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《黑茶茯砖茶发酵中优势菌与有害菌类的分离鉴定.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、黑茶茯砖茶发酵中优势菌与有害菌类的分离鉴定E~r<获砖茶具有“提神解渴，消积化食”的功用，素为我国西北牧区少数民族及其邻近国家居民喜好Z饮料，年销售量达一百多万担Z巨。但就其品质而言，尚无科学Z检验方法，历来均以牛黄霉菌愈多者为佳。抑云黄霉菌有改进获砖茶滋味及汤色的作用。本研究在丁•分离鉴定获砖茶发酵中的优势菌及有害菌类，以寻求优良菌种，业为提高获砖茶品质，改进发酵工艺提供科学依据。一、实验材料与方法分离材料:采自湖南益阳茶厂的优质获砖茶、普通获砖茶及霉变获砖茶样品各一份。培养基:采用马丁氏琼脂、茶汁琼脂及肉美琼脂三种。茶汁琼脂的配制方法如下：茶
2、叶煮汁的制备：称取原料茶50克加水1000ml,煮沸30分钟过滤即得。注意补足蒸发水分。配方茶叶煮汁1000ml葡萄糖10克KZIIPO'0,5克MgS04.7II200,5克pI15,00.5公斤30分钟灭菌分离及计数:采用涂抹平板法进行。稀释液制备系以无菌操作称取去掉茶梗的样品5克,置50ml装有玻璃球的三角瓶中•于振荡机上振荡15分钟，然后逐级稀释至10—e,接种稀释度为10-3,10-'.10-5,10-e四个稀释度，每个稀释度4个重复。二、结果与分析谷本研究承益阳茶厂大力支持•周铁安、孙胜力同志热h介绍工艺及有关情况旅协助采集样品，在此
3、一并致谢。（一）优势种及有害菌的鉴定1.对优势菌（黄霉菌）的鉴定对自马丁氏琼脂及茶汁琼脂上分得的优势菌获1、获2,获3,获4等四个菌株进行了培养观察，其各项特征完全相同，现一}If}详述如下:在Czapek，s琼脂上，菌落从袖黄至橙黃色老年培养转为浅褐黃色至褐色。背面为橙黄色。分泌褐色索于基质中。菌落生长较缓，接种后（28003天才岀现肉眼可见Z菌落。经镜检菌落全由丁囊果一与菌丝组成,未发现分生抱子。在加有微量营养基质的载片」：，菌落特征为中心区域发育着大量橙黄色子囊果，边缘则为黄绿色的分生袍子梗丛。一户囊果黄色，球形或近似球形，直径100-14
4、2,8EL;子囊球形，橙黄色，直径约10!}，每个子囊含有8个子囊饱子;子囊抱子淡黄绿色，光滑，似皮带轮，直径4,4-5,8w,厚3.4-.4.3E};分生抱子使长度变化较大，顶囊宽约24!};小梗直接生丁•顶囊上，9,i-7.3;<2,3-2,9!};少数小梗增一长而形成细短梗，—上生次级小穗;分生抱子穗放射形•较大;分生抱子球形，刺面，直径4,4-5.8E}o据上述各项特证，特别是其主要特征子囊果和子囊抱子的大小及颜色，与舍氏曲霉(:lspergilluschevalieri)J}}本相A。故鉴定为A,chevalierio2•有害菌类的鉴定
5、(1)x.J.优势有害菌(黑霉菌)获5,庆14的鉴定二菌株各项基本特征如卜：在Czopek's琼脂上，菌落初为白色渐转淡黄同时开始自一基质形成分生抱子便，随着分生抱子的成熟而变为淡褐色至黑褐色,由丁先后所生Z分生抱子头色泽不同而形成同心环纹。14号菌株与5号菌株在下列特征上略有区别，即14-号菌株的分生抱子头稍大，分生袍子梗略长，抱子头的颜色较深，呈深黑色，有鉤珠。二菌株的具他特征为分生抱子梗光滑，长560-1428u,宽13,2-16.2w,顶囊球形,宽27-48N;小便6.76-7,3x31。间细胞长23,8-26.5N};分生抱子5号菌株2
6、,9-3,8N},4号菌株3,5-4。4uo据上述各项特征。5号菌株与14号菌株在某些特征上虽有微小差别，但其主要特征，即分生抱子的大小和颜色，间细胞长短等均与黑曲霉(Aspergillusniger)基木相同,故鉴定为A,nigero(1)对次要有害菌(绿霉菌)获12—号菌株的鉴定获12号菌株的各项特征如下：在Czapek，s琼脂上，菌落蓝绿色至橄榄绿，老年培养转为暗绿色。全致析绒状，菌落边缘具有一圈由不育菌丝组成的白边，背面淡黄或淡棕色。分生抱子穗大多呈坚固的直柱状。小梗长7,3-11.6!},宽约3w。分生抱子球形，光滑，直径约3!a0将该
7、菌培养}Czapek氏液中，取其滤液与2%FeC13反应，可见强烈的黑绿色。据上述各项特征均与常现青霉（Penici-lliurnfrequentans）本相f}}J,故鉴定为r,frequentanso（3）对次耍有害菌（白莓菌）获7一号菌株的描述在Czapek's琼脂上，菌落初为白色，后转蓝绿色至橄榄绿，具自边，浅绒状。背而污白色。小梗长6,3-9.}EL,宽约3w;分生泡子球形光滑，直径2,0-2,4wo帚状枝单轮，初步鉴定为Penicilliumsp,（二，诀砖茶的微生物种类与数量组成表1在马丁氏琼脂上三种获砖茶的微生物种类与数t组成（万
8、/克干茶）、,ChevalierilA,nigerIPenicilliumSP{七质获砖茶普通获砖茶霉变获砖茶2872'13罕见1.28
