Agilent1100型高效液相色谱仪操作规程

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1、Agilent1100型高效液相色谱仪操作规程溶剂架在线脱气泵Purge阀自动进样器柱温箱检测器溶剂瓶仪器各组件泵：四元泵、二元泵在线脱气器进样器：自动进样器及手动进样器柱温箱检测器：DAD检测器、UV检测器Agilent1100在线脱气机Agilent1100在线脱气机工作原理何时需要使用Agilent在线脱气机如果在低UV波长段，用最高灵敏度进行检测如果要求使用最佳进样精度如果要求保留时间重现性很高（在0.5ml/min流速以下）如果样品和检测对流动相中溶解氧敏感Agilent1100泵Agilent1100四元泵

2、工作原理Agilent1100泵头结构Agilent1100自动进样器结构Agilent1100自动进样器工作原理Agilent1100柱温箱结构柱温箱流路连接开机打开计算机,进入WindowsNT或Windows2000画面,并运行BootpServer程序（点击左下方【BootpServer】图标）打开色谱仪各组件电源，待BootpServer里显示已联上各组件的信息及各模块自检完成后，双击Instrument1Online，图标打开工作站。化学工作站自动与1100通讯。进入的工作站画面如下所示排气将流动相放入溶剂

3、瓶中，打开Purge阀，依次单击【Pump】→【SetupPump】，设Flow为2ml/min，单击OK，再依次单击【Pump】→【control】，选中on，单击OK，则系统开始Purge至管路无气泡为止，切换管路反复操作至所需管路均无气泡。在【control】选项中选off，关闭泵，关闭Purge阀。单击泵下面瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。如图所示。打开10％异丙醇溶液控制阀，用针筒抽吸至管路中有液体流出。调节控制阀松紧，控制流量至流出量约为每分钟5～15滴。编辑分析方法新方法建立：点击【Method】，点

4、击【Editentiremethod】或【Newmethod】选项，进行方法编缉。在MethodComments中加入方法的信息如方法的用途等泵参数设定在Flow处输入流量,在SolventA、B、C、D处输入比例，也可Insert一行”Timetable”,编辑梯度，在PressureLimitsMax处输入柱子的最大耐高压。单击Ok进入下一画面自动进样器参数设定选择合适的进样方式进样体积洗瓶位置进样方式：“StandardInjection”只能输入进样体积“InjectionwithNeedleWash”可以输入

5、进样体积和洗瓶位置此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针Useinjectorprogram---可以点击Edit键进行进样程序编辑点击Ok进入下一画面柱温箱参数设定在”Temperature”下面的方框内输入所需温度,并选中它,点击”more>>”键,选中“Sameasleft”使柱温箱的温度左右一致点击ok进入下一画面检测器参数设定－UV在”Wavelength”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在“Peakwidth(Responsetime)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间,如>0.1m

6、in(2s)在Timetable中可以Insert一行输入随时间切换的波长点击ok进入下一画面检测器参数设定－DAD样品波长--一般选择最大吸收处的波长样品带宽BW—一般选择最大吸收值一半处的整个宽度参比波长—一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域参比带宽BW—至少要与样品信号的带宽相等许多情况下用100nm作为缺省值PeakwidthResponsetime其值尽可能接近要测的窄峰峰宽选中所用的灯点击Ok进入下一画面方法保存单击Method菜单选中Savemethodas输入一方法名，如test单击Ok编辑分析方

7、法选择已有方法：点击【Method】，点击【Loadmethod】选项，选取已存的各种操作方法。样品分析与采集数据将样品放于样品盘中相应位置，所有的样品均需澄清。待仪器显示Ready，基线平稳，从【Runcontrol】菜单中选择【RunMethod】，开始进样分析。数据处理：单击【View】菜单，单击【Dataanalysis】选项，进行数据分析。单击【View】菜单，单击【MethodandRuncontrol】选项，回到样品分析界面。数据分析方法编辑从File菜单选择Loadsignal选中您的数据文件名单击Ok

8、积分从Integration中选择“Autointegrate”,如积分结果不理想,再从菜单中选择IntegrationEvents选项选择合适的SlopesensitivityPeakwidthArearejectHeightreject从Integration菜单中选择Integrate选项则数据被积分如积分结果不理想则修改相