内分泌与临床内分泌学(I)

《内分泌与临床内分泌学(I)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

总论[内分泌与临床内分泌学]一腺体内分泌学的研究二组织内分泌学的研究三分子内分泌学的研究 [激素的作用机制]一肽类、生物胺和前列腺素♣膜受体与cAMP为第二信使的激素♣膜受体与IP3、Ca2+为第二信使的激素♣胰岛素、膜受体、第二信使不明的激素二类固醇等核受体(胞内受体)激素 [内分泌系统功能调节]★神经和内分泌系的相互调节★内分泌系统的反馈调节★免疫系统与内分泌功能 [内分泌病的分类]一下丘脑二垂体三甲状腺四甲旁腺五肾上腺六胰岛性腺八肾脏异位内分泌综合症十多发性内分泌疾病 [内分泌诊断原则][内分泌防治原则] 第一章总论 内分泌系统1、传统概念：无管道输送激素的腺体垂体——甲状腺（肾上腺、性腺、乳腺、骨）轴系概念2、现代认为：生殖衰老1）人体内分泌腺代谢过程　体内环境稳定脏器功能　适应外界变化生长发育　维持生命2）某些脏器—内分泌组织—体液调节系统3、范围：内科 [内分泌学与临床内分泌学] 分泌学的发展史历史：早在公元前400年《黄帝内经》已有“消渴”“消痒”等记载。春秋战国已有瘿瘤的描述，应用海藻等中药治疗甲状腺肿，近百年分为三个阶段：1：19世纪初——腺体内分泌学研究（发展缓慢，距今230年前），单纯性甲状腺肿——瘿。2：20世纪60年代——组织内分泌学的研究3：20世纪80年代——分子内分泌学的研究 1、内分泌学的研究（1849-1959）——经典内分泌学的研究 内容：内分泌腺体功能及从腺体中提纯激素1）切除腺体功能低下从该腺体中提纯激素替代治疗替代过度功能亢进2）激素的生化、生理、药理性能和制备其衍生物某方面的研究3）主要腺体：垂体甲状腺T3、T4性腺E2、T、P肾上腺F、醛固酮、去甲肾上腺素、肾上腺素乳房泌乳骨骼生长发育皮肤色素、毛发等 2、组织内分泌学20世纪60年代后，放射免疫和免疫细胞化学鉴定（放免应用，60年代后）——APUD系统。 3、分子内分泌学 [激素的作用机制] 一、据受体激素分两大类Ⅰ类Ⅱ类受体质膜受体核受体溶性水溶性脂溶性，载运蛋白结合第二信使CAMP、钙、IP3自身（激素+受体）半衰期短，分钟计长达数小时种类多肽蛋白质（含糖蛋白）、儿茶酚胺类类固醇 二、肽、蛋白质、儿茶酚胺类第二信使激素CAMPCRH胰高血糖素LPH（促脂解激素）CTGHIH2-能儿茶酚胺LH、FSH、HCGADHβ-能儿茶酚胺PTHACTHAT2MSH钙、IP3钙+IP3GnRH（促性腺激素）胆囊收缩素Vasopressin（加压素）胃泌素ATⅡ乙酰胆碱α1-能儿茶酚胺不明GHPRLINS催产素成纤维细胞生长因子IGFⅠ、Ⅱ神经生长因子（NGF）表皮生长因子（EGF）血小板生长因子（EDGF）核受体激素受体E21，25（OH）2-D3FTT3、T4P维甲酸醛固酮 三、膜受体大部分激素为质膜受体，为整合蛋白——分子的大部分嵌入膜内，与部分糖链突出膜外侧（激素识别区）。 1、结合特点1)专一性：与专一的受体结合产生作用，原则上只有一种激素与一种受体结合，少数非此：肾上腺素和去甲肾上腺素对不同的靶细胞则有α、等受体，与不同受体结合产生不同的效应。同一靶细胞受体与不同激素结合产生相同的效应。2)高度亲和力：激素在细胞外液中浓度只有10-8—-12mmol/L，靶细胞能对微小的改变做出迅速的明显反应，排除诸多的高浓度大分子的蛋白等干扰。3)结合反应的可逆性4)结合可饱和性：在一定范围内激素浓度升高，与受体结合增多，效应增强，达到一定程度饱和。此时，浓度继续升高，结合不增多。 2、膜受体激素调节原理◆化学本质蛋白质、多肽、儿茶酚胺类（第一信使）激素与受体结合复合物，受体构象改变触发鸟苷酸结合蛋白（guanylatebindingprotein,简称G蛋白）（G，Gs）与GPT结合，生成G-GTP，为GTP的活化形式可激活或抑制细胞内测缘的腺苷酸环化酶（adenylatecyclase,AC）催化ATP产生第二信使CAMP一系列反应效应（激素的作用）。以上为E.Sutherlad50年代提出的：Secondmessengertheory——第二信使学说。 肾上腺与膜α2受体结合时，能抑制AC活性，使CAMP减少。