资源描述：
《反相高效液相色谱／基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分离鉴定螺蛳血管紧张素转换酶抑制肽》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、反相高效液相色谱／基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分离鉴定螺蛳血管紧张素转换酶抑制肽2007年1月January2007色ChineseJournal谱ofChromatographyVo1.25No.158～65反相高效液相色谱/基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分离鉴定螺蛳血管紧张素转换酶抑制肽夏树华,王璋(江南大学食品学院,江苏无锡214036)摘要:运用反相高效液相色谱(RP—HPLC)对酶解螺蛳腹足肌得到的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽进行两步分离提纯,第一步主要得到8个组分;选取其中活性最高的组分进一步分离,得到2个组分,其中活性较高组分的ACE半抑制浓度为43.5
2、~mol/L,基本为单一肽组分.对提纯的组分分别使用高效液相色谱/电喷雾离子质谱法(HPLC/ESI—MS)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI—TOFMS)进行分析,同时结合氨基酸组成分析结果,最终得到的肽链一级结构为Lys—Glu—Ile—Tip(KEIW),符合已知的高活性ACE抑制肽的结构规律.经过对两种方法分析过程的比较,认为ESI—MS可以得到多方面的信息,但无法确定肽的序列;MALDI—TOFMS可以得到精确的二级质谱图(m/z精确至0.0001),从而可以得到确定的肽的序列.关键词:反相高效液相色谱法;电喷雾离子质谱;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
3、;血管紧张素转换酶抑制肽;螺蛳中图分类号:0658文献标识码:A文章编号:1000—8713(2007)0l一0058—08栏目类别:研究论文PurificationandIdentificationofaNovelACEInhibitoryPeptideDerivedfromtheMudSnailBellamyapurificatabyRP--HPLC/MALDI--TOFMSXIAShuhua,WANGZhang(FoodScienceSchool,SouthernYangtzeUniversity,Wuxi214036,China)Abstract:Bellamyapu啦
4、cataisoneofmudsnailsinfreshwaterfoundinChina.Thepurifi—cationandidentificationofanangiotensinI—convertingenzyme(ACE)inhibitorypeptideex—tractedfromBellamyapu噍catahydrolysatearedescribed.Thepeptidewaspurifiedtwicewithsemi—preparativereversed—phasehighperformanceliquidchromatography(RP—HPLC)to
5、obtainanactivefractionwithaninhibitoryconcentration50%(IC0)of43.5~mol/L.Thepri—marystructureofthepurifiedpeptidewasidentifiedbythehighperformanceliquidchromatog—raphy/electrosprayionizationmassspectrometry(HPLC/ESI—MS)andthemartix—assistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometr
6、y(MALDI—TOFMS)combiningwiththea—minoacidcompositionanalysis.Finally,itwasidentifiedasatetrapeptideandsequencedasLys—Glu—Ile—Trp(KEIW),whichhasthecommoncharactersofACEinhibitorypeptideextrac—tedfromselfishmuscle.Thestructureidentificationresultsfromthetwomethodswerealsocomparedinthisstudy.The
7、resultsfromESI—MSincludedalotofinformation,suchastheto—talioncurrentchromatogramandultravioletscanspectrum.However,theexactstructurecouldonlybefromtheMALDI—TOFMSanalysis,inwhichtheexactMS/MSspectrumcouldbeobtained.Furthermore,them/zmeasurementpreci
