探讨结核感染T细胞斑点试验在辅助诊断AIDS合并结核病中的应用价值.pdf

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1、中国预防医学杂志2017年1月第18卷第1期ChinPrevMed,Jan.2017,Vol.18No.1·79·DOI:10.16506/j.1009-6639.2017.01.021·经验交流·探讨结核感染T细胞斑点试验在辅助诊断AIDS合并结核病中的应用价值范伟光保定市传染病医院检验科,河北保定071000关键词:获得性免疫缺陷综合征;结核病;结核感染T细胞斑点试验;回顾性分析中图分类号:R512.91文献标识码:B文章编号:1009-6639(2017)01-0079-03获得性免疫缺陷综合征(acquiredimmunode-3月在保定市传染病院感染

2、科门诊及住院收治的48ficiencysyndrome,AIDS)是主要由人类免疫缺陷例AIDS感染合并TB患者,其中男性31例,女病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)入性17例,年龄26~70(47.5±14.0)岁。患者经侵机体感染而成的一种危害性较大且死亡率极高的HIV初筛及确认试验(Westernbolt免疫印迹疾病,致患者因免疫功能低下,常合并各种机会性法),2次确定阳性,病情符合《艾滋病诊疗指南》[2]感染。结核病(tuberculosis,TB)是由于结核分诊断标准。另外选取46例经HIV初筛及确认试枝杆菌的侵犯和

3、感染造成的,不仅是AIDS患者最验(Westernbolt免疫印迹法),2次确定AIDS阴常见机会性感染因素之一,也是导致其死亡的首要性住院TB患者作为对照组,其中男性30例,女原因,约有40%的HIV感染者死于TB。AIDS与性16例,年龄27~72(48.0±13.5)岁。两组患TB的合并,并非简单的两个病原体感染合并,而者结核病症状、体征、影像学、细菌学结果及抗结[3]是互为因果、影响、促进使病情的进展及恶化,给核疗效的诊断依据《肺结核诊断和治疗指南》,[1]均无心、脑、肝、肾及消化道等慢性疾病,并排除临床对疾病的诊断和治疗带来诸多难题和挑战。两者已成为

4、全球范围内两大共同关注的公共卫生问急性病毒感染、严重肝病、肾衰竭等病史,年龄结题,严重危害人类健康和生命安全。本研究以保定构、性别分布具有可比性。市传染病院住院的48例AIDS感染合并TB患者1.2方法和46例未感染AIDS的TB患者作为研究对象,1.2.1检查试剂及设备结核感染T细胞斑点试采用结核感染T细胞斑点试验(Tcellspottest验试剂盒由上海复星长征医学科学有限公司提供,fortuberculosisinfection,T-SPOT.TB)、γ干扰结核分枝杆菌IFN-γ检测试剂盒(IGRA)由北京素释放试验(interferongammarel

5、easeassay,万泰生物药业股份有限公司提供,卡介苗纯蛋白衍生物(BCG-PPD)针剂(国产人型)由成都生物IGRA)和纯蛋白衍生物(pureproteinderivative,PPD)试验诊断,分析三种试验方法的阳性检出制品研究所有限责任公司提供。SANYOCO2细胞率、灵敏度(Sn)、特异性(Sp)、阳性预测值培养箱由日本三洋公司生产提供,其操作严格按照(PPV)和阴性预测值(NPV)。探讨T-SPOT.TB培养箱的SOP进行。试验在AIDS感染合并TB临床诊断的应用价值,1.2.2样本采集以上研究对象均在次日清晨空以期为临床科学选择试验方法提供实验室

6、依据。腹(禁食10h以上)由专职护士抽取一侧肘静脉血5ml,置于真空肝素抗凝管中,颠倒混匀即可。1资料与方法1.2.3结核感染T细胞斑点试验采集血样本4h内在无菌条件下分离外周血单个核细胞(PB-1.1一般资料观察组为2013年4月~2016年MC),用AIM-V培养液重悬细胞,将细胞浓度调成到2.5×106/ml的标准品溶液。分别加50作者简介:范伟光,硕士研究生,主管检验技师,主要从μl事临床基础检验、生化检验、免疫检验、微生AIM-V培养液、植物血凝素(PHA)、结核分枝物检验等检验工作杆菌特异抗原A和抗原B于已包被抗IFN-γ抗体通讯作者:范伟光,E-

7、mail:fanweiguang22@163.com微量板中的阴性对照孔、PHA对照孔、A和B检·80·中国预防医学杂志2017年1月第18卷第1期ChinPrevMed,Jan.2017,Vol.18No.1查孔,再依次向每孔加入100μl含2.5×106/ml出率比较结果显示,两组T-SPOT.TB检查方法的PBMC标准品溶液,将微孔板置于5%CO2、37的阳性检出率均高于IGRA和PPD试验(P<℃细胞培养箱中培养20h后。用PBS溶液洗脱30.05),见表1。次,再向每孔加入50μl酶标记的抗IFN-γ抗体,4℃孵育1h,PBS溶液洗脱3次,再向每孔加

8、底表1T-SPOT.TB、IGRA和P

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