超声预处理虾下脚料制备抗氧化肽工艺研究.pdf

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1、超声预处理虾下脚料制备抗氧化肽工艺研究赵艳霞(武汉职业技术学院生物工程学院湖北武汉430076)Ultrasonicpretreatmentshrimpscrapsfromthepreparationofantioxidantpeptidesprocessresearchzhaoyanxia摘要:为优化碱性蛋白酶酶解虾下脚料制备抗氧化肽的研究笔者采用超声波预处理虾下脚料,再进行酶解制备抗氧化条件,采用超声波预处理虾下脚料,研究超声时间、超声温度、料肽,对其工艺进行研究,并进一步研究其酶解产物的抗氧化能力,液比对制备抗氧化肽工艺的影响,同时也

2、研究了其酶解温度、酶为虾副产物的深度开发利用提供研究基础。解时间、加酶量、酶解PH对抗氧化肽含量与FRAP还原力大小一、材料与方法的影响。结果表明:虾下脚料超声波处理的最佳工艺参数为:超声波功率1200W、超声时间20min、超声温度60℃、料液比1:2;使用1.材料碱性蛋白酶进行酶解的最佳工艺参数为:加酶量2%、酶解温度(1)原料。虾下脚料购于武汉市凤凰花园集贸市场。样品用水60℃、酶解时间3h。在此工艺条件下,酶解液中多肽含量可达到冲洗后放入55℃干燥箱中烘干28小时,用高速粉碎机粉碎,过0.232mg/mL,FRAP还原力为0.858

3、nmol/mL。与未经超声波处20目筛保存备用。理的相比较,抗氧化肽的得率提高了15.25%,抗氧化能力提高了(2)试剂。碱性蛋白酶(江苏锐阳生物科技有限公司)、甲醛、12.87%。氢氧化钠、无水硫酸铜、酒石酸钾钠、三氯乙酸、三氯化铁、硫酸亚关键词:超声预处理;虾下脚料;抗氧化肽铁等均为分析纯。目前,研究人员已从很多动植物来源的蛋白质酶解产物中提(3)仪器。SK3300H超声波清洗仪:上海科导超声仪器有限取获得具有抗氧化活性的生物活性肽,证实具有消除自由基能公司;SHY-2水浴恒温振荡器:江苏金坛市佳美仪器有限公司;力,具备一定的抗氧化活性

4、。虾仁在加工过程中产生了约占85%紫外可见分光光度计UV-1750:岛津仪器有限公司;PH计的虾头和虾壳下脚料。这些下脚料中含粗蛋白36-40%。陈晓明(520):梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司[1]、林丽英[2]等通过实验证明龙虾下脚料的酶解液具有一定的抗氧2.实验方法化活性,并对制备抗氧化肽的工艺进行了研究。(1)抗氧化肽的工艺流程超声波具有空化作用,产生的气泡经挤压破裂,可以瞬间产经超声波预处理的虾粉,在一定的条件下,加碱性蛋白酶,进生极强的机械剪切力,使蛋白质降解,或者改变蛋白质构象,提高[3][4]行酶解,酶解液在90℃灭酶1

5、0min,放冷在3500r/min条件下,酶解效率。康永锋等通过实验证明超声波辅助酶解制备鲑鱼抗[5]离心15min,得到抗氧化肽水解液。氧化肽,可以提高其提取效率,侯利霞等也采用超声辅助酶法制(2)超声波预处理条件的工艺优化。备了花生抗氧化肽。而国内外采用超声波辅助酶解虾蛋白制备抗以水解液中多肽含量为评价指标,根据单因素试验,选取超氧化肽的研究还未见报道。声时间(10、20、30min)、超声温度(40、50、60℃)、料液比(1:2、1:4、1:6),进行3因素3水平的正交试验,得到最优化超声波预处理条件。(3)酶水解工艺的优化。以水解

6、液中多肽含量和FRAP还原能力为评价指标,在超声波最佳料液比的基础上,加入一定的碱性蛋白酶,并进行单因素试验,分别考察酶解时间、加酶量、PH、酶解温度对评价指标的影响,再在此基础上,进行3因素3水平(酶解时间2、3、4h、加酶量1.5、2.0、2.5%、酶解温度40、50、60℃)的正交试验,获取最佳水解工艺条件。(4)水解液中多肽含量测定双缩脲法[6],测得线性回归方程为y=0.3544X+0.0131,R2=0.9982(5)FRAP抗氧化能力测定取0.1mL样品,加入4.9mL10mmol/LTPTZ工作液,混匀后37℃反应10min

7、,593nm测定吸光度。以1.0mmol/L硫酸亚铁为标准,样品抗氧化活性以达到同样吸光度所需的硫酸亚铁的毫摩尔数表示。二、结果与分析1.超声波预处理条件的工艺优化(下转第202页)2002014年1月另外,项目建设是在老厂区拆迁的基础上进行的,老厂区地施工分包商那样管理总承包商,双方观点都不对。从240万吨/上地下的管网和电网纵横交错,建设周边尽是生产在运的装置,年焦化加氢联合装置项目建设过程中来看,监理的现场旁站式管因此,项目建设时刻与生产运行息息相关,这就要求必须有业主理作用以及质量控制点的把握上都是不可取代的。所以总承包商管理人员协

8、调组织,才能使项目建设在保证安全生产的前提下顺必须严格地无条件地接受监理监督。正确处理好EPC工程总承利进行。包商和监理在施工中所处的关系地位,才能发挥各自对项目的作最后,业主方

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