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1、荷叶黄酮与生物碱类成分提取工艺比较孟祥斌李耀中(常州工程职业技术学院制药与环境工程学院江苏常州213164)【摘要】木文比较研究了荷叶总黄酮和总牛物碱的乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺。根据三种工艺提取物的得率和提取物中总黄酮、总牛物碱的含量，结合牛产需要，确定以乙醇提取工艺为荷叶提取物制备工艺。然后对乙醇提取工艺的醇浓度进行优化，确定70%乙醇作提取溶剂时，提取物得率为6.87%,总生物碱和黄酮的含量分别可达4.32%和5.93%。该研究可以对荷叶提取物制备及产品开发牛产提取较为行的技术支持。【关键词】荷叶；
2、提取工艺；优化【中图分类号】R92【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2015)32-0363-021.试验材料1.1仪器设备FW135中草药粉碎机、HZT-A200电子天平、RE-201D旋转蒸发仪、101-1A数显式电热恒温干燥箱。1.2材料与试剂1.2.1试验材料荷叶原材料，采于常州市新北区荷园1.2.2试验试剂芦丁对照品荷叶碱对照品和(上海源叶生物科技有限公司)；C2H5OH、HCI、NaOH、NaNO2、AI(NO3)3>CHCI3、漠甲酚绿。对照品纯度≥98%,其他试剂为分析纯。2.试验方法2
3、.1荷叶原材料处理将所采荷叶洗净，烘干，粉碎，过2号药筛后作为提取原料。2.2荷叶总黄酮与总牛物碱的提取分别采用乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺对荷叶总黄酮和总生物碱成分进行提取。2.2.1乙醇提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物称取荷叶提取原料10g,按20倍量（m:V）加入70%的C2H5OH,80°C温提2h,抽滤得滤液,将滤液减压蒸发得浓缩液，浓缩液于65°C干燥后粉碎，得乙醇提取物。2.2.2酸水提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物称取荷叶提取原料10g,按20倍量（m:V）加入0.15%的HCI
4、,80°C温提2h,抽滤得滤液，将滤液减压蒸发得浓缩液，浓缩液资助项目：常州市科技计划资助（CE20132016）于65°C干燥后粉碎，得酸水提取物⑸。2.2.3酸性乙醇提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物称取荷叶提取原料10g,按20倍量（m:V）加入0.15%HCI的70%的C2H5OH,80°C温提2h,抽滤得滤液，将滤液减压蒸发得浓缩液，浓缩液于65°C干燥后粉碎，得酸性乙醇提取物［6］。2.3荷叶提取物得率及总黄酮、总生物碱含量检测231荷叶提取物得率的检测三种提取工艺所得提取物精确称重，得提取物重量（m）。提
5、取物得率（％）=m/10×100%2.3.2荷叶提取物总黄酮、总生物碱含量检测2.3.2.1芦丁标准曲线的建立称取芦丁标准品10mg,用30%乙醇溶解,定容至50ml,制备成浓度为0.2mg/ml的标准溶液。分别吸取上述标准溶液0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml于10ml比色管中，加入一定量的30%乙醇使最终体积为5ml；加入0.3ml浓度为5%亚硝酸钠溶液，混合均匀；静置5min,加入0.3ml浓度为10%硝酸铝溶液混匀；静置6min,加入4ml浓度Imol/LNaOH溶液，混合均匀；用3
6、0%乙醇标定至刻度，静置10min,于510nm处分别测定其吸光度值。以吸光度（A）为纵坐标，标准液浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得冋归方程:A二4.4027C+0.0105(R²二0.9986)。23.2.2荷叶碱标准曲线的建立称取荷叶碱对照品10mg,以适量氯仿溶解，定容至50ml,制备成浓度为0.2mg/ml的对照品标准溶液。分别取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml对照品标准溶液于10ml比色管中，加入0.2mol/LNaOH溶液lml、0.1%的澳甲酚绿溶液lml,加氯仿定容至刻度
7、，转移至分液漏斗并振摇均匀，静置30min,取氯仿层，415nm测定其吸光值⑹。以吸光度(A)为纵坐标，待测液浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线，得冋归方程：A=8.3457C+0.0044(R²二0.9978)。2.3.23提取物总黄酮和总生物碱含量的测定取适量三种提取方法所得的干燥提取物分别按2.3.2.1和23.2.2的方法显色并测定其吸光值，根据回归方程计算提取物中总黄酮和总生物碱的含量。3•结果与分析通过检测，荷叶活性成分乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺三种提取工艺所得提取物的提取得率和总黄酮
8、、总生物碱含量见表lo由表1可知：乙醇提取工艺提取物的得率最高可达6.80%,提取物总黃酮含量为6.17%,另检测到含3.81%的总生物碱；酸水提取工艺提取物的得率最高可达8.84%,提取物总生物碱含量为4.53%；而酸性乙醇提取工艺提取物得率最高可达12.94%,提取物中总生物碱和黄酮的含量分别可达4
