葛根总黄酮提取工艺的比较论文

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1、葛根总黄酮提取工艺的比较论文甘琳，周芳张越非池汝安【摘要】目的优选葛根总黄酮的提取工艺。方法采用水浴回流、微波和超声波辅助3种方法提取葛根总黄酮，正丁醇萃取纯化。结果微波辅助提取所得总黄酮提取率最高，提取率为91.68%，纯化后，总黄酮纯度为87.56%;超声波辅助提取次之，提取率为87.88%;水浴回流提取最低，提取率为85.35%。结论微波辅助提取法节能、高效.freelizetheextractionprocessoftotalflavonoidsfromradixpuerariae.Methodsicrog，用95%乙醇溶解并定容于50ml容量瓶中

2、，得0.11mg/ml的葛根素标准溶液。准确吸取该标准溶液0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml于10ml容量瓶中，蒸馏水稀释定容，得系列对照品溶液。以1.0ml95%乙醇加水至10ml作空白对照，于250nm处7测定各对照品溶液吸光度，得到吸光度A与总黄酮质量浓度C(mg/ml)的线性回归方程：C=0.01502A-0.000041，r=0.99992。2.1.2葛根中总黄酮含量的测定称取干燥葛根10.0g，加入200ml80%乙醇，在80℃水浴下回流提取2h，抽滤。同条件下反复提取6次，得葛根总黄酮提取液，测定提取液中总黄酮浓度并计算葛

3、根中总黄酮含量η为8.4%。2.1.3葛根提取液中总黄酮含量的测定准确吸取葛根总黄酮提取液1ml于50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释定容，按上述“2.1.1”项的方法操作，测定吸光度，根据线性回归方程计算各提取液中总黄酮浓度。葛根总黄酮提取率：X=C×50×25010×1000η×100%其中：X—总黄酮提取率(%);C—由线性回归方程计算出的提取液中总黄酮浓度(mg/ml);50—稀释倍数;250—提取液体积(ml);10—葛根质量(g);1000η—葛根中总黄酮含量(mg/g)。2.1.4色谱条件InertsilODS-3C18色谱柱(250mm×4.6m

4、m，5μm);流动相为甲醇—水(25∶75);柱温30℃;流速1.0ml/min;检测波长250nm;进样量10μl。2.2实验方法2.2.1水浴回流提取法准确称取干燥葛根10.0g，放入三口圆底烧瓶中，加入乙醇，水浴下回流提取后抽滤，滤液冷却至室温，用同浓度的乙醇定容至250ml，得葛根总黄酮提取液，测定该提取液中总黄酮浓度。2.2.2微波辅助提取法准确称取干燥葛根10.0g，放入三口圆底烧瓶中，加入体积分数为80%的乙醇，微波萃取后抽滤(微波萃取示意图见图1)，滤液冷却至室温，80%乙醇定容至250ml，得葛根总黄酮提取液，测定该提取液中总黄酮浓度。2

5、.2.3超声波辅助提取法准确称取干燥葛根10.0g，放入三口圆底烧瓶中，加入80%乙醇，超声波辅助提取后抽滤，滤液冷却至室温，80%乙醇定容至250ml，得葛根总黄酮提取液，测定该提取液中总黄酮浓度。2.2.4正丁醇萃取法8分别称取各优化工艺下的提取物2g，40ml蒸馏水溶解，用200ml水饱和的正丁醇萃取，将正丁醇相减压浓缩、真空干燥，得黄酮粉末，称重，测定总黄酮的浓度，计算产品纯度及产率。图1微波萃取仪示意图3结果3.1水浴回流提取法优化工艺的确定采用正交实验设计，选取提取时间(A)、乙醇浓度(B)、提取温度(C)、液固比(D)为考察因素，以总黄酮提取

6、率为考察指标，采用L9(34)表。正交实验结果见表1。表1L9(34)水浴回流提取法的正交实验结从表1结果可以看出，各因素对提取效果的影响作用大小依次为C(提取温度)﹥A(提取时间)﹥B(乙醇浓度)﹥D(液固比)，其中提取温度对葛根总黄酮的提取效果影响最大，而液固比和乙醇浓度对提取无显著影响。极差分析结果表明，水浴提取葛根总黄酮的优化工艺为A3B2C3D3，即：提取时间120min，乙醇浓度80%，提取温度80℃，液固比20∶1。按水浴回流提取法的优化工艺进行验证，即按因素组合A3B2C3D3平行提取3次，提取率分别为84.92%，85.16%，85.98

7、%，RSD为0.65%，该工艺稳定可行，葛根总黄酮的平均提取率为85.35%。3.2微波辅助提取法优化工艺的确定根据水浴回流提取法的实验结果，以80%乙醇为溶剂时总黄酮提取率最高，故微波辅助提取以80%乙醇为溶剂，选取提取时间(A)、微波功率(B)、提取温度(C)、液固比(D)为考察因素，以葛根总黄酮提取率为考察指标，采用L9(34)表，正交实验结果见表2。表2L9(34)微波辅助提取法的正交实验结果由表2结果可知，各因素对提取效果的影响作用大小依次为A(提取时间)﹥C(提取温度)﹥B(微波功率)﹥D(液固比)，其中提取时间对葛根总黄酮的提取效果影响最大，

8、而液固比对提取无显著影响。极差分析结果显示，微波辅助提取法的优化工