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时间:2020-06-03
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1、第14卷第8期中国食品学报Vo1.14NO.82O14年8月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyAug.2014利用对虾加工下脚料制备抗氧化肽的研究周爱梅张风银凤刘晓娟刘欣陈永泉(华南农业大学食品学院广州510642)摘要为了筛选酶解南美白对虾虾头、虾壳制备抗氧化肽的最适水解蛋白酶和最佳水解工艺条件,以酶解物的多肽含量、DPPH自由基清除能力及还原力作为评价指标,考察了碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶4种蛋白酶对南美白对虾虾头、虾壳的酶解效果。以酶解物的
2、DPPH自由基清除能力为指标,考察了不同酶解时间、pH、温度以及加酶量对最适水解蛋白酶酶解效果的影响。结果表明,风味蛋白酶酶解物多肽含量较低。而其DPPH自由基清除活力及还原力较高。选其作为最适水解用酶,其最适水解条件是:酶解时间9h、酶解温度43℃、加酶量4900U/g蛋白质,酶解pH7.0,料液比1:12。此条件下获得酶解物的DPPH自由基清除能力高达89.42%关键词南美白对虾;风味蛋白酶;抗氧化肽;酶解物文章编号1009—7848(2014)08—0085—07南美白对虾是我国年产量最大的养殖虾类,响应面优化设计。优化南美
3、白对虾虾头虾壳的最由于国内生产工艺落后,加工企业规模较小,南美适酶解工艺。白对虾的加工绝大部分以冷冻虾仁的形式出口,因而会产生大量的虾头、虾壳等副产物,约占对虾1材料与方法全重的80%以上,其中虾头和虾壳分别占副产物1.1材料的71.4%和28.6%t。研究表明,南美白对虾加工南美白对虾虾头虾壳。由广东省阳江市谊林下脚料含有多种矿物质元素,尤以钙质含量丰富;海达速冻水产有限公司提供。低温运送至华南农蛋白质及氨基酸含量高,其蛋启质含量高达45.05%业大学食品学院后一18℃冷冻,备用;碱性蛋白酶(干基)。还含有人体必需的8种氨基酸,
4、除了赖氨(2.51xl0U/g)、中性蛋白酶(9.77x10U/g)、风味酸的含量稍低外,其它氨基酸的组成比例符合人蛋白酶(1.85~104U/g),广州市齐云生物技术有限体必需氨基酸的要求。具有广阔的开发利用价值[4-5]。公司;胰蛋白酶(1.29~10U/g),Sigma公司。目前这些废弃物主要是用于饲料的生产,附加值1.2主要仪器与设备低。对其开展深加工研究是1项重要课题。目前国PL1001一L型百分之一电子天平,Mettler内外已就南美白对虾加工废弃物中蛋白质资源的Toledo;PB一10型pH计,Sartorius;U
5、V一1800PC型再利用进行了尝试.包括蛋白质的回收、高营养的紫外一可见分光光度计,上海美谱达仪器有限公蛋白水解液的制备等。以南美白对虾虾头虾壳为司:101C一2型电热鼓风干燥箱。上海实验仪器厂原料,采用蛋白酶水解制备生物活性肽,尤其是抗有限公司。氧化肽的系统研究目前鲜见报道。本文以南美白1.3试验方法对虾虾头虾壳为原料,以酶解物的多肽含量、1.3.1原料预处理将南美白对虾虾头虾壳室温DPPH自由基清除率和还原力为评价指标,筛选解冻后,7O℃干燥并粉碎。收集南美白对虾虾头虾最适的蛋白酶。在此基础上,考察酶解时间、pH、壳粉末,4℃
6、保存备用。温度和加酶量对酶解液抗氧化活性的影响;结合1.3.2最适水解蛋白酶的筛选称取南美白对虾虾头虾壳粉3g置于100mL三角瓶中,按料液比收稿日期:2013—08—281:12(m/v)3n入蒸馏水.分别在各酶的最适温度下作者简介:周爱梅,女,1971年出生,博士,副教授中国食品学报2014年第8期预热10min后,用5mol/LHCI或5moYLNaOH化活性的影响,做单因素试验分析。调节至各酶的最适pH后待用。将酶解液依次用1-3.4最适水解蛋白酶酶解工艺的响应面试验8000U/g的碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶在单因
7、素试验的基础上,以酶解时间t、酶解温度和胰蛋白酶水解,以最终酶解液的多肽含量、和加酶量E/S3个因素为自变量,以酶解液的DPPH自由基清除能力和还原力作为评价酶解工DPPH自由基清除能力为响应值。根据Box—艺的指标。Behnken中心组合设计原理,设计三因素三水平1.3_3酶解液抗氧化活性的单因素试验选取最的响应面分析试验(表1),以优化最优的酶解工适的蛋白酶后,以DPPH自由基清除能力为指标,艺参数。考察酶解时间、pH、温度和加酶量对酶解液抗氧表1响应面法优化酶解工艺各要素和水平的设计Table1Thedesignofther
8、esponsesurfacemethod2结果与分析DPPH自由基表现出不同的捕获能力(P<0.05)。其2.1最适水解蛋白酶中,风味蛋白酶表现出最高的DPPH自由基清除2.1.1不同蛋白酶酶解物的多肽含量由图1可能力,达到80.5%;而中性蛋白酶
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