大鼠马尾神经急性压迫性损伤模型的建立论文

《大鼠马尾神经急性压迫性损伤模型的建立论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、大鼠马尾神经急性压迫性损伤模型的建立论文【摘要】目的：建立一种大鼠马尾神经急性受压性损伤的动物模型.方法：将36只SD大鼠随机分为对照组(A组),1d实验组(B组),7d实验组（C组）及21d实验组(D组),每组动物9只.将平头金属螺钉自L6椎板紧贴棘突拧入各实验组大鼠椎管,取术后1，7，21d不同时间的动物采用联合行为评分（CBS）、测定脊髓诱发电位（SCEP）潜伏期值进行综合评判,并取骶髓进行HE染色，观察脊髓神经元形态学改变.结果：在螺钉拧入椎管后,HE染色显示大鼠骶髓前角细胞发生明显的形态改变,术后的CB

2、S评分1d：(17.89±1.27)分，7d：(9.78±1.30)分，21d：(9.33±1.41)分;脊髓诱发电位(SCEP)潜伏期值1d：(4.29±0.51)ms，7d：(4.35±0.54)ms，21d：(4.91±0.53)ms,与对照组相比较差异均有统计学意义(P0.05).结论：建立的马尾急性压迫性损伤模型,操作简便,重复性好,为进一步研究马尾急性压迫损伤奠定了基础.【关键词】马尾；急性损伤；疾病模型.freelm,螺距0.5mm,长5mm的平头加压螺钉.E8000诱发电位仪(丹麦丹迪公司);莱卡L

3、A全自动显微镜配美国Pixera600C数码摄像头彩色病理图文分析系统,由第四军医大学西京医院全军骨科研究所实验室提供.1.2方法1.2.1动物制模及分组动物术前1d行腰骶部备皮,手术时用10g/L戊巴比妥钠(5mL/kg)腹腔麻醉,取背正中切口显露L6～S1的椎板,于L6椎板与棘突移行部中点行椎板钻孔,将平头加压螺钉放置于椎板孔中,利用其自攻特性,轻微加压旋入椎管,根据旋入圈数控制进入的深度即0.5mm/圈.将36只SD大鼠随机分为4组：A组(对照组),施行后路切开、椎板钻孔手术,不放置加压螺钉,因而不产生压迫；B

4、组,放置加压螺钉压迫马尾神经1d；C组,放置加压螺钉压迫马尾神经7d；D组,放置加压螺钉压迫马尾神经21d.B，C，D组在X线透视下将加压螺钉植入椎管矢状径的1/2,形成马尾神经的压迫性损伤.1.2.2行为学观察分别对各组大鼠于术前1d，术后1，7和21d，参照文献［7］的方法，采用改良联合行为(binedbehavioralscore,CBS)标准,进行脊髓神经功能评分:双后肢运动(42分),尾部运动(8分),伸趾(5分),放置(5分),对拉伸、疼痛、压力刺激的回缩反射(每项各5分,共15分),翻身反射(5分)和斜

5、板试验(20分)等7项评定.正常者为0分,全瘫者为100分.1.2.3电生理检查术前1d,术后1，7和21d检测并记录各组大鼠脊髓诱发电位(spinalcordevokedpotential，SCEP)潜伏期值(ms)的变化,即神经传导时间的变化.10g/L戊巴比妥钠(5mL/kg)腹腔麻醉,使用E8000诱发电位仪,室温28℃,刺激电极置于膝关节后下方,刺激胫后神经,刺激电流为6mA,以足趾微动为宜,记录电极置于L1-2棘突间,参考电极在刺激上方2cm处.1.2.4病理学观察A组于术后21d及B，C，D组分别于术

6、后1，7和21d用10g/L戊巴比妥钠(5mL/kg)腹腔麻醉,自左心室插至升主动脉,快速灌注生理盐水100mL,剪开左心耳放血,待流出的液体清亮后,灌注40g/L多聚甲醛磷酸缓冲液400mL固定2h,然后从后路打开椎板显露脊髓和腰骶神经根,切取脊髓圆锥,取下的脊髓标本放置于40g/L多聚甲醛磷酸缓冲液固定48～72h,常规石腊包埋,连续切片,片厚5μm．做苏木素伊红(HE)染色,光镜观察.统计学处理：用SPSS14.0统计软件进行统计分析,所得实验数据以x±s表示,所用统计分析方法为单因素方差分析,P0.05为差

7、异有统计学意义.2结果2.1脊髓神经功能评分对照组大鼠麻醉苏醒后,双后肢运动逐渐恢复,1d后即与术前无明显差别.各实验组大鼠术后1d仍可见双后肢跛行,甩尾无力；术后1～21d神经功能有不同程度恢复,但对牵拉、疼痛、压力刺激的回缩反应减退,甩尾无力.术后CBS评分各实验组与对照组相比差异具有统计学意义(P0.05，表1).表1各组的CBS评分比较(略)2.2诱发电位检测马尾神经受到急性压迫后,脊髓诱发电位(SCEP)潜伏期值增大,神经传导时间延长,各组SCEP潜伏期值结果比较见表2.A组单纯椎板钻孔,潜伏期值无明显变化

8、(P0.05),A组与B，C，D组间术后各时间点SCEP潜伏期值的变化有显著性差异(P0.05),B，C，D组内压迫前与压迫后均有显著性意义(P0.05),实验组术后1d与术后21d潜伏期值的变化差异具有统计学意义(P0.05).表2手术前、后SCEP潜伏期值的比较(略)2.3细胞形态学观察对照组:骶髓前角细胞结构正常,分布、着色均匀(图1A)