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《高效液相色谱_荧光法同时测定血清中的色氨酸和酪氨酸》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、!756!检验医学2010年10月第25卷第10期LaboratoryMedicine,October2010,Vol25.No10.文章编号:16738640(2010)10075605中图分类号:Q517文献标识码:A高效液相色谱荧光法同时测定血清中的色氨酸和酪氨酸任亚萍,唐爱国,周前选,项忠元(中南大学湘雅二医院检验科,湖南长沙410011)摘要:目的建立一种高效液相色谱(HPLC)荧光法(FD)同时测定血清色氨酸(Trp)和酪氨酸(Tyr)的方法。方法色谱条件:MegresC18色谱柱(250mm4.6mm,内径为5m),流动相为1
2、0%乙腈溶液,流速为1.2mL/min,Tyr和Trp的荧光检测激发波长和发射波长分别为exTyr=228nm、exTrp=285nm和emTyr=306nm、em=353nm。血清样本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后取上层清液直接进样进行分析测定。且对样本的保Trp存方法进行了探讨。结果Tyr的保留时间为3.4min,线性范围为0.275~275mol/L,最低检出浓度为0.004mol/L,回收率为90.5%~108.8%。Trp的保留时间为7.6min,线性范围为0.490~196mol/L,最低检测浓度为0.005mol/L,回收率为88.8%~97.2%。T
3、yr和Trp的日内、日间测定的相对标准偏差均<5%,苯丙氨酸、5羟色胺、犬尿喹啉酸、犬尿氨酸和肌酐等物质对该法均无干扰。样本应-20冰冻保存。结论该方法简便、快速、敏感、特异,可同时测定血清Tyr和Trp,适合于临床和科研应用。关键词:色氨酸;酪氨酸;高效液相色谱法;荧光检测HighperformanceliquidchromatographyfluorescencedetectionforthedeterminationoftryptophanandtyrosineinserumRENYaping,TANGAiguo,ZHOUQianxuan,XIANGZhongyu
4、an.(DepartmentofClinicalLaboratory,theSecondXiangyaHospitalofCentralSouthUniversity,HunanChangsha410011,China)Abstract:ObjectiveTodevelopamethodfordeterminationoftryptophan(Trp)andtyrosine(Tyr)inserumbyhighperformanceliquidchromatographyfluorescencedetection(HPLCFD).MethodsThechromatogr
5、aphyconditionswereaMegresC18column(250mm4.6mm,internaldiameter:5m),mobilephase(10%acetonitrile),flowrate:1.2mL/minandtheexcitationandemissionwavelengthsofTyrandTrp:exTyr=228nm,exTrp=285nmandemTyr=306nm,emTrp=353nm.Thedeproteinizedserumsamplesby5%(v/v)perchloricacidsolutionwereseparatedan
6、ddetermined.Thestorageconditionofsamplewasalsostudied.ResultsTheretentiontimesofTyrandTrpwere3.4minand7.6min.Thelinearityrangeswere0.275275mol/Land0.490196mol/L.Thedetectionlimitswere0.004mol/Land0.005mol/L.Therecoverieswere90.5%108.8%and88.8%97.2%forTyrandTrprespectively.Therelatives
7、tandarddeviationsofintradayandinterdaywere<5%.Thephenylalanine,5hydroxytryptamine,kynurenicacid,kynurenineandcreatininehadnointerferingeffectstothedeterminationofTrpandTyr.Thesamplesshouldbestoredat-20.ConclusionsTheHPLCFDmethodissim
