胞的形态学鉴定２２４．２．细胞免疫化学检测乳腺上皮细胞表面标志２４２４４．３．蛋氨酸对热处理及非热处理郭腺上皮细胞活力的影响４．４．蛋氨酸对热处理及非热处理乳腺上皮细胞自由基的影响２５４．５．蛋氨酸对热处理及非热处理現腺上皮细胞抗氧