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《谷胱甘肽发酵条件的优化扩大及其分离纯化【毕业论文，绝对精品】》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、分类号密级UDC学校代码XXXX硕士学位论文题目：谷胱甘肽发酵条件拥尤化扩大及其分离纯化目:TheOptimizationandAmplificationofFermentationConditionsofGlutathioneanditsSeparationandPurification学位申请人姓名：XXX申请学位学科专业：发酵工程指导教师姓名：XXXXXX教授摘要谷胱廿肽(GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸和廿氨酸组成的三肽化合物，具有清除口由基、解毒、抑制衰老、预防糖尿病和癌症、抑制艾滋病毒、提高人体免疫力等重要生理功能，在医学、食詁、化妆甜等领域具有广泛的市场前景。现有GSH生产能力远不
2、能满足市场需求，所以采用GSH高产菌株发酵廉价原料转化为GSH,建立适合工业化分离纯化GSH的方法会带来巨大的社会和经济效益。本文以富含GSH的啤酒酵母Y-14为材料，分别从以下四个方而进行研究：(1)利用Plackett-Burman试验设计^Box-Behnken试验设计法对啤酒酵母Y-14产GSH培养基进行优化，得到的最适培养基配方为：葡萄糖20g/L,酵母膏10g/L,(NH4)2SO48g/L,KH2PO43g/L,MgSO40.15g/Lo对优化结果进行验证试验，GSH产量可达到124.77mg/Lo(2)利用单因素试验对啤酒酵母儿2产GSH发酵条件进行研究，结果得到摇瓶最适发酵
3、条件为培养温度30°C、初始pH6.0、摇床转速180rpm、摇瓶装液量30mL/300mL、补料培养基添加时间20h。在此条件下，菌体胞内GSH含量达到31.56mg/g,GSH的产量可达249.2mg/L,较原来提高了102%。(3)利用10L口动发酵罐补料培养啤酒酵母儿2,①采用恒速流加单一葡萄糖培养基，20h时添加前体氨基酸和ATP的方法，测得GSH的产量在52h时，达到最大值243mg/Lo②采用恒速流加全营养培养基，36h时添加补料培养基的方法，测得GSH产量在52h达到最大值520.742mg/Lo比较发现，第二批发酵罐培养菌体干重、GSH产量较第一批分别提高了122.5%、1
4、14.2%。(4)釆用D001大孔树脂粗分离GSH,得到最佳分离条件为:上样pH3.0,浓度为61.4mg/100mL,流速为0.5mL/min,洗杂质用液为无水乙醇，洗脱液为1.5%HC14-0.3mol/LNaCl,流速为3mL/minoGSH的平均收得率为69.11%,蛋白质去除率为64.8%o然后通过SephadexG-10脱盐纯化GSH,得到最适条件：①1.6cmx25cm玻璃层析柱，上样浓度为116.66mg/100mL,上样体积为20mL。结果GSH的平均收得率为96.21%O最后SephadexG-10分级分离纯化GSH,采用(D1.6cmx50cm玻璃层析柱，最适上样体积为
5、2mL,GSH的平均收得率为99.26%,蛋白质去除率为56.5%oGSH浓缩倍数平均为9.07倍，纯化倍数为8.67倍。关键词：啤酒酵母Y-14,谷胱甘肽，发酵罐，D001大孔树脂，SephadexG-10AbstractGlutathione(GSH)isatripeptideformedbyglutamicacid,cysteineandglycin,ithasimportantphysiologicalfunctionssuchasremovingfreeradical,detoxification,anti-aging,diabetesandcancerprevention,inh
6、ibitionofHIVandimprovetheeffectivenessofthehumanimmunesystem,andhasawiderangeofmarketprospectsinthefieldsofmedical,foodandcosmetics.ButtheexistingproductioncapacityofGSHisfarfromthemarketdemand.UsemicrobialfermentationtotranslatecheaprawmaterialsintohighyieldedGSH,andestablishsuitableindustrializat
7、ionseparationandpurificationofGSHwillbringenormoussocialandeconomicbenefits.Inthispaper,themainresearchcontentandresultsareasfollows:(1)UsingPlackett-BurmanandBox-BehnkenexperimentaldesignoptimizedmediumofS