肾上腺与膜β受体结合时，能使AC活性升高，使CAMP增多前者为抑制性（inhibitory,I,Hi,Gi,Ri）后者为兴奋性（stimutory,S,Hs,Gs,Rs）HsHiGTPGTPGDP-αsββ、γβ、γGDP-αβ1γ无活性GDPGDPγ无活性ACGDP-αsGDP-αi(＋)(－)ATPcAMP 受体的结构与功能与激素结合受体功能传导信息 传递信息的机制和方式 受体本身构成离子通道◆当结合域与配体结合后受体变构使通道关闭或开放，引发或阻断阳离子或阴离子的流动传递信息。如：①乙酰胆碱受体：神经元的烟碱型（N型）乙酰胆碱受体，由5个亚基在细胞膜内呈五边型排列，围成离子通道，当它与乙酰胆碱结合时，膜通道开放，膜外的阳离子（钠离子）内流，引起突触后膜的电位变化。②γ氨基丁酸受体有A、B两种亚型。 2、受体—G蛋白—效应蛋白质型各种信息物质与细胞受体结合后受体变构激活效应蛋白质（酶或其他蛋白质）催化一些小分子化学物质（第二信使，真核细胞内为G蛋白）进入细胞液内引起相应生物效应。 H+R后G蛋白αβγ三聚体1）可结合调节α亚①鸟苷酸基的功能②GDP③GTP2）GTP酶活性，可水解GTPG蛋白受体激活αβγGDP无活性三聚体G蛋白αβγGTPβγ游离使激素受体分离G蛋白αGTP激活ACCAMP产生第二信使效应 胰岛素样生长激素肽类激素神经递质生长因子催乳素神经递质氨基酸细胞因子前列腺素含内在激酶与激酶连接偶联G蛋白配基把闸的的受体的受体的受体离子通道酪氨酸激酶受体外AC、AG丝氨酸激酶酪氨酸激酶磷脂酶C苏氨酸激酶底物第二信使cAMP、IP3Ca2+、Na+cGMP、Ca2+、DAGK+、Cl+蛋白磷酸化蛋白磷酸化蛋白磷酸化磷酸化介导的生物作用非磷酸化介导生物作用酶活性增强或抑制DNA和RNA合成,蛋白合成膜功能:葡萄糖,氨基酸转运,细胞生长和分化 膜表面受体作用机制激素图1膜反应膜生物效应IP3：三磷酸甘油Tyr-P：酪氨酸蛋白激酶DAG：二脂酰甘油，激活蛋白激酶C第二信使环磷腺苷、钙、DAG、Tyr-P环鸟腺苷、IP3酶抑制或激活蛋白质合成核内DNA、RNA合成细胞运输 3、受体—酪氨酸蛋白激酶型◙胰岛素、生长因子的受体本身具有酪氨酸蛋白激酶活性(tyrosinekinase)，有跨膜糖蛋白、胞外部分结合区。 图二类别：受体激素G蛋白耦联受体配体：胰岛素、多肽、生物胺生长因子、前列腺素HHRRG效应物酪氨酸蛋白激酶磷酸化介导作用蛋白激酶第二信使NH3＋NH3＋S-S富含半胱氨NH3＋S-SS-SNH3＋酸域COO－COO－P-TyrTyr-PP-Tyr酪氨酸蛋白激酶域Tyr-PCOO－COO－胰岛素受体模式 4．受体转录因子型——细胞内受体（类固醇、甲状腺激素）受体C端有结合区，邻近该结合域有N端DNA结合域，共60个氨基酸组成。 作用机理受体调控区（易变）结合区（高度保守）结合DNA二个锌指形成蛋白表面，与激素结合前，与热休克蛋白结合结合激素后，热休克蛋白解离受体激活激活激素的启动因子结合区+热休克蛋白R调控区促进转录，mRNA＋H受体构象改变、激活转录、mRNA形成 核受体的作用机制图三类固醇激素膜内受体mRNA蛋白质合成T3、T4维甲酸 三．胞内受体激素的调节主要激素☆类固醇激素：E、P、T、1,25(OH)2D3、F、Aldo☆胺类：甲状腺激素、维甲酸（受体存在于细胞浆内）激素为脂溶性，自由通过细胞膜，在细胞中与受体结合刺激受体变构有活性的激素受体复合物进入核中，识别染色质上DNA区段并与其结合基因活化促进特异mRNA转录增进效应蛋白或酶的合成。H+代谢应答蛋白酶mRNAmRNA转录R 类固醇激素的作用机制细胞质细胞核受体结合类固醇活化的类固醇反应元件mRNA受体复合物染色质DNA前体类固醇受体类固醇复合体mRNA结合和转位mRNA粗面内质网核糖体生物反应蛋白合成 类固醇激素及甲状腺激素、维甲酸类促进蛋白质及酶的合成激素靶组织合成蛋白质或酶糖皮质激素肝：酪氨酸转氨酶、色氨酸加氧酶肝及视网膜：谷氨酸合成酶肾：磷酸烯醇丙酮酸羧激酶输卵管：卵清蛋白垂体：前阿片黑皮素原雌激素输卵管：卵清蛋白、溶菌酶肝：Apo-VLDL孕酮输卵管：卵清蛋白、抗生物素蛋白子宫：子宫珠蛋白雄激素前列腺：醛缩酶肾：β-葡糖苷酸酶输卵管：清蛋白1,25(OH)2D3肠：钙结合蛋白甲状腺素肝：甲酰磷酸合成酶、苹果酸酶垂体：生长素 [内分泌系统的功能调节] 