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1、黄艮多糖中脱蛋白方法探究摘要：目的：为了筛选最佳的黄艮多糖的脱蛋白效果。方法：比较sevage法，蛋白酶法，乙酸铅法和732树脂法脱除黄艮多糖中的蛋白质的效果。结果：蛋白酶法和732树脂法都可以较好的除去黄艮多糖中的蛋白质。尤其以732树脂静态吸附效果为最佳，多糖得率达88.6%,蛋白质含量降低至0.91%0而且732树脂成本低，快速，吸附效果好，样品损失小，便于在黄艮多糖的制备中推广使用。结论：732树脂静态吸附法是最佳的黄艮多糖脱蛋白方法。关键词：黄艮多糖；脱蛋白；732树脂中图分类号:R282.710.2文献
2、标识码：A文章编号:1673-7717(2008)03-0614-02StudyMethodsforRemovingProteinFromtheAstragalusPolysaccharidesExtractGAOMei-feng1,2,YUTing-ting2(1.NanjingUniversityofChineseMedicine,Nanjing210029,Jiangshu,China;2.SchoolofLifeScienceandTechnology,ChinaPharmaceuticalUniversi
3、ty,Nanjing210009,Jiangshu,China)Abstract:DifferentmethodsaboutremovingproteinfromtheAstragalusPolysaccharides(APS)extractwasstudied,suchasSevage,Protease,leadacetateand732resinmethods・TheresultsindicatedthattheProteaseand732resinweregoodremoving-proteinmethods
4、.Especially,theAPSrecoverycouldreach88.6%andproteinresidualcontentwas0.91%throughstaticadsorptionby732resin.Furthermore732resinpossessesmanyadvantagessuchaseconomic,rapid,safeandminimumsamplelossandsoon.Therefore732resinwasthebestperformanceforremovingproteinf
5、romAPSextract.Keywords:astragaluspolysaccharides;removalofprotein;732resin黄艮为豆科植物蒙古黄艮［Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge)Hsiao］或膜荚黄茯［Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge］的干燥根，是一种常用的中药。性味甘、微温，归脾、肺经［1］。黄艮含有多糖、蛋白质、生物碱、氨基酸、黄酮类、昔类、微量元素等多种生物活性物质，其中黄艮
6、多糖(Astragaluspolysaccharides,APS)是黄艮主要生物活性成分。黄艮多糖具有增强机体的免疫功能，降血糖、抗应激、抗肿瘤、抗病毒、抗辐射、抗氧化等多种药理功效［2］。有报道黄棧多糖中蛋白质含量高于15%,因此去除黄艮多糖中的蛋白质是多糖精制过程中比较关键的一步，传统的脱蛋白方法有Sevage法、三氯醋酸法、蛋白酶法、透析法等，但是这些方法都存着一定问题，如有机溶剂用量大，多糖得率不高，蛋白去除不完全等问题。本实验选用了几种相对安全、操作方便的脱蛋白方法进行研究，并与传统的Sevage方法进行
7、了比较。1材料与方法1.1原料与试剂黄艮多糖粗品，自制；中性蛋白酶（7万U/g）,无锡酶制剂厂；三水合乙酸铅，广州化学试剂厂；732树脂，天津海光化工有限公司；无水乙醇，氯仿，正丁醇，95%乙醇均为分析纯。FA2104电子天平，上海天平仪器厂；电热恒温水浴锅,上海跃进医疗仪器厂；德国BekmanH-ll冷冻离心机；凝胶层析柱1cmx40cm;LGL型冷冻干燥机；752分光光度机,上海精密仪器有限公司。1.2Sevage法除蛋白［3］配制一定浓度的黄艮粗多糖溶液中，加入1/3体积的sevage试剂（氯仿:正丁醇为4:
8、1）,振摇20min,静置15min至完全分层，离心，取水层，于280nm处测其吸收值。重复上述过程直至280nm处吸收值稳定。1.3中性蛋白酶法脱蛋白［4］配制一定浓度的黄艮粗多糖溶液，加2.0U/mg蛋白酶，酶解6h后，沸水煮5min,加入3倍体积无水乙醇，离心得沉淀后，复溶，测多糖及蛋白质含量。1.4乙酸铅法除蛋白⑸配制一定浓度的黄栈粗多糖溶液，向里滴
