在线固相萃取-高效液相色谱法同时测定人血清中氯氮平、奎硫平和利培酮的含量.pdf

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1、第42卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报第12期2014年12月ChineseJournalofAnalyticalChemistryl823～1827DOI：10．11895／j．issn．0253-3820．140611在线固相萃取-高效液相色谱法同时测定人血清中氯氮平、奎硫平和利培酮的含量沈广虎郭丽萍刘利盛张文英刘晓达(天津安定医院，天津300222)(赛默飞世尔科技，北京100080)摘要使用双梯度液相色谱系统紫外检测器，建立了在线固相萃取液相色谱法全自动、快速、同时测定人血清中氯氮平、奎琉平和利培酮的含量。本方法采用了反相系统，为了提高分

2、离的互补性，使用CapcellMFPh一1柱作为在线固相萃取柱，AcclaimC。柱作为分析柱。在线固相萃取柱以乙腈一水体系作为流动相，流速1mL／min梯度洗脱；分析柱以乙腈一100mmol／L醋酸铵溶液作为流动相，流速1mL／min，梯度洗脱。样品溶液注入到在线固相萃取苯基柱中，根据此柱的限进机制，血清中的蛋白等大分子物质不被保留而排出，而氯氮平、奎琉平和利培酮等小分子化合物得到保留；通过阀切换使用双梯度液相色谱系统的分析泵将固相萃取柱上保留的氯氮平、奎琉平和利培酮等小分子化合物转移到分析柱中进行二次分离，采用外标法测定氯氮平、奎琉平和利培酮的含量，整个

3、前处理和分析过程仅需18rain。氯氮平在10—1800L浓度范围内相关系数为0．9996，低、中、高浓度的平均回收率分别为118．4％，105．0％和105．4％；奎琉平在3．6～640g／L浓度范围内相关系数r为0．9997，低、中、高浓度的平均回收率分别为112．8％，101．1％和101．5％；利培酮在0．71—128g／L浓度范围内相关系数为0．9995，低、中、高浓度的平均回收率分别为100．7％，97．2％和98．8％。结果表明，本方法可极大地提高样品分析效率，快速准确测定人血清中氯氮平、奎琉平和利培酮的含量。关键词高效液相色谱；在线固相萃取；

4、氯氮平；奎琉平；利培酮；人血清1引言目前，氯氮平、利培酮、奎琉平、奥氮平、阿立哌唑和齐拉西酮等是非典型抗精神病药物。其中，氯氮平是传统的非典型抗精神病药物，使用范围较广，但是其在心血管方面副作用发生率较高；利培酮是继氯氮平之后的新型非典型抗精神病药物，相比氯氮平，不良反应发生率较低⋯；奎琉平与利培酮同为起效较快的新型非典型抗精神病药物，但是作为副反应出现的锥体外系症状较利培酮明显变少。3种药物作为常见的非典型抗精神病药物，需要及时监测病人在服用后的体内吸收情况，而建立有效、快速的人血清中氯氮平、利培酮和奎硫平的检测方法，对于病人服用氯氮平、利培酮和奎硫平后体

5、内的血药浓度监测具有现实意义。常规检测人血清中氯氮平、利培酮和奎硫平方法是先将人血清进行离线处理后，再进行液相色谱检测分析，人血清的前处理方法要经过沉淀蛋白、萃取和浓缩等许多手动前处理方式，也有文献采用液液萃取前处理，过程繁琐，极大地影响样品分析效率，人员操作误差较大。本实验采用双梯度液相色谱系统的在线固相萃取功能，人血清样品经过高速离心后，直接进样分析，一维色谱柱固相萃取氯氮平、利培酮和奎硫平，二维色谱柱再次对纯化过的氯氮平、利培酮和奎硫平进行分析，采用外标法分离测定氯氮平、利培酮和奎硫平，简化了样品前处理过程，提高了方法的准确性和样品分析效率。采用同一方

6、法同时检测氯氮平、利培酮和奎琉平，避免了不同药物的检测要更换不同色谱条件，减少了高效液相色谱仪的操作过程，简化了流程。2实验部分2．1仪器与试剂双三元液相色谱系统(美国赛默飞世尔科技公司)，配置SRD3600型6通道真空脱气机，DGP36002014-07．18收稿；2014—10-14接受$E-mail：tiansheng88@aliyun．eom_第42卷双梯度分析型色谱泵，WPS3000TSL自动进样器，DAD3000二极管阵列检测器，TCC一3000住温箱(配有一个六通阀)，变色尼色谱管理软件Chromeleon7．1SRI；离心机(美国赛默飞世尔科

7、技公司)。CapcellMFPh一1(10mm~4．0mill，13本资生堂公司)，Acclaim120C】8(25A0％m一mmx4．蚰6m踟m，5mm，美国赛默飞世尔科技公司)、醋酸铵(分析纯，国药集团化学试剂有限公司)；乙腈(色谱级，美国Fisher公司)；氯氮平、利培酮、奎硫平(>195％，HPLC级，供含量测定用，中国药品生物制品检定所)；去离子水(18．2MQCIII)经Milli—pore纯水机制备。2．2实验方法e～一o3m5一维固相萃取泵的流动相A为乙腈，流动相B为水，CapcellMFPh一1柱为一维固相萃取柱，采用梯度洗脱，流速为lml

8、Jrnin；二维分析泵的流动相A为乙腈，流动相B为1