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《荧光试剂衍生化液相色谱分析生物检材中的氟乙酸钠》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、Vol.46No.3May2007第46卷第3期中山大学学报（自然科学版）2007年5月ACTASCIENTIARCMNATCRALICMUNIVERSITATISSUNYATSENI荧光试剂衍生化液相色谱分析生物检材中的氟乙酸钠收稿日期：2006-09-10基金项目：广东省科技计划资助项目(2001C32202)；广东省公安厅科研基金资助项目(2001)作者简介：谢珍茗(1979年生).女，博士研究生；通讯联系人：邓芹英；E-mail：ceslgk@2su.edu.cn谢珍茗I,施文兵2,刘岚-邓芹英'(1.中山大学化学与化学工程学院，广东广州5102
2、75；2.广东霜公安厅，广东广州510050)摘要：建立了使用新的荧光衍生试剂9.氯甲基恿(CA)衍生化生物检材中的緘乙酸钠，并通过薄层色谱和荧光检测的髙效液相色谱(HPLC)分析的方法。合成得到氟乙酸钠的荧光衍生物——緘乙酸・9■亚甲基恿酯(MA-MFA),纯度达到98%以上，通过红外光谱、核磁共振、尤素分析和质谐対其进行结构表征。薄层色谱中展开剂为石油髓/乙酸乙商(•体积比为95：5),检测限为5xl0-*g(TLC)O高效液相色谱用AgilentHypersilODS反相色谱柱，以乙購/水(体积比为85：15)为流动相，荧光检测波长几为256nm,
3、入亦为412nm。方法在2.5xlO-^125xlO-9mol/mL浓度范围内呈良好的线性关系.线性相关系数为0.9988,生物样品空白添加实验的回收率为83%-90%,最低检测限为2xlO-°g(S//V=3),H内、日间RSD均小于4%。该方法用于中毒死亡者的血液样品及其他检材的测定.效果良好。关键词：氛乙酸钠；9•氯甲基蔥；氛乙酸-9.亚甲基蔥酯(MA-MFA)；高效液相色谱；荧光检测；薄层色谱中图分类号：0657.7文献标识码：A文章编号：0529-6579(2007)03-0064-04氟乙酸钠(CHzFCOONa,代码1080,Sodiumm
4、onofluoroacetate),是一种急性剧毒灭鼠药，亦是一种内吸性杀虫剂，其纯品为白色无味粉末，极性大，易溶于水，难溶于有机溶剂。法医毒理学认为，氟乙酸钠通过作用于中枢神经系统和心脏而使动物中毒死亡⑴。文献报道大鼠急性口服的半致死量LDw为0・22mg/kg,人口服的半致死量为0.1~10mg/kg不等S刃。自上世纪80年代以来，氣乙酸钠的检测方法不断发展，最初有硫靛反应的化学法⑷，到采用强酸化GC/MSf5,9F核磁共振©MR)®?)、区带毛细管电泳⑻和离子色谱凹■叩等宜接分析法，以及衍生化后GC/NPD、GC/ECD、CC/MS分析法⑴■⑶对
5、氟乙酸钠的测定均有报道。简单的化学方法检验检测限低，容易受检材复杂性干扰而出现假阳性。直接分析方法的样品前处理方法简单，灵敏度不高，可用于氟乙酸钠含誡较高的样品的分析；强酸酸化的GC分析方法对气相色谱柱的要求较髙。柱前衍生化的GC分析是目前报道的检测氟乙酸钠灵敏度最高的方法。但由于生物检材的复杂性，GC的低选择性使氟乙酸钠衍生物的峰难以辨认。髙效液相色谱是目前广泛使用的最有效的分析工具，常用的检测器包括紫外检测器和荧光检测器，紫外检测器在髙灵敏度和高选择性上都不如荧光检测器，为了追求更好的分析结果，选择采用荧光检测的高效液相色谱。氟乙酸钠没有荧光团，因此
6、柱前荧光衍生化使氟乙酸钠形成稳定的荧光衍生物是本方法的关键。本研究选用了9■氯甲基蔥(CA)为氟乙酸钠的衍生化试剂，在相转移催化剂四丁基漠化钱的存在下，合成了氟乙酸・9■亚甲基蔥(MA-MFA)衍生物，此产物具有很强的荧光性质，可作液相色谱分析的标准样品。方法用于高效液相色谱检测生物检材中的氟乙酸钠分析，灵敏度高，重复性好。1实验部分.1.1仪器与试剂高效液相色谱仪(Agilent1100HPLCsystem,USA)；UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)；荧光分光光度计；EQUINOX55傅立叶变换红外光谱仪(Bru畑)；核磁共振波谱仪(Me
7、r・cury-Plus300MHz,Varian)；元素分析器(VarioEL,Elementar)；AgilentGC6890/5973N气质联用仪(RF-53O1PC,岛津公司)；X4数字显示显微熔点测定仪(北京泰克仪器有限公司)。氟乙酸钠标准品由广东省公安厅提供，W>98%；四丁基漠化钱(AR)购自上海试剂一厂;9-氯甲基蔥(AR)购自Merck公司(USA),配制成10-5mol/mL的乙睛溶液，置冰箱储存备用；薄层色谱硅胶G(10-40pun,青岛海洋化工厂)；其余试剂均为国产分析纯。1.2氟乙酸・9•亚甲基蕙酯的合成与表征将氟乙酸钠与9■氯甲
8、羞恿以摩尔比3：1的比例加入小烧瓶中，加入乙睛至9•氯甲革恿完全溶解,再加入适肚
