MALDI-TOF MS(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)培训预习提纲

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时间:2020-01-14

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1、【MALDI-TOFMS】(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱)培训预习提纲一仪器概况仪器名称:基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱仪          MatrixAssistedLaserDesorptionIonization-TimeofFlightMassSpectrometer          MALDI-TOF公   司:美国应用生物系统          AppliedBiosystem型   号:VoyagerDE-STR特   点:DE DelayedExtraction延迟引出           PSD:PostSour

2、ceDecay源后裂解技术指标:MassAccuracy·LinearMode,ExternalCalibration:            ≤±0.05%forangiotensin[1,296.6853]andmyoglobin[16,952.5].·ReflectorMode,ExternalCalibration:            ≤±0.008%forACTH18-39[m/z2,565.1989].            ≤±0.005%forE.colithioredoxin[m/z1,1674.4]±0.005%for

3、ACTH18-39MassResolution:·ReflectorResolution:           ≥20,000forinsulin(m/z5,734).           ≥12,000forACTHclips.·LinearResolution:           ≥3,000angiotensin.           ≥3,500forACTH18-39[m/z2,465.1989].           ≥1,000formyoglobin(m/z16,952).           ≥100forBSA(m/z6

4、6,431).Sensitivity:·Routinedetectionof5fmolofneurotensinwithasignaltonoiseration(S/N)>80:1.Post-SourceDecayMassAccuracy:·≤0.2withdefaultcalibration.应   用:MALDI-TOF仪器作为一种可以确定大分子精确分子量的工具,可以对纳米材料、生物材料,高分子聚合物等的分子量及聚合度进行测定及碎片结构定性,有机合成反应的质量评价,蛋白质、多肽、核酸、寡糖等生物分子的分子质量测定,蛋白质、多肽酶解产物肽图

5、谱测定,蛋白质、多肽的氨基酸顺序分析。二原    理1.质谱仪分类2一般质谱仪结构      a.离子源IonSource             电子电离源(ElectronIonization,EI)             化学电离源(ChemicalIonization,CI)             快原子轰击源(FastAtomBombardment,FAB)             电喷雾源(ElectronSprayIonization,ESI)             大气压化学电离源(AtmosphericPressure

6、ChemicalIonization,APCI)             激光解析源(LaserDesorption,LD)      b.质量分析器MassAnalyzer             双聚焦分析器(DoubleFocusingAnalyzer)             四极杆分析器(QuadrupleAnalyzer)             飞行时间质量分析器(TimeOfFlightAnalyzer)             离子阱质量分析器(IonTrapAnalyzer)             傅利叶变换离子回旋共振

7、分析器(FourierTransformIonCyclotronResonanceAnalyzer)      c.检测器Detector      d.真空系统VacuumSystem 3MALDI-TOF原理      a.MALDI——MatrixAssistedLaserDesorptionIonization基质辅助激光解析电离   基质对分析物起着溶剂的作用,并且把分析物分子彼此分离开,从而减少了分子间的很强的相互作用力,使分析物簇群形成的可能性减至最小;当激光脉冲照射时,由于基质浓度远高于分析物浓度,确保激光能量大部分被基质吸收

8、而最小限度地照射分析物。   基质分子吸收的能量转变成固体混合物内基质的电子激发能,瞬间使其由固态转变成气态,形成基质离子。在中性分析物和激发出的基质离子、质子及金

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