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1、研究大鼠马尾神经急性压迫性损伤模型的建立【目的：建立一种大鼠马尾神经急性受压性损伤的动物模型.方法：将36只SD大鼠随机分为对照组(A组),1d实验组(B组),7d实验组（C组）及21d实验组(D组),每组动物9只.将平头金属螺钉自L6椎板紧贴棘突拧进各实验组大鼠椎管,取术后1，7，21d不同时间的动物采用联合行为评分（CBS）、测定脊髓诱发电位（SCEP）潜伏期值进行综合评判,并取骶髓进行H?E染色，观察脊髓神经元形态学改变.结果：在螺钉拧进椎管后,H?E染色显示大鼠骶髓前角细胞发生明显的形态改变,术后的CBS评分1d：(17.89±1.27)分，7d：(9.78
2、±1.30)分，21d：(9.33±1.41)分;脊髓诱发电位(SCEP)潜伏期值1d：(4.29±0.51)ms，7d：(4.35±0.54)ms，21d：(4.91±0.53)ms,和对照组相比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论：建立的马尾急性压迫性损伤模型,操纵简便,重复性好,为进一步探究马尾急性压迫损伤奠定了基础.【马尾；急性损伤；疾病模型，动物；大鼠 马尾神经损伤大多是由于马尾神经的直接压迫所致,最常见的是腰椎间盘急性突出和下腰椎爆裂性骨折［1-3］,临床主要表现为鞍区感觉、排尿、排便以及双下肢功能障碍,一旦发病治疗效果不甚满足［4］.为了
3、寻求新的更有效的治疗药物或方案，需要有可靠性高、重复性好的病理模型．近年来各国学者制作了多种动物模型［5-6］.但由于上述探究中须手术施行部分椎板切除,手术操纵较复杂,局部创伤大,四周组织结构也遭到不同程度的破坏.我们根据马尾神经损伤的临床特征，从急性压迫性损伤角度出发,采用了体积较小、实验使用频率较高的大鼠建立动物模型,马尾神经一次压迫到位,术后观察持续压迫所致的行为学改变、电生理传导改变、组织病理学改变等,以综合评价制作该模型手术操纵可靠性及可重复程度，为进一步探究马尾神经压迫损伤奠定基础. 1材料和方法 1.1材料 36只清洁级雄性SD大鼠,体质量190
4、～210g,由第四军医大学实验动物中心提供.选用不锈钢医用指骨自攻螺钉,锉平钉头,改装成直径1.5mm,螺距0.5mm,长5mm的平头加压螺钉.E?8000诱发电位仪(丹麦丹迪公司);莱卡LA全自动显微镜配美国Pixera600C数码摄像头彩色病理图文分析系统,由第四军医大学西京医院全军骨科探究所实验室提供. 1.2方法 1.2.1动物制模及分组 动物术前1d行腰骶部备皮,手术时用10g/L戊巴比妥钠(5mL/kg)腹腔麻醉,取背正中切口显露L6～S1的椎板,于L6椎板和棘突移行部中点行椎板钻孔,将平头加压螺钉放置于椎板孔中,利用其自攻特性,稍微加压旋进椎管,
5、根据旋进圈数控制进进的深度即0.5mm/圈.将36只SD大鼠随机分为4组：A组(对照组),施行后路切开、椎板钻孔手术,不放置加压螺钉,因而不产生压迫；B组,放置加压螺钉压迫马尾神经1d；C组,放置加压螺钉压迫马尾神经7d；D组,放置加压螺钉压迫马尾神经21d.B，C，D组在X线透视下将加压螺钉植进椎管矢状径的1/2,形成马尾神经的压迫性损伤. 1.2.2行为学观察 分别对各组大鼠于术前1d，术后1，7和21d，参照文献［7］的方法，采用改良联合行为(binedbehavioralscore,CBS)标准,进行脊髓神经功能评分:双后肢运动(42分),尾部运动(8分
6、),伸趾(5分),放置(5分),对拉伸、疼痛、压力刺激的回缩反射(每项各5分,共15分),翻身反射(5分)和斜板试验(20分)等7项评定.正常者为0分,全瘫者为100分. 1.2.3电生理检查 术前1d,术后1，7和21d检测并记录各组大鼠脊髓诱发电位(spinalcordevokedpotential，SCEP)潜伏期值(ms)的变化,即神经传导时间的变化.10g/L戊巴比妥钠(5mL/kg)腹腔麻醉,使用E?8000诱发电位仪,室温28℃,刺激电极置于膝关节后下方,刺激胫后神经,刺激电流为6mA,以足趾微动为宜,记录电极置于L1-2棘突间,参考电极在刺激上方
7、2cm处. 1.2.4病理学观察 A组于术后21d及B，C，D组分别于术后1，7和21d用10g/L戊巴比妥钠(5mL/kg)腹腔麻醉,自左心室插至升主动脉,快速灌注生理盐水100mL,剪开左心耳放血,待流出的液体清亮后,灌注40g/L多聚甲醛磷酸缓冲液400mL固定2h,然后从后路打开椎板显露脊髓和腰骶神经根,切取脊髓圆锥,取下的脊髓标本放置于40g/L多聚甲醛磷酸缓冲液固定48～72h,常规石腊包埋,连续切片,片厚5μm．做苏木素?伊红(HE)染色,光镜观察.统计学处理：用SPSS14.0统计软件进行统计分析,所得实验数据以x±s表示,所用统计分析方法为