一、神经和内分泌系统的相互调节神经系统内分泌系统CRHACTH下丘脑垂体后叶GRH、GHIHGH调节GnRHLH、FSHNE、DA、Ach、5-HT肿瘤性早熟甲状腺激素下降呆小F减少激动 二、内分泌系统的反馈调节下丘脑、垂体、靶腺激素下丘脑TRH兴奋，分泌激素增多（+）(－)后者反作用于垂体和下丘脑垂体TSH对相应激素起兴奋作用为正反馈（+）(－)对相应激素起兴奋作用为负反馈甲状腺T3、T4 三、免疫系统与内分泌系统免疫球蛋白、淋巴因子、细胞因子、白介素、ACTH、皮质醇神经、内分泌、免疫三个系统. [内分泌病的分类]功能亢进减退部位原发性继发性病因：遗传、自身免疫、炎症、肿瘤、手术、放射等 一、下丘脑：功能性、器质性 二、垂体下丘脑—垂体性尿崩症☆下丘脑—神经垂体病抗ADH分泌失调症功能亢进：巨人症、肢端肥大症☆腺垂体垂体侏儒症功能减退席汉氏、西蒙氏垂体瘤☆空泡蝶鞍 三、甲状腺功能性亢进、减退单纯性甲状腺肿甲状腺炎急性亚急性慢性淋巴细胞性甲状腺结节和肿瘤甲状腺先天性缺陷、异位、畸形 四、甲状旁腺◆甲旁亢◆甲旁减◆假性甲旁减 五、肾上腺急性：危象♦皮质疾病减退慢性：Addison’s♦糖皮质激素亢进：Cushing’s♦盐皮质激素：原发性醛固酮增多症♦性激素：先天性 六、胃肠、胰岛DM胰岛素瘤胰高血糖瘤胃泌素瘤舒血管肠肽瘤生长抑素瘤类钙 七、卵巢囊肿、肿瘤 八、睾丸减退肿瘤 八、肾脏Batter’s肾素瘤 十、非内分泌瘤引起的异位激素分泌综合症 十一、多发性内分泌病多内分泌腺肿瘤Ⅰ型Wermer综合症Ⅱ型Sipple综合症Ⅲ型神经节瘤伴类马凡征多腺体自身免疫病Schmidr综合症：甲减+糖尿病+Addison’s [内分泌病诊断原则]一、功能诊断◆症状+体征◆实验室：1）代谢紊乱证据2）激素分泌异常3）内分泌动态功能试验◆放射性同位素◆细胞穿刺◆骨密度仪测定二、定位诊断◆同位素扫描◆CT、MRI◆B超三、病因诊断◆免疫学鉴定◆组织病理鉴定◆细胞染色体、HLA鉴定遗传基因 [内分泌疾病防治原则]多切、少补 谢谢 2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaMaJ7F4C0z)w&s!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G4D1A-w*t$qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfNcK9H5E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3C0y)v%s#pXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNbK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C0z)w&s!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQhQeNbJ8G4D1A-w*t$qYnVjSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1z-w*t!qYnVjSgOdLaI6F3C0y)v%s#pXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4D1z-w&t!qYmVjSgOdL9I6F3B0y)v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2A+x(u$rZoWkThPeMbJ7G4D1z-w&t!qYmVjSgOdLaI6F6F3B0y)v%s#oXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXmUiRfNcK9H5E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C0z)w&s!