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1、适配体的筛选技术——SELEX【摘要I适配体泛指具有抗体功能的单股寡核卄酸(RNA或DNA),其可形成的特殊的立体结构如以辨识特定的蛋白质。在一定环境卞，单链DNA或RNA能与某些物质形成多种热力学稳定的三维空间结构而成为各种功能分了。在大多数情况下，溶液屮的单链DNA或RNA的空间构象是不确定的，当有目标分了存在时，在合适的环境下寡聚单链会发生适应性折替,形成发夹(hairpin)、假结(pseudoknot)、凸环(bulge)、G・四分体(G-quartet)等特殊结构，通过氢键、疏水堆积作用、范徳华力等与H标分了紧密结合。这种结合不需要依靠通常的核
2、糖磷酸骨架的亲和力，而且靶物质既可以是蛋白质，也可以是多肽及小分了物质。这种寡核廿酸片段被称为适配体。适配体的产生是借由一种指数富集配体的系统进化技术(systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment,SELEX)。SELEX是20世纪90年代发展起来的一项组合化学技术。利用该技术可以从随机单链核酸序列库中筛选到特异性与靶物质高度亲和的核酸配体(aptamer),其解离常数可以与单克隆抗体媲美。经过十儿年的发展,SELEX技术己经成为一种重要的研究手段和丁具,被广泛应用到分子生物学、基因纽•学、临床医学
3、等众多研究领域，并且衍生出了混合靶SELEX、体内SELEX、基因组SELEX等冬种子技术。随着基因组学和蛋白质组学的深入开展,SELEX技术会有更广泛的应用前景。［关键词］适配体；抬数富集配体的系统进化；配体；Aptamerscreeningtechnology一SELEX[Abstract]Aptamersfunctionreferstoasingle-strandedantibodyoligonucleotides(RNAorDNA),whichcanformthree-dimensionalstructuressuchasspecialtoiden
4、tifyspecificproleins.Incertaincircumstances,asingle-strendedDNAorRNAcanformavarietyofsubstemceswithcerteiinthermodynamicallystablethree-dimensionalstructureforavarietyoffunctionalmolecules.Inmostcases,thesolutionofthesingle-strandedDNAorRNAconformationalisuncertain,whenthepresence
5、oftargetmoleculesinasuitableenvironmentoccursadaptivesingle-strendedoligofoldedformsahairpin(hairpin),fakeknot(pseudoknot),convexring(bulge),G-tetmd(G-quartet)andotherspecialstrueture,throughhydrogenbonding,hydrophobicstackinginteractions,vanderWaalsandothercloselyintegratedwithth
6、etargetmolecule.Thiscombinationdoesnotneedtorelyontheusualaffinityribosephosphatebackboneandthetargetsubsttmeemaybeaprotein,polypeptidecanalsobesmallmolecules.Thisoligonucleotideiscalledaptamers.Aptamerisproducedbymeansofligandsbyexponentialenrichmentcausedbyaphylogenetictechnique
7、s(systematicevolutionofligandsbyexponentialonrichrnent,SELEX)•SELEXwasinthe1990sdevelopedacombinatorialchemistrytechniqucs.Thistechnologycanbesingle-strandednucleicacidsequencefromarandomlibrarywasscreenedwiththetargetsubstancetoaspecifichighaffinitynucleicacidligands(aptamer),dis
8、sociationconstantofthemonoclonala
