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时间:2020-03-25
《肝癌患者血浆RASSF1A异常甲基化检测的意义(医学论文).doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、肝癌患者血浆RASSF1A异常甲基化检测的意义作者:赵强子,祁志芳,魏万礼,李开宗,窦科峰【关键词】肝肿瘤;RASSF1A基因;甲基化;血浆DiagnosticvalueofdetectionofaberrantlymethylatedRASSF1Ainplasmaofpatientswithhepatocellularcarcinoma[Abstract]AIM:TostudytheaberrantmethylationstatusofRasassociationdomainfamily1A(RASSF1A)intheplasmaofpatientsw让hhepatocellularc
2、arcinoma(HCC)bymethylationspecificPCR(MSP),andtoexplorethevalueofcirculartumorrelatedDNAindiagnosisofHCC・METHODS:FreeDNAwasextractedfromperipheralbloodplasmaof41HCCpatients・Aftermodifiedwithsodiumbisulfiteandpurified,theDNAwasamplifiedusingprimersspecificformethylatedandunmethylatedsequencesofRAS
3、SF1A・RESULTS:AberrantRASSF1Amethylationwasfoundin41.5%(17of41)ofplasmaDNAinHCCpatients.NomethylatedRASSF1Awasdetectedin10casesofcontrolplasmasamples・Clinicaldataincludingage,sex,clinicalstages,levelsofAFP,hepatitisstatus,numberoftumor,invasion,metastasisandcirrhosisshowednocorrelationwithaberrant
4、methylationofRASSF1A(P>0.05)・AberrantlymethylatedRASSF1Awasalsodetectedin7of10plasmasamplesofAFPnegativecases・CONCLUSION:DetectionofaberrantmethylationofRASSF1AinbloodisfeasibletoearlydetectandscreenHCC,andisusefultoestimatetheprognosis・【Keywords]liverneoplasms;Rasassociationdomainfamily1A;methyl
5、ation;plasma【摘要】目的:采用甲基化特异性PCR法(MSP)检测41例原发性肝癌(HCC)患者血浆中游离Ras相关结构域家族蛋白lA(RASSFlA)异常高甲基化情况,探讨血浆RASSF1A检测在肝癌诊断中的意义.方法:收集患者血浆,提取游离DNA,亚硫酸氢钠修饰并纯化,以甲基化特异性引物及非甲基化引物进行PCR.结果:41例患者血浆中有17例RASSF1A呈现异常高甲基化(41.5%),对照血浆均为阴性•患者一般情况、临床病理资料等与血浆中RASSF1A异常高甲基化检测结果无关(P>0.05);在10例AFP阴性的HCC患者中,有7例结果为阳性.结论:血浆RASSF1A甲基
6、化检测对肝癌的早期诊断及筛选有重要意义,并有助于判断预后.【关键词】肝肿瘤;RASSF1A基因;甲基化;血浆0引言发现相对特异性的肿瘤标志物,尤其是能够起到早期筛选作用的标志物,对提高包括HCC在内的肿瘤诊断及治疗效果具有重要意义.肝癌组织中RASSF1A基因启动子区CpG岛异常高甲基化可达100%的检测结果[1・2]・我们在前期研究肝癌组织标本中RASSF1A基因启动子区异常甲基化的基础上,观察患者血浆中RASSF1A基因启动子区异常甲基化情况,以证实其在肝癌诊断中的作用.1对象和方法1・1对象41例肝癌血浆全部收集自第四军医大学附属西京医院200310/200503手术治疗的患者,血
7、浆于所有治疗未介入时采集,全部配对标本均经术后组织学证实为原发性肝细胞癌,其中男36例,女5例,全组平均年龄50.2岁.10例健康对照血浆来自健康献血者.亚硫酸氢钠购自Sigma公司,DNA纯化试剂盒购自Promega公司.引物由上海华大基因公司合成[3],序列如表1所示.1・2方法1.2.1分组标准依照EdmondsonSteiner四级分法将标本分为高/中分化组及低分化组;肿瘤分期依照国际抗癌联盟TNM分期标准分为I/U期、皿/
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