菊花中总黄酮成分不同提取工艺的比较.pdf

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1、—-——218．-——江苏农业科学2014年第42卷第5期尤静，任晓芳，刘春叶，等．菊花中总黄酮成分不同提取工艺的比较[J]．江苏农业科学，2014，42(5)：218—219菊花中总黄酮成分不同提取工艺的比较尤静，任晓芳，刘春叶，余丽丽(西安医学院，陕西西安710021)摘要：采用超声法、酶法结合半仿生法提取野菊花中的总黄酮类物质，通过正交试验优化提取条件，用分光光度法测定总黄酮含量。结果表明，超声法的最佳提取条件为：提取溶剂50％乙醇，提取温度70℃，料液比1g：4OmL，时间30rain；酶法结合半仿生法的最佳

2、提取条件为：于37℃分别在模拟胃肠环境pH值条件下提取2h，果胶酶酶解最佳料液比为1g：20mL，纤维素酶酶解最佳料液比为1g：15mL，但果胶酶酶解效果更优。综合比较可以发现，超声提取法简单易行且提取率较高，酶法结合半仿生提取法的耗时较长，提取率较低，但更符合口服给药的药物代谢原理。关键词：野菊花；总黄酮；超声法；酶法结合半仿生法中图分类号：R284．2文献标志码：A文章编号：1002—1302(2014)05—0218—02野菊花为菊科植物野菊的头状花序。在我国分布广泛，定研究院提供；野菊花于2010年1O月采自

3、陕西秦岭山区。野生资源非常丰富。野菊花的主要药效成分是黄酮类化1．2试验方法合物，具有保护心脑血管、抗癌抗氧化、利胆保肝等多种生物1．2．1分光光度法测定总黄酮含量分别精密吸取1．00、活性。野菊花在临床上的主要作用是抗菌消炎，主要产品1．50、2．00、2．50、3．00、3．50mL浓度为0．214mg／mL的芸香有菊藻丸、野菊花注射液、野菊花栓等，在食品、化妆品、保健苷标准品贮备液于10mL的容量瓶中，分别加入0．3mL5％品等行业还具有进一步开发利用的广阔前景。为了对生NaNO：溶液，振摇后静置6min；再分

4、别加入0．3mL10％物资源进行综合利用，提取方法的选择在制剂工艺中占据十AI(NO，)，溶液，振摇后静置6min；再分别加入4．0mL4％分重要的地位，传统的方法有水提、醇提、碱提酸沉等，随着科NaOH溶液，用50％乙醇定容后摇匀，静置13min进行显色；学技术的进步，发展出了诸如半仿生提取、酶提取、超声提取、将上述溶液在400～700am波长范围内进行扫描，并以标准微波提取和超临界流体萃取等方法，从而大大提高了中药制品浓度()为横坐标、吸光度(，，)为纵坐标绘制标准曲线。剂的产量和质量。本研究采用半仿生法和酶法相

5、结合的1．2．2超声法提取野菊花洗净沥干后置于烘箱中，在方式，模拟人体消化吸收的过程对野菊花总黄酮成分进行提5O℃条件下烘至恒重，粉碎后过60目筛，密封保存备用。称取，并与提取效率较高的超声法提取结果进行比较，以期取野菊花粉末，加入乙醇溶液溶解，超声提取后将提取液经离得到更加适宜的总黄酮提取方法，为更好地开发利用野菊花心分离抽滤，即得样品溶液，按“1．2．1”节的方法测定吸光提供一定参考。度，根据回归方程计算总黄酮得率。以超声时间、温度、乙醇浓度、野菊花粉末和乙醇溶液的料液比为因素设计正交试验，1材料与方法4因素3水

6、平设计见表1。1．1仪器与材料表1菊花总黄酮提取工艺因素水平设计1．1．1试验仪器XH一2008DE型智能温控双频超声波合成／萃取仪，北京祥鹄科技发展有限公司；RE一2000A旋转蒸发仪，巩义市予华仪器有限责任公司；UV一2012C／PC／PCS紫外一可见分光光度计，尤尼柯仪器有限公司；PB—l0型酸度仪，赛多利斯科学仪器有限公司；FW一200型高速万能粉碎机，北京中兴伟业仪器有限公司；WO一501恒温水浴锅，北京1．2．3酶法结合半仿生法提取科伟永兴仪器有限公司。1．2．3．1纤维素酶酶解按一定料液比分别在一定量的

7、野1．1．2试剂与药材无水乙醇、氢氧化钠、硝酸铝、亚硝酸菊花粉末中加入pH值为2的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲液、钠、磷酸氢二钠、柠檬酸均为分析纯；果胶酶、纤维素酶购自国0．004g纤维素酶，37℃恒温水浴提取2h后抽滤；将滤渣用药集团化学试剂有限公司；芸香苷标准品由中国食品药品检蒸馏水洗涤几次后放人pH值为7．5的缓冲液中，再加入0．004g纤维素酶，恒温提取2h，抽滤；洗涤滤渣并放入pH收稿日期：2013—09—03值为8．3的缓冲液中，再加入0．004g纤维素酶，提取2h后基金项目：陕西省教育厅专项科研计划(编号：1

8、2JK0708)；陕西省自抽滤并合并滤液，6O℃旋蒸，加60％乙醇溶解。精密吸取然科学基础研究计划(编号：2012JQ4002)；陕西省教育厅科研计划0．2mL提取液至10mL容量瓶中，按“1．2．1”节的方法进行(编号：2013JK0759)；西安医学院博士科研启动基金(编号：显色处理，计算总黄酮得率：2011DOC05)。作者简介：尤静(1