泥蚶(tegillarca granosa)抗氧化酶基因的克隆与表达分析

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1、万方数据论文题目：遑蚶(磁型旦丝堡幽丝旦盟2拉氢业酶基因的克隆皇表达分析答辩委员会主席：§笺盟邋选!出蝴答辩委员会成员：堕∑垄煎巡监丛鎏辩她晰)煎叠堇醯殳!堑垫垄盔奎水辛碚崤研)论文答辩日期：三坐垦皇目!]旦万方数据温州医科大学硕士学位论文目录目录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．5Abstract．．．⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯．⋯．．．．⋯．⋯．．．．．．．．．．．．⋯．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．．．⋯⋯⋯．7前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯．．10本研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一111本研究的目的⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112本研究的意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11第一章泥蚶TgGPx、TgCAT、TgSOD基因的克隆与结构分析⋯一121．材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．1实验材料及仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．1．1主要化学试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一131．1．2主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131．1．3实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．141．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．2．1泥蚶总RNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．2．2cDNA第一链的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．2．3目的基因片段的获得⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．161．2．4泥蚶CAT、GPx、SOD基因cDNA序列全长的克隆1．2．5基因序列分析和系统进化分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24万方数据温州医科大学硕士学位论文2结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．242．1泥蚶谷胱甘肽过氧化物酶基N(TgGPx)基因的克隆⋯⋯．242．1．1TgGPx基因eDNA全长与氨基酸序列分析⋯⋯⋯．．242．1．2TgGPx基因的SECIS元件分析⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．252．1．3TgGPx基N与其他物种Se—GPx基因的同源性分析262．1．4Se—GPx的系统进化分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．282．2泥蚶过氧化氢酶基因(TgCAT)的克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯302．2．1TgCAT基因eDNA全长与氨基酸序列分析⋯⋯⋯．．302．2．2TgCAT基因与其他物种CAT基因的同源性分析⋯．312．2．3CAT基因的系统进化分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯352．3泥蚶超氧化物歧化酶基因(TgSOD)的克隆⋯⋯⋯⋯⋯352．3．1TgSOD基因cDNA全长与氨基酸序列分析⋯⋯⋯．352．3．2TgSOD基因与其他物种SOD基因的同源性分析⋯3

5、62．3．3SOD基因的系统进化分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯373分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．393．1泥蚶TgGPx基因的克隆与结构分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．393．2泥蚶TgCAT基因的克隆与结构分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．403．1泥蚶TgSOD基因的克隆与结构分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．40第二章泥蚶TgGPx和TgCAT基因的表达分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．421材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯421．1实验材料和重金属处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯421．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43万方数据温州医科大学硕士学位论文1．2．1

6、提取泥蚶总RNA⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．431．2．2cDNA第一链的合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯431．2．3Real．timePCR反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯442结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．452．1泥蚶TgGPx基因的表达分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．452．1．1TgGPx基因在泥蚶不同组织的表达分析⋯⋯⋯⋯⋯452．1．2TgGPx基因在泥蚶重金属胁迫后的时序表达⋯⋯⋯452．2泥蚶TgCAT基因的表达分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．462．2．1TgCAT基因在泥蚶不同组织的表达分析⋯⋯⋯⋯．．462．2．2TgCAT基因在泥蚶

7、重金属胁迫后的时序表达⋯⋯．．473分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯483．1泥蚶TgGPx基因和TgCAT基因的组织表达分析⋯⋯⋯483．2泥蚶TgCAT基因和TgGPx基因在重金属胁迫后的时序表达分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49结论与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯521结j仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．521．1TgCAT、TgGPx、Tg