Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程.doc

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1、Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程已有179次阅读2011-7-1713:35起草部门质检部被替代文件新文件发放编号：分发部门质检部 1 目的   制定Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程，确保操作人员能正确规范地操作，维护液相色谱仪。2 适用范围   适用于Agilent1100高效液相色谱仪的使用，维护。3 编写依据   Agilent1100高效液相色谱仪使用说明书4 职责   QC相关检验人员对本仪器操作规程的实施负责。5 内容5.1 安全注意事项   本仪器应良好接地，以防止

2、触电及释放静电；本仪器经常处于高浓度的有机蒸汽环境中，故应通风良好，禁止出现电火花；配制流动相或接触有机溶剂时应戴橡胶手套及其它防护用品。5.2 仪器组成   本仪器由LC-10ATVP泵、7725手动进样器、柱温箱、Agilent1100紫外-可见光检测器、色谱工作站(N2000或其它工作站)。5.3 日常使用操作步骤5.3.1 开机 打开计算机，进入Windows系统，CAGBootpServer程序将自动运行。打开HPLC1100各模块电源，等仪器自检通过，并且与计算机通讯成功（约1～2min）后，进入Online工

3、作站。5.3.2 系统初始化（主要目的：排除系统中的气泡）5.3.2.1 打开Purge阀5.3.2.2 加大泵流量并开启泵，快速冲洗实验通道，至无气泡从废液管排出。降低流量及溶剂比例成实验初始条件，并单击OK确认执行；5.3.2.3 关闭Purge阀，完成系统初始化。5.3.3 系统平衡（主要目的：平衡、稳定色谱柱、柱温以及灯的能量）   调出本次实验所需方法，保持泵继续工作，以实验初始的流动相冲洗、平衡柱子一段时间。（一般约30min，可自己根据本人的仪器配置情况计算，要求至少以色谱柱几何体积5～10倍体积的流动相冲洗

4、、平衡系统。）5.3.4 在适当时间，开启柱温箱和检测器，使得柱温稳定，检测器灯的能量稳定。（一般灯需要20min左右的稳定时间。）点击SystemOn图标，可以同时打开柱温箱和检测器。打开View菜单下的OnlineSignal窗口，单击Change键，选择需要监测的色谱信号并设定合适的X、Y轴范围，观测色谱基线。5.3.4 基线稳定后可以进样分析（经验上，基线波动1～2mAU（常规分析）或1～0.5mAU（痕量分析）就可算是基线稳定。）填写SampleInformation5.3.5 手动打针进样并切换进样阀5.3.6

5、 泵的操作步骤及新旧流动相的更换5.4 流速的设定在初始画面，按func键，光标在“flow”的输入位置闪烁,设定所需流速，按Enter键确认。继续按func键，设置压力上限和下限，按Enter键确认；继续按Func键至出现SetSystemParam，输入1为双泵各自单独控制，输入2为双泵联动，且为主泵。5.4.1 当使用简单的二元线性高压梯度洗脱时，下面举例说明编写时间程序的步骤（在主泵上编写）：时间(min)流动相A(%，V/V)流动相B(%，V/V)0851530010045010050851555STOP  5.

6、4.1.1 初始设定   通过专用光纤将两个输液泵连接起来，输液管路连接完毕后，设定主泵（A泵）的SystemParam参数为2,设定从泵（B泵）的SystemParam参数为1；设定两泵的ADRS参数为85；设定Local参数为1（本地控制）；设定每台泵的高低压限。A泵设定的值只对A泵有效，B泵设定的值只对B泵有效，设定后，只能用A泵控制B泵。5.4.1.2 设定初始条件   在初始屏幕，按Func键，设定泵A与泵B流速之和；按conc键，设定流动相B的浓度15%，流动相A的浓度为100%-流动相B的浓度%=85%5.4

7、.1.3 编写程序a 按CE键，返回初始屏幕，按Edit键，屏幕显示已经设定的程序步数和剩余的程序步数；b 按Enter键，显示参数设定屏幕，光标在Time区闪烁，输入时间数值30分钟，按Enter键。c 重复按Func键，直到显示BCNC，使用数字键输入浓度100%（相应地，流动相A的相对浓度为0%），并且按Enter键确认。d 按Enter键，光标在Time区闪烁，输入时间数值45分钟，按Enter键。e 重复按Func键，直到显示BCNC，使用数字键输入浓度100%（相应地，流动相A的相对浓度为0%），并且按Ente

8、r键确认。f 按Enter键，光标在Time区闪烁，输入时间数值50分钟，按Enter键。g 重复按Func键，直到显示BCNC，使用数字键输入浓度15%（相应地，流动相A的相对浓度为85%），并且按Enter键确认。h 按Enter键，光标在Time区闪烁，输入时间数值55分钟，按Enter键。i 重