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时间:2018-11-19
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1、太子参醇提物对大鼠组织和红细胞的抗氧化活性论文张振明,葛斌,许爱霞,袁逸铭,高湘【关键词】太子参醇提物AntioxidativeactivityofEPHPHontissuesanderythrocytesofrats【Abstract】AIM:TostudytheantioxidativeactivityofthealcoholicextractfromPseudostellariaheterophyllaPaxetHoffm(EPHPH)anditsmechanism.METHODS:Theperoxidationinhomogenatesofheartandliverandkid
2、neyofratsFe2++ascorbicacid.Malondialdehyde(MDA)inedusingTBAcolorimetricmethodandsuperoxide(O2-)fromzymosanstimulatedneutrophilsofratseasuredbyNBTreductionmethod.H2O2causedhemolysisoferythrocyteseasuredspectrometrically.RESULTS:MDAformationinhomogenatesofheartandliverandkidneyofratsinducedbyHOgen
3、erationsystemFe2++ascorbicacidationinheart,liverandkidneyzymosanstimulatedneutrophilsofratsolysisoferythrocytesolysisoferythrocytes.【Keyolysisextent;erythrocytes;activitiyofantioxidation【摘要】目的:研究太子参醇提物的抗氧化活性及其机制.方法:用HO生成系统Fe2++抗坏血酸诱导大鼠心、肝、肾组织匀浆脂质过氧化,TBA比色法测定MDA含量;NBT还原法测酵母多糖A刺激大鼠中性粒细胞产生的O2-;分光光度
4、法测H2O2诱发的大鼠红细胞溶血度.结果:6.7,13.4,26.8.freel,PHPH)为传统中药,有补肺健脾功效.近年有研究表明太子参总提物对环磷酰胺所致小鼠T、B淋巴细胞转化功能低下及白细胞吞噬功能降低有显著对抗作用,并能增加外周血白细胞数,其水提物有抗氧化作用[1].我们通过实验将太子参醇提物(EPHPH)对大鼠组织和红细胞的抗氧化活性及其机制进行了探讨.1材料和方法1.1材料EPHPH用50mL/LDMSO溶解,硫代巴比妥酸(TBA)为上海试剂二厂产品,氯化硝基四氮唑蓝(NBT)为上海前进试剂厂产品,酵母多糖A为Sigma产品,其它试剂均为进口或国产分析纯.g2+0.8,G
5、lucose10.0,pH7.4)分3次抽洗出腹腔渗出液,4℃,500g×10min离心,弃上清,4倍量Hanks液洗涤及同法离心,洗3次后用Hanks液悬浮,调中性粒细胞计数为1×106/L,低温贮存备用.1.2.5红细胞的制备[2]大鼠断头取肝素抗凝全血,2000g×6min离心,弃血浆,所剩红细胞用4倍量生理盐水洗涤及同法离心,洗3次后用生理盐水悬浮,调红细胞体积分数为0.5%,贮存备用.1.2.6OH生成系统诱发大鼠心、肝、肾匀浆产生丙二醛(MDA)的测定[3]大鼠心、肝、肾用Tris缓冲液(10.0mmol/LTrisHCl,0.1mmol/LEDTA2Na,10.0mmol
6、/L蔗糖,8.0g/LNaCl,pH7.4)制备成5%匀浆,取组织匀浆1mL及药液(对照及空白管加2.5μmol/LDMSO)置反应管,37℃温育10min,除空白管外各管加入50∶50μmol/LFe2++抗坏血酸溶液(终浓度),继续温育30min,用TBA比色法测定MDA含量.1.2.7酵母多糖A刺激大鼠中性粒细胞生成O2-的测定[2]取中性粒细胞悬浮液1mL,按NBT还原法测定O2-,用吡啶作参比,515nm处测A,以NBT还原物甲替的量反映O2-的变化.抑制率=(对照管A-测试管A)/(对照管A-空管A)×100%.1.2.8H2O2诱发大鼠红细胞氧化溶血的测定[2]取红细胞悬
7、浮液1mL,加入100mmol/LH2O2(空白管不加H2O2)及药液,37℃温育1h,加4倍量生理盐水稀释,3000g×6min离心,上清液于415nm处测A.用线性回归求算IC50,溶血度=(测试管A-空白管A)/(对照管A-空白管A)×100%.统计学处理:数据用x±s表示,统计软件SPSS进行分析,组间实验数据显著性差异用单因素方差分析及多组间均数两两比较,受试药量效相关显著性差异用相关性检验分析,P0.05表示差异有统计学意义.2结果
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