大鼠DRG加压培养细胞模型建立和持续压迫对DRG上TRPV4表达的影响

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1、山东大学硕士学位论文论文一：大鼠背根神经节神经元加压培养细胞模型的建立研究生：王艳琴导师：岳寿伟教授专业：康复医学与理疗学中文摘要目的：建立大鼠背根神经节(Dorsalrootganglion，DRG)细胞加压培养模型，观察在恒定压力下培养24h和48h的神经元形态和活性的变化，评价这种神经元加压培养模型的优缺点。方法：取新生Wistar大鼠腰背段全部DRG，将处理好的DRG神经元进行培养，根据受压时间，将神经元随机分为正常对照组、受压24h组、受压48h组，在80mmHg压力的密闭环境中培养相应时间后观察各组神经元在荧光显微镜和电镜下的形态学特点，并用MTT法分析各组神

2、经元细胞生长活性的改变。结果：①荧光显微镜下观察加压培养组DRG神经元形态较正常未受压组五无明显差异。②超微结构示加压48h组和24h组神经元较正常组线粒体肿胀明显，粗面内质网缩短，变少，游离核糖体增多，部分核固缩，神经元代谢水平下降。③MTT法比较加压前、后各组神经元活性的差异无统计学意义。结论：加压培养未对DRG神经元活性产生显著影响，此模型可观察机械压力单一因素对神经元的影响，有望成为一种在亚细胞和分子水平研究机械压力对DRG神经元的影响的有效细胞模型。关键词：背根神经节；细胞模型；机械刺激；压力；大鼠2山东大学颈士学位论文ESTABLlSHMENTOFANOVEL

3、COMPRESSlNGMODELOFPATDORSALROOTGANGLl0NNEURONSlNVlTROPostgraduate：WangYanqinTutorProf：YueShouweiMajor：RehabilitationABSTRACTObjective’Toestablishacompressingmodelofratdorsalrootganglionneuronsinvitroandobservethechangesinappearanceandactivityinculturedratdorsalrootganglion(DRG)neuronsunde

4、rconstantpressure(80mlHg)anddifferenttimeintervals，thenmademodestevaluationabouttheadvantagesanddisadvantagesoftheneuronculturemodel．MethodsAccordingtothepressureexertingtime．theculturedDRGcellswasassignedtothreegroups：24hgroup，48hgroupandnormalcontrolgroup，thechangesofappearanceandactivi

5、tyweredemonstratedbyfluorescentmicroscope、transmissionelectronmicroscopyandMTTassay．ResultsTherewasnosignificantdifferenceamonggroupsunderfluorescentmicroscope．Inthe24hgroupand48hgroup，comparedwithcontrolgroup，theelectronmicroscopyresultsofultra-structuresuggestedthatbeingculturedinthehig

6、h—pressureenvironmentwouldinfluencethemetabolismofneurons：thenumberoftheroughendoplasmicreticulumdecreased，anditslengthwasshorten，mitochondrionswelledandsomenucleolusconcentrated，electronmicroscopealsoshowedtheincrementoffreeribosomeeta1．NosignificantactivitychangeswasdetectedbygrTmethoda

7、monggroups(P>O．05)．ConclusionThenovelcompressingmodelofDRGneuroncouldavoidthedefect0fmodelsinvivo，wehavetheconveniencetoobservethefunctionofsinglepressurefactorexactly，themodelwouldprovideaneffective3山东大学硕士学位论文toolforthestudiesoftheeffectofmechanicalcompressiontowar