云南赛葵上双生病毒的分子鉴定

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1、浙江大学硕士学位论文云南赛葵上双生病毒的分子鉴定摘要双生病毒在云南烟草、番茄以及赛葵、稀硷等多种作物和杂草上广泛发生，并已造成严重危害。杂草是双生病毒重要的中间寄主和初侵染源，为此我们对云南赛葵上的双生病毒开展了研究。Y278分离自云南保山的赛葵，全序列测定表明，它与赛葵黄脉病毒(MYVV)的同源性最高，仅为87．O％，因此它是双生病毒新种，命名为赛葵保山黄脉病毒(MalvastrumyellowveinBaoshanvirus，MYVBSV)。序列比较发现MYVBSV●可能是由MYVV和类似于黄花捻曲叶病毒(SiLCV)的病毒重组产生的。从云南赛

2、葵样品Y277、Y278和Y281中分离到中国番茄黄曲叶病毒TYLCCNV的DNA．A序列及其伴随的DNA[3序列。对Y278DNA．A分子和Y277、Y278、Y281的DNAl3分子进行了全序列测定。Y278DNA．A序列和TYLCCNV-[Y264】同源性达100％；三个DNAfl序列也和TYLCCNV：伴随的DNAIB同源性最高，达97．0"-99．7％。因此，赛葵是TYLCCNV的寄主。来自云南保山的赛葵样品Y277，全序列测定表明，它与云南赛葵黄脉病毒(MYVYNV)的同源性最高，为99．6％。构建了Y277DNA．A的侵染性克隆。DN

3、A．A单独接种以及DNA．A和MWYNVDNAl3混合接种均可系统侵染本氏烟，DNAl3对于Y277DNA．A的侵染不是必需的。DNAIB虽然不是症状的诱导因子，但伴随其辅助病毒DNA．A共同侵染时能加重病害症状，而且DNA[3可以显著增强DNA．A在植物中的积累。．对来自云南不同地区表现黄脉症状的22个赛葵样品进行了复合侵染分析。检测结果显示，大部分样品受到两种以上病毒的侵染，而且大部分是以begomoviruses／DNAl3病害复合体的形式存在的。从云南不同地区的赛葵的多个样品分离到了赛葵保山黄脉病毒和中国番茄黄曲叶病毒的特异性片段，说明这两

4、类病毒在赛葵上是普遍存在的。关键词：赛葵；begomovirus；DNA-A；DNAp；复合侵染浙江大学硕士学位论文云南赛葵上双生病毒的分子鉴定AbstractGeminiviruseshavebeenreportedinfectingcropsandweedssuchastobacco，tomato，MalvastrumcoromandelianumandSiegesbeckiaorientalisandhavecausedsignificantyieldlossesinYunnanProvince．Weedsaleimportantaltema

5、tivehostsforgeminiviruses．SoresearchworkswerecardedouttoidentifyvirusesinfectingMalvastrumcoramandelianumplantsinYunnanprovince，IsolateY278WascollectedfromMalvastrumcoromandelianuminBaoshan，Yunnan．ThecompleteDNA—AsequenceofY278hasthehighestsequenceidentity(87．O％)withthatofMalv

6、astrumyellowveinvirus．Soitisadistinctbegomovirus，forwhichthenalTleMalvastrumyellowveinBaoshanvirus(MYVBSV)isproposed．SequencecomparisonindicatesthatY278probablyhavearisenfromrecombinationbetweenMalvastrumyellowveinviru(MYVV)andvirusesrelated．withSida比afcurlvirus(SiLCV)．Tomatoy

7、ellowleafcurlChinavirus(TYLCCNV)DNA-AandassociatedDNAl3moleculeswereisolatedfromthreeMalvastrumcoromandelianumsamplesinYunnan．Y278DNA-AandDNA[3fromY277，Y278andY281weresequenced．ComparisonswithotherbegomovirusesshowedthatY278DNA—AismostcloselyrelatedtoTYLCCNV-[Y264】with100％nucl

8、eotidesequenceidentity．ThethreeassociatedDNA[3sharesthehighes