蛋氨酸及含蛋氨酸二肽对奶牛乳腺上皮细胞内乳蛋白合成相关基因表达的影响

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1、＇—－１—分类号Ｓ８１６１０１２９．学校代码．—ＵＤＣ６３６学号２０１２２０１０１８＿＿Ａ書若蓉嗦乂＃硕ｄｒ学位论文蛋氨酸及含蛋氨酸二肋对奶牛郭腺上皮细胞内乳蛋白合成相关基因表达的影响ＥｆｆｅｃｔｏｆＭｅｔｈｉｏｎｉｎｅａｎｄＤｉｐｅｐｔｉｄｅｓＣｏｎｔａｉｎｉｎｇＭｅｔｈｉｏｎｉｎｅｏｎＧｅｎｅｓＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＩｎｖｏｌｖｅｄｉｎＭＨｋＰｒｏｔｅｉｎＳ＼ｎ化ｅｓｉｓｉｎＢｏｖｉｎｅＭａｍｍａｒｙＥｐｉｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌｓ申请人：常晨城．―学科ｎ类：．．农

2、学，ｙ＾＇学科专业：动物营养与饲料科学■？、、硏究方向：．；．反与动物营养．指导教师：间素梅教授‘记－论文提交曰期－五年六月：二〇内蒙古农业大学研究生学位论文独创声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研巧成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实么处一，本人承

3、担切相关责任。论文作者签名：日期：〇１巧ｈ‘／戶今龄我／内蒙古农业大学研宛生学位论文版权使用授权书本人完全了解内蒙古农业大学有关保护知识产权的规定，即；研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属内蒙古农业大学。本人傑证毕业离校后，发表论文或使巧论文工作成果时署名单位为内蒙古农业大学，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名为内蒙古农业大学。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅。学校可Ｗ公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名：，

4、娘嗦指导教师签名：名．日期：摘要模型，研究蛋氨酸及含蛋氯酸二本试验运巧体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为上皮细胞中乳蛋白合成及相关基因表狀等量替代其所含的游离氨基酸后对乳腺白含量的影响，为巧入研巧小肤对奶牛乳蛋白合成机理达ｙ？及细胞内外氯化酶蛋及改善乳品质提供了理论基础。试验由两个试验构成：试验一主要研巧了蛋氨酸浓度及培养时间对奶牛乳脾上皮细胞乳蛋白基因。取健康的荷斯坦奶牛乳腺组织，表达的影响，筛选出最适培养浓度及培养时间到８０％时进行传代。试验采用分离纯化得到乳腺上皮原代细胞，待细胞酷合度达３６个处理级，每组６单因子完全随

5、机试验设计，将第代乳腺上皮细胞随机分为，使其培养液中的终浓度分别为０、个重复，每组分别加入不同剂量的游离蛋氨酸。００／，其余为试验狙将细胞２０、４０、６０、８０和／ｍＬ，其中邸ｇｍＬ为对照组１Ｍｇ〇、４化和７化２他。试验结果表培养板置于巧吃、５／〇的Ｃ〇２培养箱中分别培养明：用不同浓度的游离蛋氨酸培养奶牛乳腺上皮细胞，当培养４化时，乳腺上皮？Ｋ－）、Ｋ＞；ｃａｓｅｉｎＣＳＮ３）和（－ｓｅｉｎＣＳ饥Ｓｌ酪蛋白（，ａ－ａｃａ酪蛋白，细胞活力和ｌｓｌｓ－乳球蛋白（－ｌａｃｔｏｌｏｂｕｌｉｎ，ＬＧＢ）基因表达量随着蛋氨酸浓度的増加呈显著ＰＰｇ一ＡｍＬ时最

6、离／；但蛋氨酸的添加二次曲线増加度达到６〇＇表达量ｉ的元，当浓ｇ抑制了－酪蛋白（Ｐ－ｃａｓｅｉｎ，ＣＳＮ２）基因的表达；当培养７２ｈ时，所有浓度的Ｐ蛋氨酸均抑剌了细胞増殖。蛋氨酸的添加浓度为６０惦／ｍＬ、培养时间为４化时，孔腺上皮细胞的活力Ｗ及细胞中乳蛋白基因的表达量均较高。试验二化等量替代其所含的游离氨基酸后对奶牛乳二研充了八种含蛋氨酸（ＳＮ１、ＣＳＮ３、ＬＧＢ）、ＩＩ型小肋转运载体腺上皮细跑乳蛋白基因Ｃ１Ｓ、ＣＳＮ２（ＡＰＡ）含量基因、氨肤酶氮基因（ＡＰＮ）表达Ｗ及细胞内外氨化酶（ＰＥＰＴ２）一二肋（蛋的影响。在试验的基础上，将蛋氨酸

7、与其它必需氨基酸分别组成八种－－－－－ＰＭｅｔＴｒ、－－－ＭｅｔＬ、色氨酸）－ＭｅＭｔ、赖氨酸（Ｐｓ）蛋氨酸（ｐ巧酸蛋氨酸（Ｐｔｅ）蛋氨酸ｙ－－－－ｅｔＴｈｒ、蛋异亮氛酸－－蛋氨酸－苯丙氨酸ＰＭｅｔＰｈｅ、蛋氨酸苏氨酸（ＰＭ）氨酸（）－－）－Ｍｅｔ－－Ｖａｌ，等量替－－ＭｅｔＬｅｕ、蛋氨酸额氨酸Ｐ）－ＰＭｅｔＩｌｅ）、蛋氨酸亮氨酸（Ｐ）（（‘－－－－－ｅｒ、－－－、ｅｔＰｈｅ、ＦＭｔＴｈ－ｅｔＭｅｓ、ＦＭｅｔＴＦＭ代相应的游寓氨基酸（ＦＭｅｔＭ、ＦｔＬｙｒｐ一－－：－－Ｍｅｔ第部分研巧了八－－Ｍｅｔ、ＦＶａ