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时间:2020-03-23
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1、第43卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告第8期2015年8月ChineseJournalofAnalyticalChemistry1181—1l86DOI:10.U895/j.issn.0253~820.150204高分离度快速液相色谱一四极杆-飞行时间质谱法分析酒制和醋制人参的皂苷类成分戴雨霖越皓孙长江郭云龙郑飞李晶刘淑莹(长春中医药大学吉林省人参科学研究院,长春130117)(吉林大学中日联谊医院放射线科,长春130033)摘要利用高分离度快速液相色谱与四极杆-飞行时间质谱(RRLC—Q.TOFMS)联用技术,对酒制人参和醋制人参的人参
2、皂苷类成分进行比较研究。样品经不同方法炮制,离心过滤后,采用AgilentZORBAXSB—C。色谱柱,以0.1%甲酸和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,采用高分辨质谱进行检测,利用MasshunterQualitativeAnalysis软件与人工相结合进行分析。鉴定了46种人参皂苷,比较了酒制人参和醋制人参中人参皂苷含量差异,并检测到稀有人参皂苷。同时总结了炮制品中人参皂苷的转化途径。对人参置于酒或醋中有效成分的浸出量进行比较。本方法对于人参炮制品的成分研究具有借鉴意义,并且对民间使用的人参泡酒进行了科学解释,为人参炮制品在临床合理使用提供指导。关键词
3、酒制人参;醋制人参;人参皂苷;液相色谱-质谱联用1引言人参是五加科植物人参(PanaxginsengC.A.Mey.)的干燥根,具有益智、提高免疫力、调节心血管系统等功效,主要有效成分是人参皂苷。人参皂苷属于三萜类化合物,共三类,分别是原人参二醇型皂苷(Protopanaxadiol,PPD)、原人参三醇型皂苷(Protopanaxatriol,P)(骨架结构示于图1)和齐墩果烷型人参皂苷(Oleanolicacid)。按照其C-20位结构的不同,又可以分为20(5).型和20(R)一型,天然人参皂苷构型均为20(Js)一型。人参有红参、生晒参、大力
4、参等炮制品_2“J。研究表明,人参经过加工炮制后,所含有效成分发生复杂变化,同时伴有新物质生成L5J,民间将新鲜人参置于酒中浸泡后服用,达图1原人参二醇型皂苷和原人参三醇型皂苷的结构式到保健的目的J,但很少进行科学解释。中医理Fig.1Structuresofpanaxadiolginsenosidesandpanaxatriolginsenosides论中,药材经醋炮制后,可以增强治疗作用的例子有很多"J。据报道,人参皂苷在酸性环境下当R3=OH为原人参三醇型皂苷,当R3=H为原人参二醇型皂苷。R3=OH,panaxatriolginsenosid
5、es;It3=H,panaxadiolginsenosides.能够转化成具有很强生物活性的稀有皂苷-8]。高分离度快速液相色谱与四极杆一飞行时间质谱(RRLC—Q—TOFMS)联用技术常用于天然产物的化学成分分析,Wang等m利用液相色谱一质谱联用技术检测人参和西洋参中人参皂苷类化合物的差异,本实验利用液相色谱一质谱联用技术,比较人参通过醋及酒炮制后的化学成分变化,为其质量评价和临床应用提供依据。2实验部分2.1仪器、试剂与材料Agilent1200型快速分离液相色谱系统,Agilent6520Q-TOF质谱仪(美国Agilent公司)。鲜人参、2
6、015-03—12收稿;2015-06-02接受本文系国家自然科学基金资助项目(No.31400682)}E·mail:Crow-duncan@163.comI182分析化学第43卷生晒参(5年)均购于吉林省抚松县万良人参市场,经长春中医药大学王淑敏教授鉴定为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的根);人参皂苷Rg2,Rg3,Rb1,Rc,Rd,Re和等对照品(纯度>98%,南京泽朗医药科技有限公司);乙腈(色谱纯);其它试剂均为分析纯。醋(山西水塔醋业股份有限公司,总酸>14.00g/100mL);白酒(北京双庆和酒业有限责任公司
7、,酒精度:56%Vo1);黄酒(浙江圣塔绍兴酒有限公司,酒精度:8%Vo1)。2.2样品的制备鲜人参分别用3种浸泡液(醋、白酒、黄酒)浸泡48h后,高压蒸锅IO0~C蒸制2.5h,冷却至室温,于烘箱60℃干燥72h。等量的浸泡液,备用。分别称取1g生晒参粉末,加入20mL70%甲醇,浸泡过夜,超声60rain,以5000r/min离心l0min,过0.22m滤膜,备用。浸泡液制备方法同上。2.3实验条件色谱条件:色谱柱:AgilentZORBAXSB.C。8色谱柱(100minx2.1mm,3.5m),梯度洗脱;流动相:0.1%甲酸溶液(A),乙腈(
8、B);流动相梯度:0~2min,0%~10%B;2~7min,10%~15%B;7~15min,15%~30
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