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《泥蚶虫血红蛋白Hb2a基因的克隆和表达分析【开题报告】》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、毕业论文开题报告生物工程泥蚶虫血红蛋白Hb2a基因的克隆和表达分析1.课题研究意义及国内外研究现状研究意义：泥蚶（Tegillarca granosa）是浙江省滩涂养殖的主导种类，也是我国传统养殖贝类之一。近年来养殖泥蚶病害死亡频发的现象日益严重。因此，探索泥蚶的免疫发生机制和调控机理，研究培育泥蚶抗病新品种显得十分迫切重要。进年来越来越多的研究发现低等和高等动物血红蛋白和血蓝蛋白具有抗菌免疫功能，而同为低等动物，仅有非特异性免疫的泥蚶，其血红蛋白是否也具有相似功能？这对于研究泥蚶免疫发生研究有重要意义。研究现状：近年研究表明血红蛋白除能运输氧气外，还有多种生物
2、学功能，是一种多功能蛋白家族。法国学者Nedjar-Arroume等发现，从牛消化器官血红蛋白的水解片段中利用半制备型反相高效液相色谱纯化的一些片段，对藤黄微球菌（Micrococcusluteus）A270、无毒李斯特菌（Listeriainnocua）、大肠杆菌（Escherichiacoli）和肠炎沙门氏菌（Salmonellaenteritidis）具有抑菌活性；Jiang等研究得出人血红蛋白在毒力因子的刺激下会自动氧化成三价铁形式——高铁血红蛋白，便获得了一种假性过氧化物酶的活性，催化产生超氧阴离子，超氧阴离子进而产生有毒衍生物，例如羟基自由基和次氯酸
3、等，起到杀菌作用；Fang等表明血红细胞内的血红蛋白会释放出活性氧，迅速杀死致病微生物，证实活性氧介导的抗菌活性是一种十分有力的机体防御机制。2.课题研究的主要内容、预期目标和研究方案研究内容：1．对泥蚶虫血红蛋白Hb2a基因进行cDNA克隆和分析。2．泥蚶Hb2a基因组织表达特异性分析预期目标：1、熟悉基因克隆及表达技术2、了解泥蚶虫血红蛋白Hb2a基因的克隆和表达研究方案：1.根据已有的EST序列，然后用3′,5′RACE的方法扩增基因Hb2a的cDNA全长；2.利用NCBIblast数据库、DNAman以及mega等相应生物分析软件，分析基因序列。3.利用
4、荧光定量qRT-PCR法检验血液、肝胰腺、斧足、外套膜、闭壳肌、鳃等等组织中的表达规律；3.课题进度计划20010.8.25—20010.10.30：完成毕业论文选题，接受任务书，系统查找、收集相关资料，完成实验计划和方案；20010.11.1—2011.1.20：申请实验教室、实验用品和相关试剂开始进行实验，记录关键性的实验步骤和实验数据；2011.1.21—2011.2.25：数据的整理以及完成论文初稿。4.参考文献[1]赫崇波,丛林林,葛陇利等.文蛤养殖群体和野生群体遗传多样性的分析[J].中国水产科学,2008,15(2):215-221.[2]韩志强,
5、高天翔,王志勇等.黄姑鱼群体遗传多样性的分析[J].水产学报,2006,30(5):640-646.[3]王伟继,岳志芹,孔杰等.分子标记技术的发展及其在海洋生物中的应用[J].海洋水产研究,2005,26(1):80-85.[4]Nedjar-ArroumeN,Dubois-DelvalV,AdjeEY,etal.Bovinehemoglobin:anattractivesourceofantibacterialpeptides.Peptides.2008,29(6):969-77.[5]DeckerH,JaenickeE.Recentfindingsonph
6、enoloxidaseactivityandantimicrobialactivityofhemocyanins.Developmentalandcomparativeimmunology.2004,28(7-8):673-87.[6]JiangN,TanNS,HoB,etal.Respiratoryprotein–generatedreactiveoxygenspeciesasanantimicrobialstrategy.Natureimmunology.2007,8(10):1114-22.[7]FangFC.Antimicrobialreactiveox
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