雷公藤多甙对佐剂性关节炎大鼠L5 DRG内SP、CGRP表达的影响.doc

《雷公藤多甙对佐剂性关节炎大鼠L5 DRG内SP、CGRP表达的影响.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、雷公藤多甙对佐剂性关节炎大鼠L5DRG内SP、CGRP表达的影响【摘要】ObjectiveToexploretheeffectsofpolyglycosidesofTripterygiumWilfordiiHookF(TⅡ)ontheexpressionofSP、CGRPinL5dorsalrootganglionofAdjuvantArthritisratsmodel.MethodsAdjuvantArthritisratswerefedbyTⅡpreventionandthrapyfor7days,toobservethenumberandpercentage

2、ofSP、CGRPpositiveneuronsamongtotalneuronsinbilateralDRG(L5).ResultsSP、CGRPexpressioninneuronsofL5DRGinbilateralsideinTⅡpreventivegroupandtherapeuticgroupdecreasedapparentlyascomparedwiththatofAAmodelgroup.ConclusionTⅡmayplayapreventiveandtherapeuticrolebydecreasingtheexpressionofSPand

3、CGRPinL5dorsalrootganglion.【关键词】polyglcosidesofTripterygiumWilfordiiHookF；adjuvantarthritis；substanceP；calcitoniongenerelatedpeptide近年来科学研究表明神经系统对正常免疫功能的维持和免疫功能紊乱的发生至关重要。类风湿关节炎（rheumatoidarthritis，RA）是一种常见的自身免疫性疾病，多种细胞因子和炎症介质参与了RA发病，引起滑膜细胞增生、致炎、软骨破坏、关节畸形；此外，神经递质也参与了上述病变过程并且与疼痛传导有关。类风湿

4、关节炎滑膜腔中有多种神经递质：如P物质（substanceP，SP）、降钙素基因相关肽（Calcitoniongenerelatedpeptide，CGRP）、神经肽Y(NeuropeptideY，NPY)。SP、CGRP等神经递质主要在脊神经节的初级感觉神经元胞体内合成，当关节炎发生时，其合成也发生相应变化。这些神经递质释放到关节腔后，能够与相应受体结合，引起关节内环境改变，介导神经源性炎症反应。中药雷公藤多甙（polyglycosidesoftripterygiumofwilfordiihookF,TⅡ）对RA具有良好的治疗作用。在以往的实验中也观察到TⅡ对佐

5、剂性关节炎（adjuvantarthritis,AA）大鼠具有预防和治疗作用［1］。TⅡ的这种防治作用是否与影响相应脊神经节内神经递质的表达有关呢？这方面研究国内外尚未见报道。由于支配下肢的神经由L4～L6脊神经节发出，因此本实验通过观察应用雷公藤多甙预防和治疗佐剂性关节炎大鼠后，L5背根节内SP、CGRP表达的变化，为TⅡ作用机制的研究提供实验依据。1材料1.1实验动物成年SD雌性大鼠20只，200g，2～3月龄，由四川大学实验动物中心提供。动物随机分为4组，每组5只。各组动物分笼饲养。1.25主要实验仪器HH-L数显恒温水浴锅(江苏金坛荣华仪器制造有限公司)；

6、艾柯实验室专用超纯水系统(成都唐氏康宁科技发展有限公司)；HM31石蜡切片机(德国MICROM公司)。1.3主要试剂①第一抗体：兔抗SP、CGRP多克隆抗体（武汉博士德公司，效价为1∶200）；②SP免疫组化染色试剂盒（ZYMED）③浓缩型DAB试剂盒ZLI（SantaCruz）。2实验方法2.1实验动物分组及处理动物随机分为4组，每组5只，并分别予以相应处理：A组（正常组）不造模，不给药物治疗；B组（模型组）于实验开始后，分别在各个大鼠左后足垫部皮下注射氟氏完全佐剂（Freund'sCompleteAdjuvant，FCA，Sigma公司产品）0.2ml，不给药

7、物治疗；C组（TⅡ预防组，TⅡ为湖南株州制药三厂产品）造模方法同模型组，造模后第7天开始灌胃给予TⅡ，用药剂量以大鼠体表面积换算公式计算，即1/d，TⅡ30mg·kg-１/次，共7天；D组（TⅡ治疗组）造模方法同模型组，造模后第19天开始灌胃给予TⅡ，1/d，TⅡ30mg·kg-1/次，共7天。2.2灌注和取材造模28d灌注固定后取材，取双侧L5DRG后固定12h，分别经50%、60%、70%、80%、90%、95%、100%梯度酒精脱水各30min，入氯仿Ⅰ、氯仿Ⅱ各透明30min，石蜡包埋后用石蜡切片机连续切片，片厚7μm，各组每例L5DRG等距离间隔取片，取

8、片2组,每