骨髓基质干细胞移植治疗兔股骨头缺血性坏死的实验研究

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1、骨髓基质干细胞移植治疗兔股骨头缺血性坏死的实验研究作者：刘长安，王江泳，张卫平，步建立【摘要】［目的］探讨骨髓基质干细胞移植对股骨头缺血性坏死的治疗作用和修复机理，为临床应用提供依据。［方法］24只新西兰大白兔随机分为两组，A组为髓芯减压组，B组为干细胞移植组。采用液氮冷冻法造模。A组钻孔后植入空白明胶海绵，B组钻孔后植入复合有骨髓基质干细胞的明胶海绵。术后每组分别于2、4、6、8周各处死3只动物，做X线及组织学检查。［结果］（1）X线结果：2周时A、B组钻孔区均呈低密度，4周时A组钻孔边缘密度增加，B组整个钻孔区密度增加，8周时A组钻孔区均呈低密

2、度，边缘形成硬化线，B组钻孔区形成骨小梁结构。（2）组织学结果：2周时A组钻孔区出现少许炎症细胞，边缘出现较多成骨细胞并有骨组织形成，至8周时，钻孔区内形成骨髓组织，只在边缘形成骨小梁结构。2周时B组钻孔区有大量的成骨细胞，边缘有较多骨组织形成，4周时钻孔区内充满新生骨小梁结构，8周时钻孔区内骨小梁成熟，小梁有骨髓组织填充。［结论］骨髓基质干细胞对兔股骨头缺血性坏死有良好的修复作用。【关键词】股骨头缺血性坏死；动物模型；骨髓基质干细胞；细胞培养；移植　　Experimentalstudyontreatmentoffemoralheadnecrosi

3、sinrabbitarroalcells∥　　Abstract：［Objective］Toinvestigatetherepairingeffectandmechanismfortreatmentoffemoralheadnecrosisontransplantationofbonemarroalcells.［Method］Tly,GroupAascoredepressiongroupandGroupBasBonemarroalcellsautograftgroup.Animalfemoralheadneorosismodeladebyfreezi

4、ngmethodplantedarroalcells.Threeanimalsineverygroupicroscopeexamination.［Result］（1）Radiographexamination:At2ages.At4edaroundthedrilledholesinGroupAandtrabeculaeappearedinthedrilledholesingroupB.（2）Microscopeexamination:ingroupA,at2atorycellsappearedintheholesanyosteoblastsando

5、stoidappearedaroundthedrilledholes.At8arroedinthedrilledholesingroupB,at2ountofosteoblastsinthedrilledholesandsomeostoidformedaroundthcdrilledholes.At4aturedarroarroalcellsautograftingmaybeaneffectiveoralheadnecrosis.　　Keyoralheadnecrosis；animalmodel;bonemarroalcell；cellcultur

6、e;transplantation　　近年来一些研究发现骨髓基质干细胞（bonemarroalcell，BMSC）减少与股骨头缺血性坏死有密切关系。有报道用自体红骨髓移植治疗股骨头缺血性坏死取得了较好的疗效。认为移植于股骨头内BMSC的数目决定着治疗的成败。本实验用移植体外增殖的BMSC治疗兔股骨头缺血性坏死，探讨BMSC在早期股骨头缺血性坏死治疗中的作用及修复机理，为临床提供理论依据和合理的治疗方法。　　1材料与方法　　1.1动物分组　　成年新西兰大白兔24只，雌雄不限，年龄4～5个月，体重2.5～3.5kg。由白求恩国际和平医院动物实验室提供。

7、随机分为A、B2组，每组12只。A组为髓芯减压组，B组为细胞移植组。　　1.2主要试剂　　地塞米松磷酸钠注射液，浙江仙琚制药股份有限公司，国药准字：H330220827，批号：041105。DMEM细胞培养液，GIBCO公司。胎牛血清，杭州四季青公司。　　1.3BMSC的获取和培养　　从实验动物髂后上嵴处抽取骨髓。全骨髓培养。用硬膜外穿刺针刺入髂骨1～1.5mm，以含有100μ／ml肝素0.2ml的5ml注射器，迅速抽取骨髓2ml，所获骨髓种植于6孔细胞培养板内，每孔种植1ml，每只实验动物种植2个孔。加入含20%胎牛血清DMEM液5ml，反复吹打

8、，再加入地塞米松10-8mmol／L，微型震荡器上震荡2min，然后放入细胞培养箱内培养。培养箱温度37℃，含5%CO2，