鮰鱼皮明胶多肽抗衰老活性的研究.pdf

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1、鲴鱼皮明胶多肽抗衰老活性的研究Researchonanti—agingactivityofgelatinpeptidesfromchannelcatfish，Ictaluruspunctatus作者姓名王运堕2011年3月合肥工业大学本论文经答辩委员会全体委员审查，确定符合合肥工业大学硕士学位论文质量要求。答辩委员会签名：(姓名、工作单位、职称)主席：委员：柏以nI一’＼，l弘锋＼I教授安徽农业大学副教授导师：弘引冷副教授独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究

2、成果。据我所知，除了文中特别加以标志和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得金目巴工些太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签字：磁签字日期。2叫f年笋月站日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解金匿王些太堂一有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅或借阅。本人授权金目巴王些太堂可以将学位论文的全部或部分

3、论文内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文者签名：欺签字日期：bI

4、年(c目强日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：导师签名2法钊印‘签字日期：≯11年丫月刊日电话：邮编：鲴鱼皮明胶多肽抗衰老活性的研究摘要在水产品加工过程会产生大量的废弃物，其中鱼皮富含胶原蛋白(多肽)。明胶是胶原多肽经温和但不可逆的断裂后生成的主要产物。本论文以鲴鱼皮为原料，采用热水抽提法制备鲴鱼皮明胶，研究了鲴鱼皮明胶的复合酶解工艺

5、、鲴鱼皮明胶多肽的体外抗氧化、体内抗衰老活性和抗氧化稳定性，为水产品加工废弃物的综合利用开辟出了一个新的途径。主要结果如下：(1)将鲴鱼皮经过脱脂、酸碱前处理后用45℃热水抽提6h，得到鲴鱼皮明胶。采用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶将鲴鱼皮明胶进行酶解，根据酶解液对·OH的清除效果，确定了胰蛋白酶和胃蛋白酶作为水解明胶用酶。以水解液对·OH的清除率为指标，通过正交试验L9(34)，确定了胰蛋白酶单独水解鲴鱼皮明胶的最佳酶解工艺：温度40℃、pH7．5、酶与底物质量浓度比(【E

6、】／【S】)3．5／100、底物质量浓度2．59／100mL。在胰蛋白酶最适酶解工艺条件的基础上，采用胰蛋白酶和胃蛋白酶进行复合水解，得到最佳复合酶解工艺：先用胰蛋白酶酶解3h，然后用胃蛋白酶酶解3h，此时得到的酶解液羟自由基清除率最高，达到47．38％。(2)对最佳复合酶解工艺条件下所制备的鲴鱼皮明胶酶解液的体外抗氧化活性进行了测定。实验结果表明酶解液对·OH、·02。、DPPH-和H202均有较好的清除作用，还具有一定的还原能力，对Fe2+诱发的卵黄脂蛋白的过氧化有较好的抑制作用。总体而言，鲴鱼

7、皮明胶酶解液在不同抗氧化体系中都表现出一定的抗氧化效果，具有很好的开发利用前景。(3)将鲴鱼皮明胶酶解液进行超滤，并对超滤各组分清除自由基的活性进行测定，结果表明分子量1000Da以下组分清除自由基活性最高，将此部分液体收集用于下一步小鼠的体内抗氧化试验。采用D．半乳糖诱导的衰老小鼠模型，对触鱼皮明胶水解液的体内抗衰老活性进行了研究。对实验小鼠灌胃给药不同浓度的鲴鱼皮明胶多肽，饲养42天后，分别测定小鼠血清中MDA的含量，SOD的活力和小鼠脑组织、肝组织中MDA含量，SOD、GSH．Px的活力。实验

8、结果表明鲴鱼皮明胶多肽可以显著提高衰老小鼠血清SOD活力和脑组织、肝组织SOD、GSH．Px活力；降低衰老小鼠血清和肝组织、脑组织中MDA含量。同时，鲴鱼皮明胶多肽的抗衰老活性随给药剂量提高而增强。(4)对鲴鱼皮明胶多肽的抗氧化稳定性进行了初步研究，实验结果表明：鲴鱼皮明胶多肽具有较强的耐热性，加热到100℃，活性仍保持在90％左右；在pH2．9的环境中清除自由基活性保持较好，其中pH2和pH3时活性保持率接近100％，pH为4、5、6、7、8、9时活性保持率为90％左右；常见的金属离子对鲴鱼皮明胶

9、多肽的抗氧化稳定性均有影响，其中Cu2+和M92+对抗氧化肽活性的影响较大，较高离子浓度时会使抗氧化肽的活性近乎丧失。关键词：鲴鱼皮明胶多肽自由基抗衰老2Researchonanti·-agingactivityofgelatinpeptidesfromchannelcatfish，lctaluruspunctatusABSTRACTTheskinofchannelcatfish(Ictaluruspunctatus)，whichwasleftafteraquatic