谷胱甘肽发酵条件的优化扩大及其分离纯化毕业论文

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1、谷胱甘肽发酵条件的优化扩大及其分离纯化毕业论文目录摘要IAbstractII目录III第1章引言11.1谷胱甘肽概述11.1.1谷胱甘肽结构和性质11.1.2谷胱甘肽的生理功能及其应用31.2发酵法生产谷胱甘肽的国内外研究动态41.3本研究的意义、目的及内容91.3.1意义91.3.2目的91.3.3研究内容101.4常用研究指标的说明10第2章啤酒酵母Y-14发酵GSH培养基的优化112.1材料112.1.1菌种:112.1.2培养基:112.1.3主要试剂122.1.4主要仪器122.2方法122.2.1菌株活化132.2.2种子摇瓶培养

2、132.2.3摇瓶发酵培养13652.2.4菌种的保藏132.2.5DTNB法检测GSH含量132.2.6试验设计方法132.3结果与分析142.3.1显著影响因素的筛选结果142.3.2Box-Behnken设计进一步优化培养基试验结果162.4结论19第3章啤酒酵母Y-14产GSH发酵条件的优化203.1材料203.1.1菌种:203.1.2培养基:203.1.3主要试剂213.1.4主要仪器213.2方法213.2.1啤酒酵母Y-14生长曲线的测定213.2.2发酵周期的优选试验213.2.3发酵温度的优选试验213.2.4发酵初始pH

3、的优选试验223.2.5发酵摇床转速的优选试验223.2.6发酵摇瓶装液量的优选试验223.2.7摇瓶发酵产GSH的进程试验223.3结果与分析223.3.1啤酒酵母Y-14生长曲线的绘制223.3.2发酵周期的优选试验结果233.3.3发酵温度的优选试验结果243.3.4发酵初始pH值的优选试验结果243.3.5发酵摇床转速的优选试验结果253.3.6发酵摇瓶装液量的优选试验结果263.3.7摇瓶发酵产GSH进程曲线的绘制273.4结论28第4章10L自动发酵罐扩大发酵的初探294.1材料29654.1.1菌种:294.1.2培养基294.

4、1.3主要试剂304.1.4主要仪器304.2方法304.2.1斜面种子培养304.2.2一级种子摇瓶培养314.2.3二级种子摇瓶培养314.2.4发酵罐流加培养试验314.2.5分析方法314.3结果与讨论324.3.1第一批发酵罐补料培养324.3.2第二批发酵罐补料培养364.4结论40第5章啤酒酵母Y-14中还原型GSH的分离纯化415.1材料415.1.1菌种415.1.2主要材料425.1.3主要设备425.2方法425.2.1GSH提取液的制备425.2.2检测方法425.2.3相关数据的计算公式425.2.4D001大孔树脂

5、离子交换柱的试验流程435.2.5D001大孔树脂分离GSH的研究435.2.6SephadexG-10凝胶柱的试验流程445.2.7SephadexG-10纯化GSH的研究455.3结果与分析465.3.1D001大孔树脂分离GSH的研究结果465.3.2SephadexG-10脱盐纯化GSH的研究结果505.3.3SephadexG-10分级分离纯化GSH的研究结果535.4结论5665第6章总结与展望576.1总结576.2创新点586.3展望58参考文献59致谢64附录6565第1章引言据报道,人体内有一种神奇的物质,它和人的健康状况

6、有直接的关系。这种神奇的物质,科学上称之为谷胱甘肽(GSH)。GSH是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通过肽键缩合而成,具有较高的营养价值,具有保肝、抗氧化的作用,含有丰富的氨基酸、肽类物质、维生素、微量元素。近日,据有关病毒学家介绍:每天补充50毫克GSH,可快速产生还原性免疫细胞,增强人体免疫力。如果人体免疫能力强,就算被感染上病毒,也会将病毒的侵害降低到最低限度。美国著名的医学专家古特曼博士这样预测:“谷胱甘肽很快就会像胆固醇一样,成为人们衡量健康指标之一。1.1谷胱甘肽概述1.1.1谷胱甘肽结构和性质谷胱甘肽,是由L-谷氨酸、L-半胱氨酸和

7、甘氨酸组成的生物活性三肽化合物[1],广泛存在于生物体内的最丰富的非蛋白硫醇化合物[2]。其化学名为γ-L-谷氨酰-半胱氨酸-甘氨酸[3](英文名:γ-L-glutamyl-cysteinyl-glycine,简写为GSH),其结构式如图1所示:图1.1GSH的化学结构式图Fig1.1Chemicalstructuralofglutathione1888年Pailbode首先发现GSH,1921年Hopkins[4]65从酵母抽提物和动物肝脏中首先分离得到GSH结晶并命名,1929年Hopkins、Kendall等提出GSH为三肽并初步提出它

8、的结构,1935年由Harington和Mead阐明其化学结构并加以化学合成[5],随后在1936年被DuVigneaud和Miller验证[6],1938年利用酵

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