QiaGen粪便DNA提取试剂盒中文说明书.docx

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1、注意：1.准备好70℃水浴锅。2.所有的离心操作都在室温下（15-25℃），14000转/分钟3.用BufferAL和InhibitEXBuffer溶解任何沉淀都要加热和混匀。4.BufferAW1和BufferAW2都加乙醇。5.使用之前混合所有缓冲液。1.称取200ul样品在2ml的离心管中，离心管放在冰上。2.每个样品添加1mlInhibitEXBuffer，然后持续旋涡混合1min或者直到样品混合均匀。3.在70℃加热悬浮液5min（难以溶解的细胞溶解温度可以提高到95℃），然后旋涡混合15s。4.离心样品1min析出沉淀。5.另取1.5ml离心管加15ulProteinaseK。6

2、.移取200ul步骤4的上清液至1.5ml含ProteinaseK的离心管中。7.然后添加200ulBufferAL，旋涡混合15s。（注意：不要直接添加ProteinaseK到BufferAL中，样品和BufferAL必须充分混合成均匀混合液）8.70℃孵育10min。9.添加200ul乙醇到溶解液中，旋涡混合。10.小心移取600ul步骤9的裂解液到QIAamp旋转柱中，盖上盖子，离心1min。把QIAamp旋转柱放到一个新的2ml的收集管中，丢掉含有滤液的管。11.小心打开QIAamp旋转柱，添加500ulBufferAW1，离心1min。把QIAamp旋转柱放到一个新的2ml收集管中

3、，丢掉包含滤液的收集管。12.小心打开QIAamp旋转柱，添加500ulBufferAW2，离心3min，丢掉包含滤液的收集管。13.把QIAamp旋转柱放到一个新的2ml的收集管中，丢掉旧的含有滤液的收集管，离心3min。14.把QIAamp旋转柱放到一个新的1.5ml的离心管,直接移取200ulBufferATE到QIAamp薄膜上。室温孵育1min，然后离心1min洗提DNA。通过UV吸收度判断DNA纯度，使用BufferATE做空白设计避免结果错误。