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时间:2018-01-22
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1、Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程已有179次阅读2011-7-1713:35起草部门质检部被替代文件新文件发放编号:分发部门质检部 1 目的 制定Agilent1100高效液相色谱仪使用与维护操作规程,确保操作人员能正确规范地操作,维护液相色谱仪。2 适用范围 适用于Agilent1100高效液相色谱仪的使用,维护。3 编写依据 Agilent1100高效液相色谱仪使用说明书4 职责 QC相关检验人员对本仪器操作规程的实施负责。5 内容5.1 安全注意事项 本仪器应良好接地,以防止触电
2、及释放静电;本仪器经常处于高浓度的有机蒸汽环境中,故应通风良好,禁止出现电火花;配制流动相或接触有机溶剂时应戴橡胶手套及其它防护用品。5.2 仪器组成 本仪器由LC-10ATVP泵、7725手动进样器、柱温箱、Agilent1100紫外-可见光检测器、色谱工作站(N2000或其它工作站)。5.3 日常使用操作步骤5.3.1 开机 打开计算机,进入Windows系统,CAGBootpServer程序将自动运行。打开HPLC1100各模块电源,等仪器自检通过,并且与计算机通讯成功(约1~2min)后,进入Online工作站。5
3、.3.2 系统初始化(主要目的:排除系统中的气泡)5.3.2.1 打开Purge阀5.3.2.2 加大泵流量并开启泵,快速冲洗实验通道,至无气泡从废液管排出。降低流量及溶剂比例成实验初始条件,并单击OK确认执行;5.3.2.3 关闭Purge阀,完成系统初始化。5.3.3 系统平衡(主要目的:平衡、稳定色谱柱、柱温以及灯的能量) 调出本次实验所需方法,保持泵继续工作,以实验初始的流动相冲洗、平衡柱子一段时间。(一般约30min,可自己根据本人的仪器配置情况计算,要求至少以色谱柱几何体积5~10倍体积的流动相冲洗、平衡系统。
4、)5.3.4 在适当时间,开启柱温箱和检测器,使得柱温稳定,检测器灯的能量稳定。(一般灯需要20min左右的稳定时间。)点击SystemOn图标,可以同时打开柱温箱和检测器。打开View菜单下的OnlineSignal窗口,单击Change键,选择需要监测的色谱信号并设定合适的X、Y轴范围,观测色谱基线。5.3.4 基线稳定后可以进样分析(经验上,基线波动1~2mAU(常规分析)或1~0.5mAU(痕量分析)就可算是基线稳定。)填写SampleInformation5.3.5 手动打针进样并切换进样阀5.3.6 泵的操作步骤及
5、新旧流动相的更换5.4 流速的设定在初始画面,按func键,光标在“flow”的输入位置闪烁,设定所需流速,按Enter键确认。继续按func键,设置压力上限和下限,按Enter键确认;继续按Func键至出现SetSystemParam,输入1为双泵各自单独控制,输入2为双泵联动,且为主泵。5.4.1 当使用简单的二元线性高压梯度洗脱时,下面举例说明编写时间程序的步骤(在主泵上编写):时间(min)流动相A(%,V/V)流动相B(%,V/V)0851530010045010050851555STOP 5.4.1.1 初始设定
6、 通过专用光纤将两个输液泵连接起来,输液管路连接完毕后,设定主泵(A泵)的SystemParam参数为2,设定从泵(B泵)的SystemParam参数为1;设定两泵的ADRS参数为85;设定Local参数为1(本地控制);设定每台泵的高低压限。A泵设定的值只对A泵有效,B泵设定的值只对B泵有效,设定后,只能用A泵控制B泵。5.4.1.2 设定初始条件 在初始屏幕,按Func键,设定泵A与泵B流速之和;按conc键,设定流动相B的浓度15%,流动相A的浓度为100%-流动相B的浓度%=85%5.4.1.3 编写程序a 按
7、CE键,返回初始屏幕,按Edit键,屏幕显示已经设定的程序步数和剩余的程序步数;b 按Enter键,显示参数设定屏幕,光标在Time区闪烁,输入时间数值30分钟,按Enter键。c 重复按Func键,直到显示BCNC,使用数字键输入浓度100%(相应地,流动相A的相对浓度为0%),并且按Enter键确认。d 按Enter键,光标在Time区闪烁,输入时间数值45分钟,按Enter键。e 重复按Func键,直到显示BCNC,使用数字键输入浓度100%(相应地,流动相A的相对浓度为0%),并且按Enter键确认。f 按Enter键
8、,光标在Time区闪烁,输入时间数值50分钟,按Enter键。g 重复按Func键,直到显示BCNC,使用数字键输入浓度15%(相应地,流动相A的相对浓度为85%),并且按Enter键确认。h 按Enter键,光标在Time区闪烁,输入时间数值55分钟,按Enter键。i 重
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