螺内酯体内外抗大鼠肝纤维化的作用【临床医学毕业论文设计，精品】.doc

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1、临床医学论文•螺内酯体内外抗大鼠肝纤维化的作用作者：李旭，孟莹，张振书，张小兰，黄茂梁【摘要］目的：探讨螺内酯对实验性肝纤维化的影响及其作用机制.方法：雄性Wistar大鼠24只，随机分为3组，每组8只.模型组：CC14油2.5mL/kgSC，3次/wk；螺内酯组：CC14油注射的同时每日予以螺内酯20mg/kg灌胃，1次/d；对照组：橄榄油SC.于4wk取材，VG染色检测大鼠肝组织学改变.Western印迹法检测肝组织TGF/31的表达.EMSA检测肝组织NFxB的活性.酶图法测定MMP2,9的活性.另培养大鼠HSCT6,分别予醛固酮（Aldo）1“mol/L、螺内

2、酯1/zmol/L（预处理60min5再予Aldo刺激lh）和TNFa100口g/L处理1h，设立阴性对照组.EMSA检测NF/cBDNA结合活性；Western日」迹检测胞质内IzcBa的表达.结果：体内4wk，螺内酯组纤维化分级小于模型组（螺内酯组vs模型组，PvO.Ol）；模型组TGFBl的表达明显高于螺内酯治疗组（模型组vs螺内酯治疗组，P<0・05）•模型组NF结合活性显著增强（模型组vs对照组，P<0・01），螺内酯可抑制肝组织NF/cB结合活性（螺内酯组vs模型组，P<0・05）•模型组MMP2,9活性显著增强（模型组vs对照组，P<0.01），螺内酯可

3、抑制MMP2,9活性（螺内酯组vs模型组，P<0・05）.体外Aldo和TNFa干预1h后，NF/cBDNA结合活性增强（Aldo处理组vs对照组，P<0・01），螺内酯可抑制NF/cBDNA结合活性（螺内酯+Aldo处理组vsAldo处理组，P<0.05）・Aldo可减低胞浆内IxBa表达（Aldo处理组vs对照组，P<0.05）.螺内酯则抑制胞质蛋白中I/€Ba表达的减低（螺内酯+A1do处理组vsAldo处理组'P<0.05）・结论：螺内酯可抑制实验性肝纤维化形成'其抗肝纤维化作用与抑制肝组织TGFBl的表达以及NF/cB和MMP2,9的活性有关.【关键词】肾素

4、血管紧张素醛固酮系统；螺内酯；核因子xB；肝硬化[Abstract】AIM:Todeterminetheeffectofspironolactoncontheprogressionofrathepaticfibrosisinvivoandinvitroanditsmechanisms•METHODS:TwentyfourWistarratsweighingabout250gweredividedinto3groups,with8ineachgroup.Tnmodelgroup,theratsreceivedinjectionof40%CC142.5mL/kgsubcu

5、taneously,threetimesaweek.Inspironolactonctreatmentgroup,theratsreceivedinjectionof40%CC14aswe11asigadministrationofspironolactone20mg/(kg-d).Incontrolgroup,theratsreceivedinjectionofoliveoi1only.After4weeks,morphologicalexaminationwasperformed.TheexpressionofTGF/31proteinin1ivertissuew

6、asexaminedbyWesternBlot•Electrophoreticgelmobi1ityshiftassay(EMSA)wasuti1izedtodetectNF/vBDNAbindingactivityin1ivertissues.Theactivitiesofmatrixmetalloproteinase2,9(MMP2,9)wereassessedbyzymography.Invitro,HSC(hepaticstellatecel1)T6cel1swerepreincubatedfor1hwithorwithoutspironolactone1/z

7、mol/L(aninhibilorofaldosterone)priortoexposuretoaldosterone(Aldo)1/zmol/Lfor1h.DNAbindingactivityofNF/cBwasanalyzedbyEMSA•TheexpressionofI/cBaproteinwasexaminedbyWesternBlot•RESULTS:Invivo,spironolactonetreatmentsignificantlyreducedmeanfibrosisscoreandproteinlevelsofTGF/31inthe