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G4D1A-w*t$qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfNcK9H5E2B+x(u$rZoWkTkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3C0y)v%s#pXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C0z)w&s!p!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G4D1A-w*t$qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1z-z-w*t!qYnVjSgOdLaI6F3C0y)v%s#pXpXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1z-w*t!qYnVjSgOdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2A+x(u$rZoWkThPeMbJ7G4D1z-w&t!qYmVjSgOdL9I6F3B0y)v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI6F3C0y)v&s#pXlUiRfNcK9H5E2A+x(u$rZoWkThPeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZrZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F3C0z)v&s!pXmUiRfOcK9H6E2B+x(u%rZoWlThQeMbJ8G4D1A-w*t!qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfNcK9H5E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdLdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C0z)w&s!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G4D1A-w*t$qYnVjSgPdLaI7F3C0y)v&s#pXmUiRfNcK9H9H5E2B+x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYnVjSgOdLaI6F3C0y)v%s#pXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZnWkThPeMbJ7G4C1z-w&t!qYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOcL9I6E3B0y(v%r#oXlTiQfNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C0z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkSgPdMaI7F4C0z)v&s&s!pXmUjRfOcK9H6E2B+y(u%rZoWlThQeNbJ8G4D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3C0z)v&s#pXmUiRfOcK9H5E2B+x(u%rZoWkThQeMbJ8G4D1z-w*t!qYnVjSgOdLaI6F3C0y)v%s#pXlUiRfNcK8H5E2A+x(u$rZoWkThPeMbJ7G4D1z-w&t!qYmVjSgOdL9I6F3B0y)v%s#oXlUiQfNcK8H5D2A+x*u$rZnWkShPeMaJ7G4C1z)w&t!pYmVjRgOdL9I6E3B0y(v%s#oXlTiQfNbK8H5D2A-x*u$qZnWkShPdMaJ7F4C1z)w&s!pYmUjRgOcL9H6E3B+y(v%r#oWlTiQeNbK8G5D1A-x*t$qZnVkShPdMaI7F4C0z)w&s!pXmUjRfOcL9H6E2B+y(u%r%r#oWlThQeNbJ8G5D1A-w*t$qYnVkSgPdLaI7F3