高效液相色谱-荧光检测法同时测定蔬菜中3种磺胺类药物残留.pdf

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1、第38卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报第3期2010年3月ChineseJournalofAnalyticalChemistry429—433DOI：10．3724／SP．J．1096．2010．00429高效液相色谱一荧光检测法同时测定蔬菜中3种磺胺类药物残留李学德鲜殷明刘红玲花日茂许珊珊陈海燕于红霞“(南京大学环境学院，污染控制与资源化研究国家重点实验室，南京210093)(安徽农业大学资源与环境学院，安徽省农产品安全重点实验室，合肥230036)摘要建立了蔬菜中3种磺胺类药物(SAs)的高效液相色谱一荧光检测法。蔬菜样

2、品用甲醇提取3次，将提取液浓缩干，用0．1mol／LHC1溶解残渣，经荧光胺衍生化后，用反相柱(ODS)分离，以乙腈和0．5％醋酸为流动相进行梯度洗脱，用荧光检测器检测。3种SAs的检出限(LOD)为1．02—1．29txg／g，方法的定量限(LOQ)为3．4～4．3ng／g(鲜重)。蔬菜样品中SAs的添加浓度在0．2～1．0ng／g范围内，3种SAs的平均回收率均大于87％，日内与日间RSD均小于10％。实际蔬菜样品测定结果表明，3种SAs在不同蔬菜中均有不同程度检出，总含量为0．0726—0．3709g／g(鲜重)。关键词蔬菜；磺胺

3、类药物；高效液相色谱荧光检测；测定方法1引言磺胺类药物(Sulfonamides，SAs)因其抗菌谱广、抗菌作用较强且价廉易得，广泛应用于畜牧及水产养殖动物的疾病防治¨。同时，人类医疗也大量使用SAs。据报道I4，动物使用抗生素后，有40％一90％抗生素以母体药物和代谢物的形式随粪尿排出体外，SAs可以在畜禽粪尿中长期存在，并通过多种途径进入环境而造成环境污染。尤其是随着动物粪肥的农用，越来越多的抗生素进入农田土壤。Burkhardt等估计，每年进入农田土壤的磺胺类药物约几十～几百克／公顷。珠三角地区菜地土壤中SAs总含量为53．68～

4、155．24kg。SAs可以被农作物吸收蓄积j，威胁农产品安全，最终通过食物链影响人体健康。长期摄人SAs不仅会导致人体内的细菌产生抗药性，而且可以影响泌尿和免疫系统，破坏肌肉、肾脏和甲状腺等组织，甚至诱发甲状腺癌J。目前，人们只重视动物性食品(肉、蛋、奶等)中SAs的残留检测分析’，国际食品法典委员会(CAC)和许多国家都规定了食品中SAs的最大残留限量(MRL)，而对蔬菜等植物性食品中SAs的污染问题尚未引起重视。由于环境样品中磺胺类含量通常很低，现有的分析方法大多通过提取、液液分配、再经固相萃取(SPE)富集净化后利用HPLC分析

5、’’”J，测定过程较烦琐。本研究建立了HPLC法同时测定蔬菜中3种SAs的方法，样品经提取、浓缩后，通过柱前衍生化后分离测定，省去了净化过程，方法灵敏、快速、高效、经济。2实验部分2．1仪器与试剂1200高效液相色谱仪(美国Agilent公司)，配荧光检测器；EYELAN一1100旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司)；L-530离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司)；SHA—C水浴恒温震荡器(江苏金坛市金城国胜实验仪器厂)；KQ-5200超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；N．EVAP112氮吹仪(美国Organomation公司)；匀

6、浆仪(美国Omni公司)；pHS-25酸度计(上海雷磁仪器厂)。磺胺嘧啶(Sulfadiazine，SDZ)、磺胺二甲基嘧啶(Sulfamethazine，SM)和磺胺甲噫唑(Sulfamethox—azole，SMZ)的纯度i>99％(Sigma公司)。荧光胺(Fluorescamine，AlfaAesar公司)，甲醇、乙腈和丙酮均为HPLC级(TEDIA公司)。乙酸为优级纯，其它试剂均为分析纯。实验用水为超纯水。2009-07—12收稿；2009—11-20接受本文系安徽省科技厅重点实验室项目资助E-mail：yuhx@nju．ed

7、u．cn分析化学第38卷2．2样品制备干(鲜)样制备：将蔬菜样品置于烘箱中(<50oC)烘24h，磨碎后备测(匀浆成糊状后备测)。准确称取5．00g匀浆后的鲜样(于样0．50g)于50mL离心管中，加入25mL甲醇，15g无水NaSO(干样不加)，拧紧盖子，置于振荡器上提取30rain，4000r／min离心5rain，将上清液过滤到浓缩瓶中(滤纸先用少量甲醇淋洗)。离心管中剩下的残渣再用甲醇重复提取2次，合并甲醇提取液。将提取液旋转蒸发浓缩至近干(45℃)，再用N吹干。2．3实验方法将3种SAs贮备液分别用0．1mol／LHC1配制成

8、不同浓度的标准溶液。准确吸取0．5mL滤液于2mL样品瓶中，加0．6mol／L乙酸钠缓冲溶液(用1mol／LHC1调节至pI-I=3)0．5mL，摇匀，加入0．02％荧光胺丙酮溶液0．2mL，盖紧盖子，摇匀