八种蜂花粉醇提物的抗氧化活性研究

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1、第五届全国农产品加工科研院所联谊会暨中国农产品加工技术与产业发展研讨会论文集八种蜂花粉醇提物的抗氧化活性研究董捷，张红城，任向楠(中国农业科学院蜜蜂研究所，北京，100093)摘要：目的：研究杏花、茶花、荷花、油菜、荞麦、向日葵、玫瑰、五味子八种蜂花粉醇提物的综合抗氧化’陛能。方法：制备八种蜂花粉醇提物；采用总抗氧化力、还原力、清除DPPH·自由基、清除·oH自由基能力等指标，评价八种蜂花粉醇提物的综合抗氧化性能。结果：这八种蜂花粉醇提物均有较强的总抗氧化力、还原力、清除DPPH·自由基、清除·0H自由基的能力；八种蜂花粉醇提物的综合抗氧化性能由大到小依次为：油菜花粉>五味子花粉>茶花花

2、粉>杏花花粉、玫瑰花粉>荞麦花粉>向日葵花粉>荷花花粉。结论：蜂花粉醇提物是一种优良的天然抗氧化剂。关键词：蜂花粉；醇提物；抗氧化性蜂花粉是指蜜蜂从显花植物中的蜜源植物花药内采集的花粉，经过蜜蜂向其内部加入花蜜和唾液，混合成不规则的扁圆形团状物[1]。蜂花粉中含有丰富的营养成分如必需氨基酸、不饱和脂肪酸、维生素、多酚类和黄酮类物质、多糖等活性物质[2]，有多种生理功能，如抗氧化、抗癌、降低胆固醇和增强免疫等作用。蜂花粉中多酚类和黄酮类物质广泛存在[3]，被认为是有效的抗氧化剂。蜂花粉的种类不同，所含成分有很大区别。因此，研究不同种类蜂花粉的抗氧化作用具有重要的应用价值。本实验从总抗氧化力

3、、还原力、清除DPPH·自由基、清除·oH自由基的能力对八种蜂花粉进行了体外抗氧化活性研究，根据这四种抗氧化指标来综合评价八种蜂花粉醇提物的抗氧化性能。1材料与方法1．1材料八种蜂花粉(杏花、茶花、荷花、油菜、莽麦、向日葵、玫瑰、五味子)，中国农业科学院蜜蜂研究所提供。1．2主要仪器与试剂仪器：Uv一2100型紫外可见分光光度计(UNIC0上海仪器有限公司)；DZF-6090型真空干燥箱(上海一恒科技有限公司)；SY21-K型电热恒温水浴锅(北京长风仪器仪表公司)；HZS-H型水浴振荡器(哈尔滨市东明医疗仪器厂)；PL303型电子分析天平(狐TTLERTOLEDO公司)；TDL-5型低速

4、离心机(上海安亭科学仪器厂)；MSl型漩涡混匀器(上海IKA公司)：KQ-50DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；RH—KT／C型磁力搅拌器(上海IRA公司)：RE-3000型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)主要试剂：三氯乙酸，铁氰化钾，三氯化铁，水杨酸，硫酸弧铁，双氧水，过硫酸钾，磷酸氢二钠，磷酸二二氢钠，无水乙醇，均为分析纯；芦丁(北京化学试剂公司)，DPPH(1，l-diphenyl一2一picrylhydrazyl)(Sigma公司)，ABTS(Fluka公司)，Trolox(Sigma公司)。1．3样品制备取八种蜂花粉分别用80％乙醇进行提取，常温下浸提24h，离

5、心取上清，将上清液旋转蒸发浓缩，真空干燥、称重，该固体为八种蜂花粉的醇提物。以此崮体为溶质，80％乙醇为溶剂配制一定浓度的花粉醇提液，放于棕色瓶中保存，备川。1．4检测指标9第五届全国农产品加工科研院所联谊会暨中国农产品加工技术与产业发展研讨会论文集1．4．1总抗氧化力(Troloxequivalentantioxidantcapacity，TEAC)H1将5mL的7mmol／LABTS和88ul的140mmol／L过硫酸钾混合，形成ABTS+自由基储备液，避光保存，使用前用无水乙醇稀释成工作液，要求其在30℃、734珊波长下的吸光度为0．7±0．02。取1001．tl不同浓度的蜂花粉醇

6、提物溶液，空白管加入100弘l80％乙醇，最后加入2mLABTS+I作液，振荡30S，室温下静置6min后，在734姗处测吸光值变化。按下式计算ABTS+自由基的清除率：清除率=卜(Ai-Aj)／Ao，其中Ai为加入某浓度蜂花粉醇提物溶液的吸光值，Aj为某浓度蜂花粉醇提物溶液的本底值，Ao为不加蜂花粉醇提物溶液的对照值。另以不同浓度的trolox抗氧化剂抑制ABTS阳离子自由基的能力做曲线，利用提取物对清除自由基动力学模型求其IC50(IC50为半抑制浓度，halfinhibinationconcentration)。将trolox的IC50除以样品的IC50作为样品的总抗氧化力。1．4

7、．2还原力嘲依据不同蜂花粉配制不同浓度的溶液，向样品管中加入200ul不同浓度的样品(空白管加200lal80％乙醇)，用蒸馏水定容至1ml，依次加入2．5m1pH为6．6的磷酸缓冲液、2．5m11％铁氰化钾，50℃水浴20min，加入1ml10％---氯乙酸，5000r／min离-5,10min(必要时离心)，取上清2．5m1，加蒸馏水2．5m1，O．1％三氯化铁0．5ml混匀，在700nm下测定吸光值，计算还原力。还原力=(A样