[精品]干细胞移植治疗股骨头缺血性坏死.doc

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1、股骨头缺血性坏死是骨科常见疾病z—,会产生覩关节疼痛，晚期经常导致股骨头塌陷、骨关节炎，报终需要行全僦关节置换治疗。由于股骨头塌陷造成锻关节的病残较重，治疗较困难，故强调早期发现、早期治疗。冃前早期常用的治疗措施包括髓芯减压、钻孔植骨等,这些方法效果都不萇满意，且存在争议…。随着对股骨头坏死发病机制研究的不断深入，骨髓基质细胞移植成为近年来治疗股骨头缺血性坏死的研究热点。1股骨头坏死和骨髓间充质细胞无菌性非创伤性骨坏死是股骨头缺血性坏死的一种类型，其发病机制还不完全清楚，应用糖皮质激素和酗酒被公认是最常见的危险因素。通过研究观察推测可能的

2、病理生理机制包括：脂肪栓子、股骨头血管的微血管被骨髓脂肪填塞、骨髓脂肪的逆行栓塞、小梁骨的微骨折。近來的文献报道股骨头坏死病人的骨髓屮间充质干细胞的活性和数最都出现下降。这表明该疾病可能是骨细胞和（或）问充质细胞疾病。骨髓和股骨头坏死的关系非常复杂。股骨头坏死病人的MRI检查会出现骨髓信号的改变，粗隆问区的脂肪增多，一些病人骨備屮的成骨干细胞减少。有证据显示类固醇会导致脂肪形成并刺激克隆骨髓细胞屮的脂肪特异基因］。另外，骨坏死病人篦悄的骨髓也显示界常，并且在皮质类固醇治疗后，干细胞池减少。有作者报道类固酹在体外对于克隆骨髓细胞产生脂肪形成

3、和刺激脂肪特异基因效丿应。脂肪细胞和成骨细胞共有一个干细胞池，因为类I古I醇刺激骨髓干细胞向脂肪细胞分化，干细胞池减少会导致多能问充质干细胞数量不足，从而不能提供足够的成骨细胞以适应骨重建的需要，导致骨坏死。在正常胎儿发育过程中，骨髓具有完全造血功能活性，红骨髓向黄骨髓的转变过程一育持续到25岁，直至出现成人分布形态，在正常成人，股骨头不存在造血骨髓，但在股骨干近端还保留红骨髓。股骨干近端分布造血骨髓与备种因素有关并可能发生变化。MRI检查显示在一些股骨头缺血性坏死的病人中红骨髓过早转变为脂肪骨髓，于是髓内血管供应发生改变，这可能是骨坏死

4、的易感因索，因为骨髓屮的变化和骨重建相联系。另一个结果是骨原细胞的缺乏，这会影响骨坏死的发病机制屮2个不同的方曲，即骨坏死本身的发生和骨坏死后的骨修复。在股骨头屮的死骨下和粗隆间区域观察到骨原干细胞的减少。进行全飆关节置换术的骨坏死病人的股骨近端屮的骨细胞坏死范I韦I也证实了这一点。髓芯减压后可观察到骨坏死的重建和修复，但通常不完全。爬行替代不充分，股骨头不能获得满意骨重建的原因Z—是骨坏死后这些患者的般骨头屮＜1细胞数量太少。尽管基础和临床研究都表明死骨可被活骨替代，但在骨坏死的情况下起修复作用的成骨能力低下，并且在股骨头未受累区域和粗

5、隆区域中的骨祖细胞数量较健康个体少。骨祖细胞的减少是坏死的原因还是结果尚不清楚，然而，因为缺乏祖•细胞，治疗策略就心该是促进并影响骨重建，通过爬行替代来保持股骨头完整，而运用祖细胞或生长因了是方法乙一,因此进行髓芯减压的同时采用间充质干细胞移植是明智Z举。白体骨髓移植用于治疗骨坏死源于1990年并获得良好结果。骨髓单核细胞移植的效果和具有成骨特性的干细胞的有效性有关。骨髓移植治疗效果满意的另一个可能解释是骨髓基质细胞分泌成血管细胞因了，导致血管生成增加从而促进成骨作用。2骨髓间充质细胞移植术步骤2.1骨髓穿刺、采集和分离患者全麻，取仰卧位

6、，双上肢外展。严格消毒铺单，预防性静脉输入抗生素，双侧豁皤前方水平做3iwn切口。骨髓穿刺针插入豁悄，用10mL注射器抽吸。注射器内预先加入缓冲液抗凝，缓冲液由400mL磷酸盐缓冲盐水溶液、25000单位肝素和100mL人血白蛋白组成。抽吸出的骨髓打入骨髓采集包，共采集400mL骨髓。在细胞和分了治疗室，滤过骨髓去除骨屑、脂肪和细胞碎屑。然麻通过一系列连续小直径网眼滤过器进行过滤。运用细胞分离机分拣出单核细胞并浓缩至50mL°常规进行细菌和真菌培养。注射液中粒细胞数量为(2・0±0.3)x10,其屮包括(1.0±0.2)%CD34细胞，即

7、为造血细胞前体。采用成纤维细胞集落形成单位作为基质细胞活性的指标，成纤维细胞集落形成单位的平均数量是(924-9)/10o分拣出的骨髓单核细胞包含淋巴细胞样细胞(29+2.2)%、单核细胞样细胞(4±1)%和髓样细胞(64-1.3)%。2.2髓芯减压在“C”型臂x线机透视下用3mm环锯进行髓芯减压,环锯到达坏死区，尖端位于关节软骨下2—3Inno2.3注射骨箭将50mL单核细胞通过髓芯减压环锯注入坏死区域。注射应缓慢进行，持续数分钟。如注射压力很高可能出现骨髓渗漏，尽管少最骨髓细胞渗漏到股骨近端的循坏屮，但文献报道通过放射性核素标记发现大

8、部分细胞仍保留在骨坏死区域或股骨头屮。2.4术后处理术后预防性给予抗生素24h,患肢避免负重3周，术后7d拆线。3骨髓移植治疗股骨头坏死的机制和临床效果3.1骨髓移植治疗股骨头坏死的基础研究基