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1、真菌毒素分析一般固体食詁多选用浸渍、洗脱、索氏冋流方法等，将样品和提取液混合后搅样30〜40min,或快速搅拌3min；液体食品则多选用液液分配的方法。从动物组织中提取真菌毒素时，为了降低动物蛋白质对实验结杲的干扰，同时为使与某些蛋白质结合的毒素（如赭曲霉毒素A,ochratoxinA,OTA）有效释放出来，在捉取溶剂系统中可适当加入一些蛋口水解酶以提高冋收率。必须对样胡提取液进行分离纯化，在确保不损失待测毒素的前提下除去干扰杂质，以保证测定结果的准确度。通常是将提取的冇机溶剂经石油醯或正己烷处理，以除去脂质和杂质。但这一方法较为烦琐，且效杲也不尽如人意。柱色谱法是
2、最常用的净化方法，其貝体方法虽因样品不同而冇所差异，但其基本操作是相同的。真菌毒素含量的检测方法一直是制约真菌毒素与人类疾病研究进展的关键。真菌毒索含量的检测方法通常分为三类：①理化检测方法，包括层析、气相色谱、液相色谱、气（液）质联用等；②生物学检测方法，包括皮肤毒性实验、致呕吐实验、种子发芽实验等；③免疫化学检测方法，利用抗原抗体反应的原理进行真菌毒素检测，目前较为常用的是酶联免疫吸附试验（EusA）0三类方法中以免疫化学检测法灵敏度最高，但因需要特殊的抗体而受限制。真菌毒素的分析口前最常用的方法是理化检测方法，分析过程一•般分为以下几个步骤。一、提取从样品小提
3、取真菌毒素回收率的高低对于检测结果的准确性影响很大。食品基质严重影响真菌毒索的提取。食品基质不同，所采用的提取方法和溶剂系统各异。一般固体食品多选用浸渍、洗脱、索氏冋流方法等，将样品和提取液混合后搅拌30〜40min,或快速搅拌3mim液体食品则多选用液液分配的方法。从动物组织中提取真菌毒索时，为了降低动物蛋白质对实验结果的干扰，同时为使与某些蛋口质结合的毒素（如赭曲霉毒素A,ochratoxinA,OTA）有效释放出來，在提取溶剂系统屮可适当加入一些蛋白水解酶以捉高回收率。在食品和农产品基质屮提取真菌毒素所选择的溶剂取决于待测毒素种类（--种还是多种）、毒索性质、
4、毒索在提取溶剂中的溶解度、提取溶剂的毒性和价格、非测定成分（杂质）在提取溶剂中的分配系数等。一般选用毒性小、极性大、价格低廉的溶剂系统。常用的真菌毒素捉取溶剂包括卬醇、氯仿、丙酮、己烷、乙酸乙酯、乙睛和水的一种或多种不同配比的混合物。评价一种溶剂系统提取效果优劣的依据是回收率和提取时间，优良的溶剂系统应是毒素回收率高、干扰朵质少、提取时间短。如将脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxvnialenol,DON）标准品添加到饲料屮，用乙睛水（21：4,体积比）充分混合搅拌3min即可将毒素儿乎全部提取出来，而要从天然污染的饲料中提取相当量的该毒素则需要16min,因此确定检测方
5、法的冋收率吋应以天然污染的样品为基准。对伏马菌素（fumonisins）的研究结果显示,虽然甲醇一水（80：20或75：25,体积比）是从玉米及其制品中提取天然污染伏马菌素Bl、B2和B3的常用溶剂，并已成为AOAC法定方法中的指定提取溶剂系统，但在振荡条件下，乙月青一水（50：50,体积比）对玉米屮伏马菌素的提取效果优于甲醇一水。用乙月青一甲醇一水（25：25：50,体积比）和甲醇一水（80：20、，体积比）分别提取玉米片中天然污染的伏马菌素七次，结果前者的提取效果优于后者。待测食品基质与溶剂Z比是影响毒索回收率的乂一因索。AoAC最住食品（bestfoods）方
6、法屮规定分析花生屮的黄曲酶毒素（aflatoxins,AFs）时提取溶剂（甲醇一水，55：45,体积比）与样品Z比为2.5:1,但实践证明该比例并非最佳,理想的配比方案应高于2・5：1,特别是分析花生粗粉中的AFs时更应增加提取液的用量。近来的研究表明，提取温度影响毒索的回收率。适当升高提取温度可增加玉米及其制品中伏马菌素的回收率。止常情况下用乙睛：水（3：1或1:1,体积比）提取伏马菌素的回收率优于甲醇：水⑶1或4：1,体积比），但当温度升至80°C时,后者对玉米中伏马菌索的提取效率等同或高于前者。二、分离纯化因为样品中含有大量的蛋白质、色索、脂肪、糖和无机盐等多
7、种物质，干扰物质在提取时也会进入提取液中，从而干扰待测毒素的测定。因此必须对样品提取液进行分离纯化，在确保不损失待测毒素的前提下除去干扰朵质，以保证测定结果的准确度。通常是将提取的有机溶剂经石油醸或止C烷处理，以除去脂质和杂质。但这一方法较为烦琐，且效果也不尽如人意。柱色谱法是最常用的净化方法，其具体方法虽因样品不同而有所差异，但其基木操作是相同的。根据待测物质的性质，I•柱色谱净化可分别使用吸附色谱柱和分配色谱柱。常用的吸附剂有硅镁型吸附剂、氧化铝、活性炭、硅胶等，聚酰胺也可用作净化剂。常用的分配色谱固定相物质有硅藻土、纤维素等。用柱色谱净化，除使用单一的吸附
