Agilent1100高效液相色谱仪操作规程

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1、Agilent1100高效液相色谱仪操作规程操作说明：1.开机前准备：1.1仪器设备：Agilent1200LC●G1322A(在线脱气机)。●G1311A(四元泵)。●G1329A（标准型自动进样器）。●G1316A（柱温箱）。●G1315A（DAD检测器）。●色谱柱1.2溶剂准备：●有机相必须是色谱级纯。●水相必须是二次蒸馏水或用二级蒸馏水配置的缓冲盐溶液、酸碱溶液。●流动相使用前必须过0.45μm的微孔滤膜。有机相和水相微孔滤膜的选择参考下表。产品类别代表产品品系产品特点纤维素酯类混合纤维素膜（CN-CA）水相成孔性能好，亲水性好，材料成本低。可耐稀酸。不适合于酮

2、类、酯类、强酸、强碱类液体过滤。聚酰胺类尼龙6（PA-6）通用具有亲水性，较耐碱不耐酸。在酮、酚、醚及高分子醇类不被腐蚀。聚砜类聚砜（PS）通用良好的化学和热稳定性，耐辐射，机械强度高。聚偏氟乙烯/聚四氟乙烯膜PDEF/PTFE有机PDEF耐化学腐蚀，耐氧化，耐高温，疏水性（酒精处理后变清水性），PTFE耐酸碱性强。聚烯烃类聚丙烯膜（PP）有机具有良好的化学稳定性，耐酸碱和各种有机溶剂。价格便宜，但孔径分布宽。无机材料陶瓷、玻璃BP、金属膜通用耐高温，耐有机溶剂、耐生物降解等。2.基本操作步骤:(一)、开机：1、打开计算机,进入中文WindowsXP画面,并运行CAGB

3、ootpServer程序（部分安装程序不需要运行Bootp）。2、打开1200LC各模块电源。3、待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,点击“视图”菜单中的“仪器实际值包括了“进样器状态”，“四元泵状态”，“柱温箱状态”，“DAD状态”。”，“在线光谱显示当前光谱，可以调整“吸光度范围”。（1至4000mAU，步长为1），缺省值为2000mAU。”，“化学工作站状态显示化学工作站就绪情况。”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界

4、面。5、把流动相放入溶剂瓶中。6、打开冲洗阀。7、点击“泵”图标，点击“设置泵…”选项，进入泵编辑画面。8、设流速：5ml/min，点击“确定”。9、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“启动”“待机”就是泵马达仍处于激活状态，再次打开泵时，无需对其进行重新初始化。，点击“确定”方法出错时，可以选择“使用当前方法”，用于确保检测到仪器错误时，泵能够以受控制的方式关闭。具体操作为：当前方法将立即复制到泵，并保存为“错误方法”。检测到仪器错误时，泵将自动执行此方法。，则系统开始冲洗，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。

5、10、点击“泵”图标，点击“控制…”选项，选中“关闭”，点击“确定”关泵，关闭冲洗阀。11、点击“泵”图标，点击“设置泵…选项”，设流速：例如1.0ml/min。12、点击泵下面的瓶图标，如下图所示（以单元泵为例），输入溶剂的实际体积和瓶体积。也可输入停泵的体积，点击“确定”。13、点击“泵”图标，点击“泵辅助设定…”，设定“最流速梯度您可以为溶剂流量的变化速率设定一个限制，以保护您的分析柱。限值：0.1至100ml/min/min。缺省值为100ml/min/min。”，“最小冲程此参数定义活塞1的一个冲程转移的流动相的体积。泵的冲程体积影响混合性能和梯度线性。当冲程

6、被设置为“自动”（缺省值）时，泵将根据设定的流速选择冲程体积。在流速最大为100μl/min时泵使用20μl冲程，在流速为5ml/min时冲程以线性方式增加到100μl。流速在5ml/min和10ml/min之间时，冲程始终为100μl。您可以将最小冲程设置为介于20和100μl之间的值。如果您选择的最小冲程小于以“自动”模式运行的泵将使用的最小冲程，泵将使用较大的冲程体积。”，“压缩因子流动相的压缩因子可以影响泵的性能。要获得最佳的流量准确度和混合性能，您可以根据所使用的流动相来设置该参数。压缩因子的缺省值为100*10-6。如果四元泵混合了压缩因子差别很大的溶剂（例

7、如水和甲醇），则建议您使用此缺省值。限值：0到150。”，“主通道”。（二）、数据采集方法编辑：1、开始编辑完整方法：●从“方法”菜单中选择“编辑完整方法…”项，如下图所示选中除“数据分析”外的三项，点击“确定”，进入下一画面。2、方法信息：●在“方法注释”中加入方法的信息（如：测试方法）。●点击“确定”，进入下一画面。3、泵参数设定：（以四元泵为例）●在“流速”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂B”处输入80.0,(A=100-B-C-D),也可“插入”一行“时间表”,编辑梯度。在“压力限”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。●点击