玫瑰多糖酶法提取和柱前衍生hplc研究

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1、玫瑰多糖酶法提取和柱前衍生HPLC研究　　摘要：通过酶法提取玫瑰多糖，用柱前衍生高效液相色谱法分析含量。结果表明，非酶法对干花和玫瑰花渣的多糖提取率分别为9.865、5.087g/100g；酶法对其的多糖提取率为12.487、7.599g/100g。用柱前衍生高效液相色谱法分析玫瑰多糖，发现该多糖是由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖6种单糖组成的，其物质量比为0.9344∶0.9818∶1.1566∶0.9763∶0.9740∶0.9745。酶法提取和不加酶提取的玫瑰多糖一级结构的糖组成相同。关键词：玫瑰多糖；酶法

2、提取；柱前衍生；一级结构中图分类号：O657.7文献标识码：A文章编号：0439-8114（2013）20-5031-03AnalysisofRosePolysaccharidebyEnzymeExtractionandPre-columnDerivatizationHPLCZHANGYue-hui1，HANLi-wen2，ZHENGLan2，SHIJian-guo2，YANGJun-hui2，MAYao-hong1（1.ShandongInstituteofLightIndustry，Jinan250353，China；2.Biol

3、ogyInstitute/KeyLaboratoryforBiosensorofShandongProvince，ShandongAcademy9ofSciences，Jinan250014，China）Abstract：PolysaccharideofrosewasextractedbyenzymemethodandanalyzedbyHPLCwithpre-columnderivatization.Theresultsshowedthattheyieldrateofrosepolysaccharidefromdriedflower

4、sandrosedregsbynormalmethodwere9.865g/100g，5.087g/100g，respectively.Theyieldrateofrosepolysaccharidebyenzymemethodwere12.487g/100g，7.599g/100g，respectively.TheresultsofmonosaccharidecompositionofrosepolysaccharidebyHPLCwithpre-columnderivatizationshowedthatitwascomposed

5、ofmannose，rhamnose，glucuronicacid，glucose，galactoseandarabinosewithamolarratioof0.9344∶0.9818∶1.1566∶0.9763∶0.9740∶0.9745.Thesugarcompositionofprimarystructureofrosepolysaccharideextractedbyenzymemethodwasthesameasthoseextractedbynormalmethod.Keywords：rosepolysaccharide

6、；enzymemethodextraction；pre-columnderivatization；primarystructure9多糖作为一种生命活性物质，具有清除自由基和抗肿瘤作用[1，2]。孔心渭等[3]通过肿瘤坏死因子（TNF）单克隆抗体的ELISA法，发现野玫瑰多糖通过调节肿瘤坏死因子的分泌而对急性肾炎有一定的治疗作用。白伟芳[4]测定了玫瑰花多糖在体外对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除作用，以及玫瑰花多糖的抗肿瘤活性。玫瑰花中的总糖质量浓度高达29.5g/100g，其中可溶性糖8.8g/100g。马猛华等[5]提取玫瑰花

7、中多糖，提取率为0.6g/100g。陈晓梅等[6]分析了铁皮石斛原球茎多糖的结构和功能。本试验分析了玫瑰花提取精油后废水废渣中多糖的提取方法，并以1-苯基-3甲基-5吡唑啉酮（PMP）作为柱前衍生剂[7，8]，采用HPLC分析其单糖及糖醛酸的组成，并鉴定酶法对单糖及糖醛酸的组成有无影响，以期为多糖结构及功能研究和玫瑰花的综合开发利用提供借鉴和参考。1材料与方法1.1材料与试剂玫瑰干花以及经提取玫瑰精油的干玫瑰花渣由济南惠农玫瑰花精油有限公司提供；纤维素酶（山东食品发酵工业研究设计院，食品级4万酶活）；果胶酶（山东食品发酵工业研究设计院

8、，食品级3万酶活）；甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖均购自美国Sigma公司。9色谱纯乙腈；1-苯基-3甲基-5吡唑啉酮（衍生化试剂PMP）、浓硫酸、氢氧化钠、酒石酸钾钠、次甲基蓝、