泥蚶谷胱甘肽过氧化物酶基因的克隆和分析论文

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1、毕业论文本科毕业论文(设计)泥蚶谷胱甘肽过氧化物酶基因的克隆和分析毕业论文摘要本实验通过RACE法获得泥蚶谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase)基因cDNA全长序列并对其进行生物信息学分析。发现,泥蚶谷胱甘肽过氧化物酶不含硒,称为过氧化物酶6(TgPrx6)。泥蚶过氧化物酶6基因的全长cDNA为1937个碱基,其中开放阅读框为672个碱基,编码224个氨基酸。其次,用RNAfast200总RNA极速抽提试剂盒从泥蚶血液和其它组织中提取RNA,逆转录成cDNA。最后,采用PCR方法分析TgPrx6基因在不同组织中的表达情况,结果表明TgPrx6基因的组织表

2、达有所差异。TgPrx6基因在内脏团中表达水平最高,其次是鳃和外套膜,在血液中的表达水平最低。关键词:泥蚶;谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)基因;过氧化物酶6;组织表达毕业论文ABSTRACTAwholelengthcDNAofglutathioneperoxidaseinTegillarcagranosawasgotbyRACEandthesequencedofbioinformaticswasanalysed.TheglutathioneperoxidaseofTegillarcagranosadidnotcontainSe,whichwascalledperoxidase6(T

3、gPrx6).ThewholelengthcDNAofTgPrx6inTegillarcagranosawas1937bp,andtheopenreadingframewas672bpwhichcouldtranslate224aminoacids.RNAwasgotbyRNAfast200KitfrombloodandothertissuesofTegillarcagranosa,thenRNAwasreversedtranscriptasetocDNA.Finally,thegeneofTgPrx6wasanalysedtoexplorehowthegeneofTgPrx6e

4、xpressedindifferenttissues,andtheresultwasthatthereweredifferencesbetweentissues.ThehighestlevelofTgPrx6expressionwasdetectedinviscera,andthengillsandmantle.Thelowestlevelwasdetectedinblood.Keywords:Tegillarcagranosa;glutathioneperoxidasegene;peroxidase6;tissueexpression毕业论文目录1前言11.1泥蚶的介绍11.2

5、谷胱甘肽过氧化物酶的介绍11.3谷胱甘肽过氧化物酶的作用21.3.1清除脂类氢过氧化物21.3.2清除H2O221.3.3减轻有机氢过氧化物对机体的损伤21.3.4参与前列腺素合成的调节31.3.5其他作用31.4泥蚶谷胱甘肽过氧化物酶基因的研究意义32实验材料和方法32.1实验材料与试剂32.1.1材料32.1.2试剂32.1.3仪器42.1.4实验用品的预处理42.1.5电泳缓冲液和琼脂糖凝胶的制备42.1.6实验所用引物42.2实验方法52.2.1SMART技术构建全长cDNA文库52.2.2血液中总RNA提取52.2.3组织中总RNA的提取62.2.4cDNA第一链合成6

6、2.2.5cDNA检测72.2.6所设计引物的筛选72.2.7泥蚶Prx6基因组织特异性表达72.2.8目的基因的生物信息学分析82.2.9PCR产物的回收纯化844毕业论文3实验结果83.1血液和组织的RNA提取83.2设计引物的筛选93.3泥蚶Prx6cDNA序列分析和推导的氨基酸序列93.4泥蚶Prx6基因与其它物种Prx6基因的系统进化树分析123.5泥蚶Prx6基因组织特异性表达134讨论134.1cDNA文库134.2泥蚶Prx6全长cDNA克隆及组织表达分析14参考文献16致谢19附录1文献综述20附录2外文翻译2544毕业论文1前言1.1泥蚶的介绍泥蚶(Tegil

7、larcagranosa),俗称花蚶、血蚶、银蚶、蚶子等,隶属于软体动物门(Mollusca)、瓣鳃纲(Lamellibranchia)、列齿目(Taxodonta)、蚶科(Arcidae)、泥蚶属(Tegillarca),是一种栖息于沿海滩涂的广温性双壳贝类,主要分布于西太平洋、印度洋和大西洋海域的中国、韩国、泰国、菲律宾以及马来西亚等国家,在我国分布于山东半岛以南沿海,是山东、浙江、福建和广东等省重要的养殖经济贝类[1]。泥蚶富含特有的血红蛋白和维生素B12,有补血、温中、健

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