昆虫多糖提取技术及其对大豆萌发、水果保鲜的作用

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1、昆虫多糖提取技术及其对大豆萌发、水果保鲜的作用学生：张辉专业：植物保护指导教师:毕锐答辩内容1前言2材料与方法3结果与分析4结论与讨论1前言研究背景昆虫多糖又叫壳聚糖广泛存在于低等动物和低等植物的细胞壁中，是自然界中最丰富的天然高分子化合物之一，具有一些独特的理化性质和生物活性，因而在农业、医药、食品、化妆品、环保等诸多方而具有广阔的应用前景。在农业中主要用于种子处理剂、植物生长调节剂、植物病害诱抗剂、降解性地膜、肥料和土壤改良剂、果蔬保鲜剂等。本试验以粉碎的黄粉虫体壁为原料，通过酸碱处理法提取昆虫多糖。并将提取昆虫多糖，应用到大豆和水果上，探讨其对种子

2、发芽和水果保鲜的作用。2材料与方法昆虫多糖提取技术实验材料:粉碎后黄粉虫（由吉林农业大学资源昆虫教研室提供）试剂及仪器:盐酸（分析纯）,氢氧化钠（分析纯）,醋酸溶液，蒸馏水，N—乙酰葡萄糖胺（生化试剂）。仪器:T6紫外分光光度计，量筒，1000mL烧杯，容量瓶（100ml，50ml各一），烧杯，移液管，洗耳球，研磨机，电子天平（感量为1mg），PH试纸，小勺，玻璃棒，纱网袋，白磁盘，酸碱滴定管，干燥箱，水浴恒温振荡器。试验方法方法1：10%盐酸室温浸泡3h（脱无机盐等）；8%氢氧化钠100℃煮3h（脱蛋白质）；50%氢氧化钠85℃水浴8h（脱乙酰基）。方

3、法2：3%盐酸室温浸8h，8%氢氧化钠100℃煮3h（脱蛋白质），50%氢氧化钠75℃水浴4h（脱乙酰基）。昆虫多糖对大豆种子萌发的影响试验材料：吉农14试验方法：用脱乙酰度85.3%昆虫多糖对大豆进行拌种处理，设1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml共6个浓度梯度，清水对照，3次重复，在培养皿中进行发芽试验，每皿放10粒颗粒饱满，大小一致拌种后的大豆种子，皿中放两层滤纸保湿，在室温条件下进行，每天记录发芽数，第3天统计发芽势（Gv），第七天统计发芽率（G）。Gv=Gt×100%/Gn(Gt：在t日正常发芽的种

4、子数；Gn:供试种子总数)；G=Ga×100%/Gn(Ga：发芽终止时全部正常发芽种子数)；昆虫多糖对圣女果保鲜效果研究试验材料：新鲜圣女果试验方法：制成浓度为0.1mg/ml的昆虫多糖溶液，以新鲜圣女果为试验材料，每组20颗大小一致圣女果，共80颗，浸泡果实5min，设对照。然后冷风吹干,处理后分放到4个塑料盒内室温下保存。在第3d、第4d、第5d、第6d随机选取5颗圣女果,4次重复，统计腐烂率，由于圣女果果实形体较小，试验中以果实发生霉变、果肉质地坍塌、果肉颜色由白色变成褐色界定为腐烂。计算公式为：果实腐烂率(%)=烂果数/总果数×1003结果与分析

5、昆虫多糖的提取及脱乙酰度的测定通过紫外分光光度法获得曲线，测得方法1脱乙酰度可达到83.5%，方法2脱乙酰度达到97%。通过对比两种方法得到样品的脱乙酰度不同可确定第2种方法，3%盐酸室温浸8h（脱无机盐），8%氢氧化钠100℃煮3h（脱蛋白质），50%氢氧化钠75℃水浴4h（脱乙酰基），为较好的酸碱浓度及处理时间。昆虫多糖对大豆种子萌发的影响发芽势结果表明：3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml拌种处理的发芽势均高于对照处理，而1mg/ml、2mg/ml两个处理的发芽势低于对照。6mg/ml拌种处理的大豆种子发芽势最高，达到93%。，4

6、mg/ml、5mg/ml、6mg/ml三个用量拌种处理与对照在1%水平存在差异显著性，但3mg/kg浓度处理与对照无差异显著性。而4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml三个浓度处理之间无差异显著性。因此，结合试验结果和节约成本考虑，选用4mg/ml拌种用量，这与查阅文献所得用量结果相一致。昆虫多糖对圣女果的保鲜作用从图中可可以看出：经昆虫多糖处理后的腐烂率明显低于对照，而且连续三天的腐烂率没有变化均在70%。说明多糖处理后对圣女果有一定的保鲜作用。4结论与讨论本试验通过对比不同酸碱浓度、不同处理时间提取制备昆虫多糖脱乙酰度的大小，明确较好的工艺条件：3

7、%盐酸室温浸8h（脱无机盐），8%氢氧化钠100℃煮3h（脱蛋白质），50%氢氧化钠75℃水浴提取，脱乙酰度可达到90%以上；采用不同质量浓度昆虫多糖处理大豆种子，在壳聚糖溶解放置一段时间后会出现沉淀现象。造成此现象可能是研磨的不够充分；昆虫多糖处理圣女果后腐烂率低于对照其连续3天腐烂率均无变化，说明昆虫多糖对水果具有抗菌防腐的作用。参考文献[1]刘玉升，王付彬，崔俊霞，等.黄粉虫资源研究利用现状与进展[J].环境昆虫学报，2010，32(1)：21~37[2]刘影.酸碱法提取黄粉虫幼虫几丁质及几丁聚糖制备最优条件研究[D]．吉林农业大学，2004,15

8、~29[3]杜开书.黄粉虫壳聚糖的提取及应用研究[D]．四川农业大学，2003,