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1、1902010,Vol.31,No.19食品科学※基础研究应用细胞模型研究蜂胶醇提物的抗氧化活性吴正双1,2，董捷2，张红城2，赵亮亮3，高文宏1,*(1.华南理工大学轻工与食品学院，广东广州510641；2.中国农业科学院蜜蜂研究所，北京100093；3.哈尔滨商业大学食品工程学院，黑龙江哈尔滨150028)摘要：为了研究蜂胶醇提物在细胞内的抗氧化活性(CAA)，本实验将2′,7′-二氯荧光二乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针装载到人肝癌HepG2细胞内，然后被进入到细胞内的2,2′-偶氮二异丁基脒二盐酸盐(ABAP)产生的活性氧氧化成有荧光的二氯荧光(DCF)；以荧光值为指
2、标，使用多功能酶标仪和荧光倒置显微镜分析蜂胶醇提物清除活性氧的能力。结果表明：蜂胶醇提物具有明显的抗氧化活性，并呈现良好的剂量-效应关系。当CAA值达到50时，蜂胶醇提物质量浓度仅0.14mg/mL；当蜂胶醇提物质量浓度为0.5mg/mL时，细胞内的活性氧显著减少，有绿色荧光的细胞数几乎减少一半，清除率接近50%。蜂胶醇提物具有非常好的细胞内抗氧化能力。关键词：人肝癌HepG2细胞；活性氧(ROS)；细胞内抗氧化ApplicationofCellCultureModeltoAntioxidantActivityAnalysisofanEthanolExtractfromPro
3、polisWUZheng-shuang1,2，DONGJie2，ZHANGHong-cheng2，ZHAOLiang-liang3，GAOWen-hong1,*(1.CollegeofLightIndustryandFood,SouthChinaUniversityofTechnology,Guangzhou510641,China；2.BeeResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100093,China；3.CollegeofFoodEngineering,HarbinUniversity
4、ofCommerce,Harbin150028,China)Abstract：Acellularantioxidantactivity(CAA)assayforquantifyingtheantioxidantactivityofanethanolextractfrompropolis(EEP)providedbyBeeResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalScienceshasbeendeveloped.Dichlorofluorescein-diacetate(DCFH-DA)asaprobe,whichiseasil
5、yoxidizedintofluorescentdichlorofluorescein(DCF)byreactiveoxygenspecies(ROS),wastrappedwithincellsandthemethodwasusedtomeasuretheabilityofEEPtopreventtheformationofDCFby2,2′-azobis(2-amidinopropane)dihydrochloride(ABAP)-generatedperoxylradicalsinhumanlivercarcinomaHepG2cellswithmulti-functi
6、onalmicroplatereaderandinvertedfluorescencemicroscope.ThedecreaseincellularfluorescenceintensitycomparedtothecontrolcellsindicatestheantioxidantcapacityofEEP.Inaddition,thisbioactivitydependedondose.TheconcentrationofEEPcorrespondingtoCAAunit50wasonly0.14mg/mL.AROSclearancerateof47.05%wasob
7、tainedatanEEPconcentrationof0.5mg/mL.Keywords：humanlivercarcinomaHepG2cells；reactiveoxygenspecies；cellularantioxidantactivity中图分类号：S896文献标识码：A文章编号：1002-6630(2010)19-0190-04活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)是指化学性(ORAC)法、Fe3+还原(FRAP)法[3-4]。尽管化学方法因为质活泼的氧代谢产物，包括
